微生物检验实验室诺卡菌属标准操作规程.doc

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1、微生物检验实验室诺卡菌属标准操作规程1概述诺卡菌属是一群需氧的、能形成气中菌丝、有孢子的革兰阳性菌。包括9个种，其中星形诺卡菌、巴西诺卡菌、皮诺卡菌、豚鼠耳炎诺卡菌、南非诺卡菌、新星诺卡菌等6个种与人类疾病有关。2. 标本类型痰液、脑脊液、穿刺液、脓液、血液等标本。3 鉴定3.1 态与染色：革兰阳性，菌体为丝状，称为菌丝或菌丝体。培养早期，菌体裂解为较多的球菌或杆菌状，分枝状菌丝较小；培养后期，可见丰富菌丝体形成。在脓液、痰和脑脊液等临床标本中，为纤细的分枝状菌丝。抗酸染色弱阳性。3.2 培养特性：注意寻找标本中的颗粒接种培养，在不含抗生素的沙氏培养基（SDA）或营养琼脂培养基上，22或35均

2、可缓慢生长，需57天可见菌落。菌落表面有皱褶，呈颗粒状、黄色或深橙色，表面无白色菌丝。在血琼脂平板上菌落较小、凸起，呈白色，时间延长可出现橙色。3.3 生化反应：分解葡萄糖，不分解甘露醇、肌醇、酪蛋白、酪氨酸和黄嘌呤，不水解淀粉，不液化明胶。3.4 鉴别要点：3.4.1 本菌特征：革兰阳性，菌体为丝状，抗酸染色弱阳性；生长缓慢，菌落较小；分解葡萄糖，不分解酪蛋白、酪氨酸和黄嘌呤。3.4.2 与分枝杆菌的鉴别：星形诺卡菌革兰染色性强，抗酸染色性弱，盐酸乙醇易脱色，菌体呈丝状；分枝杆菌抗酸性强，不易脱色，革兰染色弱。3.4.3 与红球菌属的鉴别：星形诺卡菌对青霉素耐药，红球菌则敏感。3.4.4 与

3、棒状杆菌的鉴别：星形诺卡菌菌体呈丝状，而棒状杆菌属菌体一端或两端膨大呈棒状。3.4.5 与分枝杆菌属和放线菌属的鉴别 三者镜下形态相似，但星性诺卡菌抗酸染色弱阳性，分枝杆菌属强阳性，放线菌属为阴性。3.5 操作步骤3.5.1 观察菌落特征，挑取可疑菌落，涂片染色镜检。3.5.2 触酶试验 参见 触酶试验标准操作规程 3.5.3 鉴定 从SDA平板上挑取纯菌落，用仪器法或传统生化法进行细菌鉴定。4. 药敏参见 药物敏感性试验标准操作规程 及CLSI M100-S20最新版本文件。5. 质量控制参见 质量管理程序 。检验结果解释与分析6.1 新鲜的诺卡菌培养物经革兰氏染色为阳性的杆菌，特别是菌龄较

4、短，尚无菌丝体出现时，启形态类似细菌，鉴定中应注意。6.2 培养早期，菌体裂解为较多的球菌或杆菌状，分枝状菌丝较少；培养后期，可见丰富菌丝体形成。6.3 有些病人痰培养诺卡菌阳性，但没有诺卡菌感染的症状，星形诺卡菌可能是呼吸道的正常菌群，有些患者有空洞性结核、癌、囊性纤维化、哮喘或其他潜在疾病的病人，其呼吸道可能有诺卡菌的寄生。7. 临床意义星形诺卡菌可引起原发性化脓性肺部感染，可出现类似结核的症状。肺部病灶可向其他组织器官扩散，形成皮下脓肿、多发性瘘管、脑脓肿、腹膜炎等。巴西诺卡菌可引起足放线菌病，表现为足部或腿部皮下肿胀、脓肿及多发笥瘘管等。8 鉴定流程G+球杆菌血琼脂平板菌落呈黄色或深橙色菌丝（培养后期）其他细菌弱阳性 抗酸染色 阴性诺卡菌属、链霉菌等参考文献1 中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL23:2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的应用说明.2008 编写人： AAA、BBB 操作人：本室操作人员 批准人：