血清总胆红素TBIL测定.doc

《血清总胆红素TBIL测定.doc》由会员分享，可在线阅读，更多相关《血清总胆红素TBIL测定.doc（8页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、血清总胆红素TBIL测定1 检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。2 实验原理 在酸性溶液中，样本中的总胆红素被钒酸盐氧化生成胆绿素的同时，在450nm波长处可引起吸光度的下降。其在450nm波长处引起吸光度的变化值与样本中总胆红素的浓度成正比。通过在450nm波长处测定吸光度的变化值即可测得样本中总胆红素的浓度。3 标本3.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。3.2 类型：血清3.3 标本存放：1525保存可稳定2天；28保存可稳定7天；-20保存可稳定3个月，如冰冻保存，不可反复冻融。3.4 标本运输：常温条件下避光保存运输。3.5 标

2、本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。4 实验材料4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司总胆红素试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1 试剂组成 试剂1（R1）： 柠檬酸缓冲液 100mmol/L 表面活性剂 1.0%试剂2（R2）： 磷酸盐缓冲液 200mmol/L 偏钒酸钠 3.8mmol/L 4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。4.1.3 试剂稳定性与贮存4.1.3.1储存条件：28避光、密封保存。 4.1.3.2有效期：在28避光、密封的储存条件下，试剂盒自检定合格之日起有效期为18个月。 4.1

3、.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。4.1.5 注意事项：此试剂为体外诊断用，不要入口，毒性还末确定；避免和眼睛，皮肤或衣服接触，如果接触到，立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟，接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。4.2 校准品：使用上海复星长征医学科学有限公司提供的TBIL校准品对自动分析仪进行校准。4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。5 仪器 AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪，西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪。6 操作步骤6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。6.2 试剂的检测：仪

4、器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪，西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪，西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。7 质量控制 在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。8 计算方法 以TBIL复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报

5、告可靠的检测结果无需手工计算，以mol/L报告。9 参考值范围 成人：220mol/L（0.11.2 mg/dL）； 新生儿：20200mol/L（1.212 mg/dL）参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。我室的参考值:0-21mol/L10 临床意义 胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强，几乎不溶解于水。在血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸结合,生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。 溶血（肝前黄疸）、实质的肝损伤（肝性黄疸）和胆管堵塞（肝后黄疸）都会导致血液胆红素增高，形成

6、高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为Gilbert综合症。由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增多，使6070%的婴儿血液出现总胆红素增高。常用的胆红素检测方法能检测总胆红素和直接胆红素。直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素，因此可以根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量。TBIL增高常见于肝细胞性黄胆，阻塞性黄疸及溶血性黄疸。11 操作性能11.1 线性范围：684mol/L10%，线性相关系数（r）0.99011.2 精密度：(1)重复性：变异系数（CV%）5%；(2)批间差：相对极差（%）7%。 11.3 准确度：用相对偏差（B）表示测定结果的

7、不准确度，相对偏差（B）10%11.4 灵敏度：测定浓度为100mol/L的总胆红素样本，样本的吸光度差值应不小于0.08012 超出范围结果处理：本法线性上限为684mol/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:4稀释，重新测定，结果乘以5。13 病危报警值的处理 无警告/危急值。14 方法局限性14.1测定结果的准确性依赖于对所使用分析仪器校准、测定温度和测定时间的控制。 14.2请勿将试剂1与试剂2配制成工作试剂使用。 14.3甘油三酯浓度5mmol/L、抗坏血酸浓度0.5g/L时对测定无明显干扰；血红蛋白浓度8.0g/L对测定有轻微的负干扰。 14.4试剂1与试剂2启用后，在210避光的条件下可稳定14天。 15 补救措施 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。16 参考文献 16.1叶应妩，王毓山，申子瑜主编全国临床检验操作规程中华人民共和国卫生部医政司编.(第四版)16.2.钱士匀主编.临床生物化学及生物化学检验实验指导.人民卫生出版社，2012年第5版16.3府伟灵,徐克前主编.临床生物化学检验.北京.人民卫生出版社,2012年第5版16.4试剂说明书