血清总蛋白TP测定.doc

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1、血清总蛋白TP测定1 检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。2 实验原理双缩脲比色终点法。在碱性条件下，蛋白与铜离子生成紫蓝色复合物。显色强度和蛋白浓度成正比。 OH 蛋白质 + Cu2+ -紫红色复合物3 标本采集3.1 病人准备:应禁食抽血3.2 类型：血清3.3 标本存放 2025保存可稳定6天；48保存可稳定4周；-20保存至少可稳定1年。3.4 标本运输 室温条件下运输3.5 标本拒收标准 细菌污染的不能做测定。4 实验材料:4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司TP试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-20

2、14）4.1.1试剂组成 氢氧化纳：200mmol/l 碘化钾 6mmol/l 硫 酸 铜：12mmol/l 稳定剂 淀石酸钾钠：64mmol/l 4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。4.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于225，若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为24个月。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。4.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。4.1.5 注意事项：试剂中含有氢氧化钠，不可入口！如与皮肤及粘膜接触，请立即用大量水冲洗。使用试剂时应采取必要的防护。4.2 校准品：使用上海复星长征医学科学有限公司提供的TP校准品对自动分析仪进行校准。4.3 质

3、控品：使用正常值、病理值复合控制品。5 仪器 AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪，西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪6 操作步骤6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪，西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪，西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝T

4、BA-120生化分析仪操作规程。7 质量控制 在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。8 计算方法 以TP复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以g/L报告。9 参考值范围 g/L 60-83 g/L（注：各实验室应有自己的参考范围。） 参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。 我室参考值范围：65-85 g/L10 临床意义 总蛋白检测对于多种疾病的诊断都有价值。肝脏蛋白合成缺陷、肾功能损伤引起蛋白丢失、肠道吸收

5、不良或营养不良时总蛋白浓度下降。而在慢性炎症疾病、肝硬化和脱水时总蛋白浓度升高。11 操作性能11.1 线性范围：0100g/L11.2 精密度：(1)重复性：变异系数（CV%）4%；(2)批间差：相对极差（%）5%。 11.3准确度：相对偏差（B）应不大于10%11.4 灵敏度：10.0g/L样本的吸光度变化率（A）应不小于0.05012 超出范围结果处理 本法线性上限为100g/L。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。13 病危报警值的处理 无警告/危急值。14 方法局限性14.1 测定结果的准确性依赖于对所使用分析仪器校准、测定温度和测定时间的控制。14.2 高脂血清会引起测定结果假性升高，测定时应避免使用。14.3 试剂启用后，在210避光的条件下可稳定30天。若试剂混浊，或以水为空白在波长540nm处的吸光度大于0.20时，则不能使用。15 补救措施 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。16 参考文献 16.1 叶应妩，王毓山，申子瑜主编全国临床检验操作规程中华人民共和国卫生部医政司编(第四版)16.2 钱士匀主编.临床生物化学及生物化学检验实验指导.人民卫生出版社，2012年第5版16.3 府伟灵,徐克前主编.临床生物化学检验.北京.人民卫生出版社,2012年第5版16.4 试剂说明书