免疫球蛋白IgA测定.doc

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1、免疫球蛋白IgA测定1检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。2原理 免疫透射比浊法 抗免疫球蛋白A抗体和样本中的抗原形成抗原抗体复合物，出现凝集，进行透射比浊检测。通过加入PEG可促使反应迅速达到终点，可增加灵敏度，降低样本中抗原过剩导致假阴性的风险。3标本要求3.1使用新鲜血清,不使用血浆.3.2在采集血液后2h分离血清.3.3 8h内不能及时测定血清可存放于2-80C冰箱保存,3天后测定的血清置-150C-200C 冰冻保存,但冰冻血清只能复融一次.3.4严重溶血或脂血的标本不能作测定.4试剂4.1 试剂：上海罗氏诊断产品有限公司IgA试剂盒,国械注进20142

2、405056 YZB/GER 5724-2014）4.1.1 试剂组成 R1:TRIS 缓冲液：20 mmol/l，pH 8.0；氯化钠：200 mmol/L；PEG：3.6%；防腐剂和稳定剂。 R2:抗人免疫球蛋白A抗体（羊）：取决于滴度；TRIS缓冲液：20 mmol/l；氯化钠：150 mmol/L；防腐剂。4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。4.1.3 试剂稳定性与贮存：2-8C下保存期限：见试剂标签上的有效期。 机上稳定期：90天。4.1.4变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染则试剂不能使用。4.2 校准品：使用罗氏多项生化校准品提供的IgA校准品对自动分析仪进行校准。4.3 质

3、控品：使用正常值、病理值复合控制品。5 仪器 AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪6 操作步骤6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，

4、东芝TBA-120生化分析仪操作规程。7 质量控制 在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。8 计算方法 以IgA复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以g/l报告。9 参考值成人0.7-4 g/L(70-400 mg/dL；4.38-25.0 umol/L)儿童及青少年0-1岁0.00-0.83 g/L(0-83 mg/dL；0.00-5.19 umol/L)1-3岁0.20-1.00 g/L(20-100 mg/dL；1.25-6.25 umol/L)4-6岁0.27

5、-1.95 g/L(27-195 mg/dL；1.69-12.19 umol/L)7-9岁0.34-3.05 g/L(34-305 mg/dL；2.13-19.06 umol/L)10-11岁0.53-2.04 g/L(53-204 mg/dL；3.31-12.75 umol/L)12-13岁0.58-3.58 g/L(58-358 mg/dL；3.63-22.38 umol/L)14-15岁0.47-2.49 g/L(47-249 mg/dL；2.94-15.56 umol/L)16-19岁0.61-3.48 g/L(61-348 mg/dL；3.81-21.75 umol/L) 我室的参考

6、值:0.6-4 g/l10 临床意义:IgA 约占血浆免疫球蛋白的13%,它的作用是保护皮肤及粘膜免受微生物的感染。它能结合毒素，与溶酶体一起具有抗病毒及细菌的功能。IgA 是体液分泌物，如：初乳、唾液和汗水内的主要免疫球蛋白。分泌IgA 可防止局部感染，在肠内和食物抗原结合有重要作用。在血清中,IgA 以单体、二聚体及三聚体等形式存在,而分泌型的IgA 全部为有添加链（分泌组分）的二聚体形式。 在慢性肝病、慢性感染、自身免疫性疾病（类风湿性关节炎、全身性红斑狼疮）、结节病和威-奥综合症（Wiskott-Aldrich syndrome，X 连锁免疫缺陷综合症）时,会出现多克隆的IgA 水平升

7、高。在IgA 骨髓瘤时单克隆IgA 升高。 IgA 的合成降低可见于获得性或先天性免疫缺陷疾病， 如布鲁顿丙球蛋白缺乏血症。另外，肠胃病蛋白流失和烧伤由皮肤的流失等，使IgA 合成下降。11 操作性能11.1 线性范围：0.5-8 g/l11.2精密度 采用内部协议重复检测人样本和质控品（n=21），结果如下： 标准应用（IGA-2）样本批内精密度批间精密度均值变异系数%均值变异系数%g/Lumol/Lg/Lumol/L低值质控1.9512.191.032.3414.631.65高值质控3.5222.000.675.9637.251.96人血清 0.553.442.540.523.254.09

8、 敏感应用（IGAP2）样本批内精密度批间精密度均值变异系数%均值变异系数%g/Lumol/Lg/Lumol/L高值质控1.9412.130.671.9912.441.18低值质控0.090.561.090.090.560.84人血清 0.422.630.690.412.560.7112 超出范围结果处理 本法线性上限为8.0 g/l。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作1：4稀释，重新测定，结果乘以5。13 病危报警值的处理 无警告/危急值14 方法局限性14.1标准应用（IGA-2）：50-800 mg/dL（0.50-8.00 g/L；3.13-50.0 umol/L）通

9、过使用复检功能对高浓度的样本以1：5.6的稀释比例进行检测。复检后的结果将由系统自动乘以5.6倍的稀释倍数得出原样本的结果。14.2敏感应用（IGAP2）：10-400 mg/dL（0.10-4.00 g/L；0.63-25.0 umol/L）通过使用复检功能对高浓度的样本以1：3的稀释比例进行检测。复检后的结果将由系统自动乘以3倍的稀释倍数得出原样本的结果。检测下限：标准应用（IGA-2）：4 mg/dL（0.04 g/L；0.25 umol/L）；敏感应用（IGAP2）：1 mg/dL（0.01 g/L；0.06 umol/L）。检出低限为分析物可区别于零的最低可检测量，计算公式为在最低标准上加上3个标准差（标准13 SD，重复率，n21）15 补救措施 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。16 参考文献：16.1叶应妩，王毓山，申子瑜主编全国临床检验操作规程中华人民共和国卫生部医政司编(第四版)16.2钱士匀主编.临床生物化学及生物化学检验实验指导.人民卫生出版社，2012年第5版16.3府伟灵,徐克前主编.临床生物化学检验.北京.人民卫生出版社,2012年第5版16.4试剂说明书。