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1、钠钾氯离子测定1 检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果的准确。2 实验原理 罗氏MODULAR电解质模块采用间接法进行K、Na、Cl三项的检测,仪器自动将每个标本进行31倍稀释后进行检测.通过检测K、Na、Cl三个离子选择性电极与参比电极(具有衡定的电动势)间的EMF(电动势)变化,从而计算出标本中相应的离子浓度。 (1) E = E0 + RT/nF . In (f . Ct)/(f . Ci)其中 E = 相应电极的电动势 EMF E0 = 标准的电动势 EMF R = 恒量 T = 温度( 37 ) n = 相应离子负荷 F = 法拉第恒量 In = 自然对数 f
2、= 活度系数 Ct = 检测液中的离子浓度 Ci = 内标液中的离子深度 (2) E = E0 + S . In (Ct)3 标本采集3.1 病人准备:无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。3.2 类型:血清、肝素锂抗凝血浆或尿液。3.3. 标本采集、处理与贮存:应尽量避免标本溶血或严重脂血。溶血标本,红细胞中的钾会释放到血清或血浆中,造成假性钾便高。因此血清、肝素锂抗凝血浆标本应及时离心分离血清或血浆并避免残留红细胞。严重脂血的标本,会造成假性低钠钾血症,应通过超速离心消除脂血的影响。血清或血浆标本的稳定性:在225贮存,氯稳定7天,钾6周,钠2周。24小时尿液标本不添加防腐剂,混
3、浊尿应离心后吸取上清液,严禁酸化尿液。尿标本的稳定性:在225贮存,氯稳定7天,钾在28贮存稳定2个月,在1525贮存稳定45天4,钠在225贮存稳定45天。3.4 标本运输:室温条件下运输3.5 标本拒收标准:细菌污染、溶血、严重脂血的不能做测定。4 实验材料:4.1 试剂与标准液ROCHE配套试剂。ISE 参比电极液 500 mlISE 内定标液 2000 mlISE 稀释液 2000 mlROCHE配套校准物。具体如下:ISE 低定标液 10 x 3 ml ISE 高定标液 10 x 3 ml4.1.1 试剂准备:试剂为即用式。4.1.2 试剂稳定性与贮存:所有试剂未开包装前:参比电极液
4、、内定标液、稀释液储存于15-25可稳定至有效期。开包装后:参比电极液可稳定至有效期;内定标液、稀释液可稳定4周。SE 低定标液和ISE 高定标液储存于15-25可稳定至有效期4.1.3 变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染或过失效期不能继续使用。4.1.4 注意事项:试剂在每次使用后均应立即盖好盖子。ISE内参比液在保存期间可有部分沉淀释出,这不会影响试剂性能,但在使用前应充分混匀试剂。试剂中含防腐剂。不可入口!避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。4.2 校准品:使用罗氏公司提供的ISE低/高值血清标准液对自动分析仪进行校准,每天开机前校准或在下列情况下校准:试剂批号更换、
5、质控数值明显漂移或失控、更换电极、主要的预防性保养后或关键部件更换后。4.3 质控品:使用正常值、病理值复合控制品。5 仪器 罗氏P800生化分析仪6 操作步骤6.1 样品的准备:将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。6.2 试剂的检测:仪器开机后,检查各种试剂的位置,体积等确认无误后方可进行测定。6.3 项目基本参数:参见罗氏P800生化分析仪项目测定参数。6.4仪器操作步骤:参见生化检验罗氏P800生化分析仪操作规程。7 质量控制 在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。8 计算方法 使用罗氏公司提供
6、的ISE低/高值血清标准液校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果,以mmol/L报告。9 参考值范围(成人)见下表:钠钾氯血清136-146mmol/L3.5-5.1mmol/L98-108mmol/L血浆136-146mmol/L3.4-4.5mmol/L98-108mmol/L尿液(24小时)40-220mmol/天25-125mmol/天110-250mmol/天参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参考值。(由于分析方法局限性,应注意对高脂血症和高蛋白血症的病人标本检测结果的解释。)我室的参考范围 钾:3.5-
7、5.3 mmol/L钠:137-147 mmol/L氯:99-110 mmol/L10 临床意义10.1 钾离子是细胞内液中的主要阳离子。钾离子测定可用于诊断电解质失衡,心律不齐,肌无力,肝脑病变和肾衰竭,并在糖尿病和静脉输液治疗中检测酮酸中毒。并发醛固酮过多症的高血压患者,超过90%的人K+ 浓度很低。呕吐,腹泻,嗜酒和叶酸缺乏症都可引起K+ 浓度降低。快速输入K+ ,晚期肾衰,溶血性病变,外伤,Addison氏综合症,代谢性酸中毒,急性饥饿症,脱水和急救等均可引起K+浓度升高。通常情况下, K+ 经肾小球过滤掉,但在K+浓度较低时, K+会保留下来。在饮食增加,高醛固酮症,肾小管性酸中毒和
8、碱中毒发病时,尿液中K+的含量上升。10.2 钠离子是细胞外液中的主要阳离子,人体内的钠平衡由肾脏维持。尿液排泄过多,腹泻,Addison氏综合症,肾小管肾炎等都可引起钠浓度降低。严重脱水,某些类型的脑外伤,糖尿病昏迷和盐摄入过量可导致钠浓度升高。10.3 氯离子是细胞外液中的主要阴离子,它的生理重要性在于能保持人体正常的水代谢,渗透压和细胞外液中正常的离子平衡。在脱水,肾小管酸中毒(高氯代谢酸中毒),食盐摄入过多等情况下,氯的浓度会升高。在水含量过多,慢性呼吸性酸中毒,失盐性肾炎,代谢性碱中毒和充血性心脏衰竭等情况下,氯的浓度会降低。11 操作性能11.1 本法线性范围 Na+ : 10 2
9、50 mmol/l K+ : 1 100 mmol/l Cl- : 10 250 mmol/l 不准确度允许范围 不精密度CV 灵敏度 Na 4 mmol/l ; Na 4.67% Na 10 mmol/L K 0.5 mmol/l K 3.19% K 1 mmol/L Cl 5% Cl 2.86% Cl 10 mmol/L12 超出范围结果处理 本法线性上限为血清/血浆钠为250mmol/L,钾为100mmol/L,氯为250mmol/L。如样品测定值超过上限时,应将样品用去离子水作1:1稀释,重新测定,结果乘以2。13 病危报警值的处理 当血清/血浆:钠160mmol/L或120mmol/
10、L;钾6.2mmol/L或2.7mmol/L,氯120mmol/L或85mmol/L时,应在复查该标本检测结果后,及时报告临床医生,必要时可以再抽血复查。14 方法局限性14.1标准:回收率在90110之间。14.2黄疸:黄胆指数在60范围内不会有明显干扰。(直接和间接胆红素浓度约为60mg/dl)14.3脂血:乳糜指数达2000以上时明显干扰。(甘油三酯浓度约为2000mg/dl)14.4溶血:溶血指数在1000以内时不会有明显干扰。(血红素浓度约为1000mg/dl)14.5药物:以下所例的药物浓度范围内不会对结果产生明显干扰:Acetaminophen (paracetamol) 200
11、 mg/l Acetylcysteine 150 mg/lAcetylsalicylic acid 1000 mg/l Ampicillin-Na 1000 mg/lAscorbic acid 300 mg/l Ca-Dobesilate 200 mg/lCefoxitin 2500 mg/l Cyclosporin 5 mg/lDoxycyclin 50 mg/l Heparin 5000 UIbuprofen 500 mg/l Intralipid 10000 mg/lL-Dopa 20 mg/l Methyldopa 20 mg/lMetronidazol 200 mg/l Phenylbutazone 400 mg/lRifampicin 60 mg/l Theophylline 100 mg/l15 补救措施 当仪器发生故障无法自行解决时,迅速联系仪器厂家进行维修。16 参考文献:16.1叶应妩,王毓山,申子瑜主编全国临床检验操作规程中华人民共和国卫生部医政司编(第四版)16.2钱士匀主编.临床生物化学及生物化学检验实验指导.人民卫生出版社,2012年第5版16.3府伟灵,徐克前主编.临床生物化学检验.北京.人民卫生出版社,2012年第5版16.4试剂说明书
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