腺苷脱氨酶ADA测定.doc

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1、腺苷脱氨酶ADA测定1检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。2原理 ADA 腺苷+H2O 肌苷+NH3 PNP 肌苷+Pi 次黄嘌呤+1-磷酸核糖 XOD 次黄嘌呤+2 H2O+2O2 尿酸+2 H2O2 POD H2O2 +4-AAP+EHSPT 4H2O+苯醌类3标本要求3.1使用新鲜血清,不使用血浆.3.2在采集血液后2h分离血清.3.3 8h内不能及时测定血清可存放于2-80C冰箱保存,3天后测定的血清置-150C-200C 冰冻保存,但冰冻血清只能复融一次.3.4严重溶血或脂血的标本不能作测定.4试剂4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司ADA试剂盒（

2、沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1试剂组成 试剂1 60 ml,试剂主要成分如下: TrisHCL缓冲液（PH8.0）50.0mmol/L XO 0.2u/ml 4-AAP 2.0mmol/L POD 0.6u/ml PNP 0.1u/ml NaN3 0.2g/L 试剂2 60 ml,试剂主要成分如下: TrisHCL缓冲液（PH4.0） 50.0mmol/L EHSPT 2.0 mmol/L 腺苷 10.0mmol/L4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。4.1.3 试剂稳定性与贮存：28避光、密封的储存条件下，试剂（盒）自生产之日起

3、有效期为12个月。试剂1 与试剂2 启用后，在210避光的条件下可稳定20天。4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。4.2 校准品：4.2.1采用以检测用水为空白的方式进行校准。4.2.2校准及校准频次的要求：正常情况下，应每周至少对测定进行一次校准。当发生下列情况时（如：使用的试剂批号发生改变时、使用的仪器进行维修、保养或关键部件进行更换后、质控品的测定结果发生漂移或超出规定的范围等），应重新对测定进行校准后再对患者的样本进行检测。5 仪器 AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400

4、生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪6 操作步骤6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。7 质量控制 在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以

5、2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。8 计算方法 在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以U/L报告。9 参考值 4-22 u/L（37）10 临床意义 ADA在良恶性难辨的渗出液鉴别诊断上有重要价值，国内外研究表明，ADA对诊断结核性渗出液的特异性和敏感性明显优于活检和细菌学法、结核性胸腹水ADA活性显著增高，癌性胸腹水不增高，而血清ADA活性二者无显著差异，此外，脑脊液ADA检测可作为中枢神经系统疾病诊断和鉴别诊断的重要指标，结核性脑膜炎显著增高，病毒性脑炎不增高，颅内肿瘤及中枢神经系统白血病稍增高。11 操作性能11.1本法的ADA可报告范围为 0200 u/L（37） 11.2精密度CV5% 11.3准确度 测定值在正常及异常质控范围内12 超出范围结果处理 如果超过线性范围用生理盐水1：1稀释，结果乘213 病危报警值的处理： 无。14 补救措施 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。15 参考文献15.1叶应妩，王毓山，申子瑜主编全国临床检验操作规程中华人民共和国卫生部医政司编(第四版)15.2钱士匀主编.临床生物化学及生物化学检验实验指导.人民卫生出版社，2012年第5版15.3府伟灵,徐克前主编.临床生物化学检验.北京.人民卫生出版社,2012年第5版15.4试剂说明书。