血清尿酸UA测定.doc

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1、血清尿酸UA测定1 检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。2 实验原理 尿酸酶分解尿酸生成尿囊素和过氧化氢。 尿酸+2H2O+O2尿酸酶 尿囊素+ CO2 + H2O2 在过氧化物酶存在的情况下，4-氨基比林由过氧化氢氧化生成醌二亚胺。 2H2O2+H+TOOSa+4-氨基比林 过氧化物酶 醌二亚胺+4 H2O 醌二亚胺的颜色深浅与尿酸浓度成正比，可通过测定吸光度的上升来获得。3 标本：3.1 病人准备：使用新鲜血清,不使用血浆.在采集血液后2h分离血清. 3.2 类型：血清，肝素或EDTA血浆，尿液。3.3 标本存放：血清、血浆的稳定性：2025保存可稳定3天；4

2、8保存可稳定7天；-20保存可稳定6个月。对尿液用蒸馏水作1:10稀释后检测，结果乘11后报告。3.4 标本运输：常温条件下保存运输。3.5 标本拒收标准：细菌污染的标本。4 实验材料4.1 试剂：上海罗氏诊断产品有限公司UA试剂盒,国械注进20142405056 YZB/GER 5724-2014）4.1.1 试剂组成R1磷酸盐缓冲液：0.05 mol/L，pH 7.8；TOOS：7 mmol/L；脂肪醇聚乙二醇醚：4.8%；抗坏血酸盐氧化酶（EC 1.10.3.3；胡瓜）83.5 kat/L（25）R2磷酸盐缓冲液：0.1 mol/L，pH 7.8；亚铁氰化钾（）：0.3 mmol/L；4

3、-氨基比林3mmol/L；尿酸酶（EC 1.7.3.3；原生节杆菌）83.4 kat/L（25）；过氧化物酶（POD）（EC 1.11.1.7；辣根）50kat/L（25）4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。4.1.3 试剂稳定性与贮存：2-8下的保存期限：见试剂标签上的有效期。机上稳定期： 4周4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。4.2 校准品：使用罗氏多项生化校准品提供的UA校准品对自动分析仪进行校准。4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。5 仪器 AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子

4、ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪6 操作步骤6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。7 质量控制 在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为

5、未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。8 计算方法 以UA复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以mmol/L报告。9 参考值范围：（mmol/L） 血清/血浆 女性 男性 成人 140339.2 200420 儿童 05天 113470 113470 14岁 101303 131470 511岁 178381 178381 1214岁 190363 190440 1517岁 190381 268482 尿液 4.76mmol/d（正常饮食） 3.57mmol/d（低嘌呤饮食）参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所

6、差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。我室参考值范围 女: 140-340 mmol/L 男 :200-420mmol/L10 临床意义 尿酸和尿酸盐是嘌呤代谢的最终产物。痛风是高尿酸血症最常见的并发症，血清尿酸水平的升高导致在关节处生成尿酸钠晶体。此外导致血液中尿酸升高的原因还有：排泄功能下降的肾脏疾病，饥饿，滥用药物，过度饮酒或某些药物的使用。高尿酸水平也是冠心病的间接危险因子之一。低尿酸血症较少见，其与罕见的遗传代谢紊乱有关。肾脏疾病如急慢性肾炎，肾结石，痛风，以及体内酸分解代谢过盛的疾病，如慢性白血病、多发性骨髓瘤，真性红细胞增多症等可使尿酸量增离，而恶性贫血及应用A

7、CTH皮值素，阿斯匹林等药物时，血中尿酸量下降。11 操作性能 按照内部协议使用人样本和质控品检测其可重复性。重复性（n=21），中间精密度（每批3管，每天1批，21天）测定结果如下：血清/血浆样本重复性批间精密度 均值变异系数%均值变异系数%umol/Lmg/dLumol/Lmg/dL人血清3425.750.54297.211.7Precinorm U2784.670.52894.861.3Precipath U60610.180.45599.391.6 尿液样本重复性批间精密度均值变异系数%均值变异系数%umol/Lmg/dLumol/Lmg/dL人血清158826.71.0138023.

8、26.3Precinorm U85714.41.085114.30.7Precipath U321651.20.6302350.80.6 重复性 =批内精密度 批间精密度=总精密度/批间精密度/天间精密度12 超出范围结果处理 本法对尿酸的检测范围为11.91487mmol/L。当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1：4稀释，重新测定，结果乘以5。13 病危报警值的处理 无警告/危急值。14 方法局限性14.1血清/血浆14.1.1黄疸：I指数达到40时（结合胆红素和未结合胆红素浓度大约为：684mol/L（40 mg/dL），无明显干扰。14.1.2溶血：H指数达到1000

9、（血红蛋白浓度约为：621 mol/L（1000mg/dL）时，无明显干扰干扰。14.1.3脂血（脂肪乳剂:Intralipid）：L指数达到1000时，无明显干扰。L指数（与浊度对应）与甘油三酯浓度之间的相关性较差。14.1.4抗坏血酸1.70 mmol/L(30mg/dL)时无干扰。14.1.5药物:没有发现使用普通剂量的治疗药物浓度存在干扰。14.1.6-甲基多巴，去铁胺，氢醌磺酸钙在治疗水平时可人为减少尿酸的测定值。高浓度的尿黑酸可导致样本结果错误。14.1.7尿酸酶与尿酸发生特异性反应。其它嘌呤衍生物能够抑制尿酸的反应。在极少数-球蛋白病，尤其是IgM型（Waldenstrms巨球蛋

10、白血症）病例中，可产生不可信的结果。14.2尿液14.2.1药物:没有发现使用普通剂量的治疗药物浓度存在干扰。14.2.2氢醌磺酸钙，去铁胺和-甲基多巴在治疗浓度可人为降低尿酸的测定结果。应结合患者的病史、临床检查和其它检测结果对这些测定结果进行评价并做出诊断。15 补救措施 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。16 参考文献：16.1叶应妩，王毓山，申子瑜主编全国临床检验操作规程中华人民共和国卫生部医政司编(第四版)16.2钱士匀主编.临床生物化学及生物化学检验实验指导.人民卫生出版社，2012年第5版16.3府伟灵,徐克前主编.临床生物化学检验.北京.人民卫生出版社,2012年第5版16.4试剂说明书。