第十九章临床常见标本的细菌学检验ppt课件.ppt

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1、微生物学检验微生物学检验国家卫生和计划生育委员会规划教材国家卫生和计划生育委员会规划教材 “雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。微生物学检验微生物学检验微生物学检验微生物学检验国家卫生和计划生育委员会规划教材国家卫生和计划生育委员会规划教材 “雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平

2、台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。第十九章临床常见标本的细菌学检验 返回总目录“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。本 章 内 容第一节 概述 1第二节 临床常见标本的细菌学检验2“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。学习目标：学习目标：掌握临床常见标本的采集、送检和处理的原

3、则掌握临床常见标本的采集、送检和处理的原则临床常见标本细菌学检验程序、检验方法及结果报告临床常见标本细菌学检验程序、检验方法及结果报告 熟悉熟悉TATTAT、危急值在临床实际工作中的应用、危急值在临床实际工作中的应用临床标本常见病原菌的检验方法及鉴定要点临床标本常见病原菌的检验方法及鉴定要点了解临床标本细菌学检验的临床意义了解临床标本细菌学检验的临床意义临床标本中正常菌群的分布及常见致病菌临床标本中正常菌群的分布及常见致病菌本章重点：本章重点： 病毒标本采集和运送原则病毒标本采集和运送原则病毒学诊断及鉴定常用方法病毒学诊断及鉴定常用方法病毒培养的基本操作病毒培养的基本操作学习目标及重点 “雪亮

4、工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。第一节 概述一、临床标本的采集、送检与处理原则 （一）临床标本的采集 1.核对检验单信息 信息完整、无误 2.选择适当的容器“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。 3.早期采集 使用抗菌药物前使用抗菌药物前 4.无菌采集 严格无菌操作技术严格无菌操作技术第一节 概述“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三

5、级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。 5.选择采集部位和方法第一节 概述“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。 6.充足的标本量 足量、适量足量、适量 7.标记标本 8.归放标本 符合生物安全防护要求符合生物安全防护要求第一节 概述“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防

6、控工程”。（二）临床标本的保存和送检 立即送检，否则应放入运送培养基或保存液中运送 1.普通细菌培养标本 室温：1小时，4：24小时，运送培养基：48小时 2.苛养菌培养标本 保温、保湿送检，“床头接种”第一节 概述“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。3.厌氧菌培养标本 防干燥，避免接触空气。4.安全运送 注意安全防护 高致病性传染病标本，按生物安全有关规定包装，由专人运送第一节 概述“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为

7、支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。（三）临床标本的处理 核对标本与申请单信息常见标本处理方式 组织：无菌粉碎研磨后，加生理盐水制成悬液，接种 体液：3000r/mim离心10分钟后，接种。 棉拭子：置运送培养基送检，避免污染。 粪便：挑取带脓、血及黏液部分接种。 痰液：检查标本是否有血液、脓液、颗粒、干酪样物等 血液：采集后立即增菌培养 厌氧菌培养：检查标本、运送方式是否适合厌氧培养，立即接种 第一节 概述“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点

8、的“群众性治安防控工程”。二、培养基及培养方法的选择 1.培养基 选择恰当的培养基或组合第一节 概述“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。电热恒温培养箱电热恒温培养箱二氧化碳培养箱二氧化碳培养箱厌氧培养箱厌氧培养箱2.常用培养方法 需氧培养、二氧化碳培养和厌氧培养需氧培养、二氧化碳培养和厌氧培养第一节 概述“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”

9、。三、细菌学检验的基本流程（一）细菌学检验的基本程序 第一节 概述“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。（二）细菌学检验鉴定步骤 1.标本性状观察 颜色、是否粘稠、是否浑浊、是否脓性、是否带血等性状 第一节 概述“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。革兰染色抗酸染色墨汁染色 2.涂片检查 不染色标本检查 ：检查细菌的动力 染色标本检查第一节

10、概述“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。 3.细菌的分离培养 目的：得到单个纯菌落 甄别污染菌方法 观察菌落是否在划线上 观察菌落是否与直接涂片染色结果相符 观察菌落是否符合拟培养细菌的生长特点 注意培养时间第一节 概述“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。4.细菌的鉴定 选择细菌检验鉴定方法的原则选择有鉴定价值的试验：两种细菌出现不同的结

11、果选择有鉴定价值的试验：两种细菌出现不同的结果选择快速、简易的试验：如触酶、氧化酶选择快速、简易的试验：如触酶、氧化酶 综合考虑试验的敏感性和特异性综合考虑试验的敏感性和特异性 第一节 概述“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。5.细菌对抗菌药物敏感性试验 纸片扩散法纸片扩散法 肉汤稀释法肉汤稀释法 自动化仪器法自动化仪器法 E-testE-test法等。法等。第一节 概述“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化

12、管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。返回本章内容四、细菌学检验报告原则 标本周转时间（TAT）：从标本采集起到临床医生收到检验结果的时间 危急值：指危及到患者生命健康安全的检验结果 检验报告原则 初报告 预报告 最终报告 报告抗菌药物敏感性试验结果第一节 概述“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。一、血液及骨髓标本的细菌学检验（一）标本的采集 1.皮肤消毒 严格执行三步法 2.采血部位： 肘静脉 肘动脉或股动脉采血 婴幼儿采颈静脉血

13、第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。3.采集方法 严格无菌操作 4.采血量 比例：1:10 成人810ml/瓶 儿童15ml/瓶 婴儿12ml/瓶 骨髓12ml/瓶 第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。疾病24小时内24小时后菌血症、败血症23份细菌性心内膜炎3份（12小时）

14、2份不明原因发热23份2份5.采血时间和頻度6.标本的运送和保存 立即送检，室温保存，切勿冷藏第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。（二）微生物学检验 1.常见病原菌 第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。2. 检验程序第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（

15、镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。培养基性状改变疑似病原菌均匀混浊，指示剂变色革兰阴性杆菌微混浊，有绿色变化肺炎链球菌有菌膜，均匀混浊有绿色荧光铜绿假单胞菌上层澄清，下层有沉淀链球菌细胞层自上而下的溶血溶血性链球菌混浊、有胶冻状凝固现象葡萄球菌灰白色菌膜、培养基清晰枯草芽孢杆菌或类白喉棒状杆菌3.检验方法 （1）普通细菌的培养与鉴定 增菌培养：培养阳性指证及疑似菌列表培养阳性指证及疑似菌列表第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以

16、综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。阳性培养瓶直接药敏试验分离培养涂片染色镜检细菌鉴定药敏试验报告报告报告 阳性培养瓶处理 阴性培养瓶处理 于1218小时、第3天和第7天至少做3次盲传，7天无细菌生长报告阴性第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。（2）特殊细菌培养与鉴定 脑膜炎奈瑟菌血液血液骨髓骨髓胰胨肉汤或胰胨肉汤或专业培养瓶专业培养瓶巧克力培养基巧克力培养基（35, 510

17、C02）鉴定：葡萄糖、麦芽鉴定：葡萄糖、麦芽糖发酵阳性糖发酵阳性药敏：药敏：CLSI标准标准脑膜炎奈瑟菌菌落脑膜炎奈瑟菌菌落第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。（2）特殊细菌培养与鉴定 草绿色链球菌血液血液骨髓骨髓血琼脂平板血琼脂平板（35, 510C02、需氧和厌氧环境）需氧和厌氧环境）胰酶解酪蛋白胰酶解酪蛋白大豆肉汤培养瓶大豆肉汤培养瓶鉴定鉴定药敏试验药敏试验草绿色链球菌草绿色链球菌菌落7天培养无细菌生长，培养至第4周，仍无细菌生

18、长则报告“经4周培养无草绿色链球菌生长”第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。血液血液骨髓骨髓葡萄糖胆汁葡萄糖胆汁或胆盐肉汤或胆盐肉汤MACMAC、SSSS3535培养培养鉴定鉴定;KIA;KIA、生化反应、生化反应、血清学试验等血清学试验等药敏试验药敏试验血液血液骨髓骨髓肝浸液肉汤肝浸液肉汤肝浸液平板或血平板肝浸液平板或血平板（35,35, 5 51010C02C02）涂片、生化鉴定涂片、生化鉴定血清学试验血清学试验 伤寒沙门菌及其他

19、沙门菌 布鲁菌 培养培养4 4周无细菌生长，报告周无细菌生长，报告“经经4 4周培养无细菌生长周培养无细菌生长”第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。标本牛心脑浸液或肝浸液血平板或巧克力平板35、厌氧培养生化鉴定 厌氧菌 真菌： 真菌增菌肉汤增菌沙保弱培养基（25或37）菌落特征生化鉴定、报告 L型细菌 高渗液体培养基血琼脂平板和L型细菌培养基典型“油煎蛋”菌落返祖、鉴定第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、

20、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。4.结果报告采取分级和限时报告制度 初报告：将镜检结果电话通知主管医生 预报告：68小时内报告直接药物敏感结果 最终报告：报告细菌种属、药敏试验、结果评价及建议 阴性报告第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。（三）临床意义 排除杂菌污染，从血液和骨髓标本中检出任何细菌都具排除杂菌污染，从血液和骨髓标本中检出

21、任何细菌都具有临床意义有临床意义 葡萄球菌是血液感染最常见的细菌葡萄球菌是血液感染最常见的细菌 草绿色链球菌是亚急性心内膜炎的主要致病菌草绿色链球菌是亚急性心内膜炎的主要致病菌 尿路、胆道、胃肠道炎症粘膜损伤引起的败血症以大肠尿路、胆道、胃肠道炎症粘膜损伤引起的败血症以大肠埃希菌多见埃希菌多见 产单核李斯特菌主要引起新生儿败血症产单核李斯特菌主要引起新生儿败血症第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。互动讨论 草绿色链球菌属人体正常菌群，

22、试分析从血液和痰液标本中分离出草绿色链球菌各有何临床意义？第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。二、脑脊液标本的细菌学检验（一）标本的采集1.采集部位 腰椎穿刺法 2.采集量 35ml 3.标本的运送和保存 15分钟内送检，最迟不能超过1小时。疑似苛养菌感染时，应保温送检第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为

23、重点的“群众性治安防控工程”。（二）微生物学检验 1.常见病原菌第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。2.检验程序第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。肺炎链球菌肺炎链球菌脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌3.检验方法（1）涂片检查 革兰染色 第二节 临床常见标本的

24、细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。 抗酸染色 墨汁负染色 新型隐球菌结核杆菌第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。（2）分离培养与鉴定 普通细菌 标本标本血琼脂平板和巧克力平板（血琼脂平板和巧克力平板（3535，COCO2 2环境）环境）可疑菌落可疑菌落形态、生化试验及血清学试验、药敏试验形态、生

25、化试验及血清学试验、药敏试验 结核分枝杆菌 标本标本罗罗- -琴培养基或米氏琴培养基或米氏7H-107H-10培养基培养基3535温箱孵温箱孵育育可疑菌落可疑菌落鉴定鉴定第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。 真菌 标本标本血平板或沙保弱培养基血平板或沙保弱培养基2525及及3737孵育孵育可疑菌落可疑菌落形态、镜检及生化反应等鉴定。形态、镜检及生化反应等鉴定。 厌氧菌 标本标本血平板、厌氧血琼脂平板和硫乙醇酸钠肉汤血平板、厌氧血琼脂平

26、板和硫乙醇酸钠肉汤3535需氧、厌氧培养需氧、厌氧培养可疑菌落可疑菌落染色镜检及生化鉴染色镜检及生化鉴定、药敏试验定、药敏试验第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。4.结果报告 初报告：报告标本直接涂片结果：报告标本直接涂片结果 预报告：报告标本直接药敏试验结果：报告标本直接药敏试验结果 最终报告：报告细菌种属、药敏试验、结果评价及建：报告细菌种属、药敏试验、结果评价及建议议 阴性报告阴性报告第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是

27、以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。（三）临床意义 脑膜炎奈瑟菌引起细菌性脑膜炎脑膜炎奈瑟菌引起细菌性脑膜炎 结核分枝杆菌引起的结核性脑膜炎结核分枝杆菌引起的结核性脑膜炎 真菌性脑膜炎最常见的病原体是新型隐球菌，白假丝酵真菌性脑膜炎最常见的病原体是新型隐球菌，白假丝酵母菌、球孢子菌好发于免疫功能低下和恶性疾病患者母菌、球孢子菌好发于免疫功能低下和恶性疾病患者第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以

28、网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。三、尿液（泌尿生殖道）标本的细菌学检验（一）标本的采集 1.中段尿采集法 2.导尿法 3.膀胱穿刺采集法 4.集尿法 5.标本的运送和保存 立即送检、及时接种 室温不超过2小时，4不超过8小时 淋病奈瑟菌感染尿液标本不能冷藏第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。（二）微生物学检验1.常见病原菌第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（

29、社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。2.检验程序第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。3.检验方法（1）涂片检查 普通细菌检查：取沉淀涂片、染色、镜检：取沉淀涂片、染色、镜检 淋病奈瑟菌检查第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控

30、联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。 念珠菌检查 结核分枝杆菌检查：应与耻垢分枝杆菌相鉴别：应与耻垢分枝杆菌相鉴别 钩端螺旋体检查：暗视野显微镜下，发现一串细密亮珠、两：暗视野显微镜下，发现一串细密亮珠、两端呈钩状且沿纵轴旋转运动的螺旋体时，报告找到螺旋体端呈钩状且沿纵轴旋转运动的螺旋体时，报告找到螺旋体第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。）接种尿量（菌落数ml （2）尿液细菌计数 计算：cfu/ml=菌落数稀释倍数 或cfu/m

31、l= 意义 革兰阳性球菌大于104cfu/ml,革兰阴性杆菌大于105cfu/ml，应考虑为泌尿系统感染）接种尿量（菌落数ml第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。淋球菌菌落淋球菌菌落（3）分离培养与鉴定 普通细菌培养：沉淀物：沉淀物血平板和麦康凯平板血平板和麦康凯平板3535培养培养菌落观察菌落观察染色镜检、生化反应、抗菌药物染色镜检、生化反应、抗菌药物敏感试验敏感试验 淋病奈瑟菌培养：标本：标本TMTM或或MTMMTM平板平板 35

32、35、 5 51010COCO2 2环境环境疑似菌落疑似菌落涂片镜检、生化反应鉴定涂片镜检、生化反应鉴定第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。4.结果报告 初级报告：标本涂片染色镜检结果，如：标本涂片染色镜检结果，如“找到革兰找到革兰阴性双球菌，存在于细胞内（外），形似淋病奈瑟菌阴性双球菌，存在于细胞内（外），形似淋病奈瑟菌” 最终报告：报告细菌种属、菌落计数、药物敏感性：报告细菌种属、菌落计数、药物敏感性试验、结果评价及建议试验、结果

33、评价及建议 阴性报告：4848小时无细菌生长者，报告小时无细菌生长者，报告“4848小时培小时培养无细菌生长养无细菌生长”第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。（三）临床意义 尿液中细菌数少于尿液中细菌数少于10104 4cfucfumlml或或10104 410105 5cfu/mlcfu/ml之间，之间，反复多次反复多次查出同一细菌时，一般也认为是病原菌。查出同一细菌时，一般也认为是病原菌。 同份尿液中检出三种或以上不同微生物，应认

34、为标本采同份尿液中检出三种或以上不同微生物，应认为标本采集或处理不当被污染。集或处理不当被污染。 尿液细菌学检查结果，应结合临床考虑综合尿液细菌学检查结果，应结合临床考虑综合第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。直肠肛拭子直肠肛拭子四、粪便标本的细菌学检验（一）标本的采集1.自然排便法 脓血、黏液粪便23克2.直肠拭子法 成人45厘米 幼儿23厘米3.标本的运送和保存 卡-布（Cary-Blair）运送培养基第二节 临床常见标本的细菌学

35、检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。（二）微生物学检验 1.常见病原菌第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。2.检验程序第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安

36、防控工程”。3.检验方法（1）涂片检查 霍乱弧菌检查：动力检查：动力及制动试验动力检查：动力及制动试验染色镜检：革兰染色，发现鱼群状排列的革兰阴性弧菌，染色镜检：革兰染色，发现鱼群状排列的革兰阴性弧菌，可做出初步报告可做出初步报告 酵母样菌检查第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。葡萄球菌葡萄球菌艰难梭菌艰难梭菌弯曲菌弯曲菌（1）涂片检查 葡萄球菌、艰难梭菌、弯曲菌检查 粪便中优势菌检查：推定主要优势菌并及时报告结果第二节 临床常见标本

37、的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。沙门菌沙门菌志贺菌志贺菌（2）分离培养与鉴定 沙门菌及志贺菌培养粪便或直肠拭子粪便或直肠拭子SSSS平板、麦康凯平板、平板、麦康凯平板、GNGN增菌液增菌液3535、需氧培养需氧培养可疑菌落可疑菌落生化试验、血清学反应鉴定生化试验、血清学反应鉴定第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“

38、群众性治安防控工程”。 五种致病性大肠埃希菌 ETEC-ETEC-肠产毒大肠埃希菌肠产毒大肠埃希菌 EPEC- EPEC-肠致病大肠埃希菌肠致病大肠埃希菌 EIEC- EIEC-肠侵袭大肠埃希菌肠侵袭大肠埃希菌 EHEC- EHEC-肠出血大肠埃希菌肠出血大肠埃希菌 EaggEC EaggEC肠凝聚性大肠埃希菌肠凝聚性大肠埃希菌（2）分离培养与鉴定 致病性大肠埃希菌培养脓血或糊状粪便脓血或糊状粪便麦康凯麦康凯/ /伊红美蓝伊红美蓝/ /中国蓝平板中国蓝平板3535、需氧培养需氧培养可疑菌落可疑菌落生化反应、多价血清凝集试验鉴定生化反应、多价血清凝集试验鉴定第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮

39、工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。 霍乱弧菌培养米泔水样粪便米泔水样粪便碱性蛋白胨水增菌碱性蛋白胨水增菌碱碱性琼脂平板或性琼脂平板或TCBSTCBS平板平板3535需氧培养需氧培养 可疑菌落可疑菌落形态检查、动力及制动试形态检查、动力及制动试验、血清学试验鉴定验、血清学试验鉴定 副溶血性弧菌培养粪便、可疑食物、呕吐物粪便、可疑食物、呕吐物3.5%NaCl3.5%NaCl蛋蛋白胨水增菌白胨水增菌SSSS平板、平板、TCBSTCBS平板平板3535需氧培养需氧培养可疑菌落可

40、疑菌落生化试验及耐盐生化试验及耐盐试验鉴定试验鉴定第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。 金黄色葡萄球菌培养 粪便、肛拭子、可疑食物粪便、肛拭子、可疑食物甘露醇高甘露醇高盐琼脂平板、血琼脂平板盐琼脂平板、血琼脂平板3535需氧培需氧培养养可疑菌落可疑菌落革兰染色、凝固酶、革兰染色、凝固酶、DNADNA酶及甘露醇发酵鉴定酶及甘露醇发酵鉴定 小肠结肠耶尔森菌培养 标本标本 NYENYE、1/15M1/15M磷酸盐増菌液磷酸盐増菌液4 4 、

41、25253030、3535、需氧环境、需氧环境可疑菌落可疑菌落生化反应、血清学试验鉴定生化反应、血清学试验鉴定第二节 临床常见标本的细菌学检验小肠结肠炎耶尔森菌小肠结肠炎耶尔森菌“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。 空肠弯曲菌培养标本标本Camp-BAPCamp-BAP、SkirrowSkirrow或或ButzlerButzler血琼脂血琼脂4343、微需氧环、微需氧环境境有色半透明菌落有色半透明菌落动力、生化试验鉴定。动力、生化试验鉴定。 艰难梭菌培养标本标本CC

42、FACCFA平板平板3535、厌氧环境、厌氧环境可疑菌落可疑菌落生化鉴定、毒生化鉴定、毒素试验素试验第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。 真菌培养标本标本沙保弱琼脂平板、血琼脂平板沙保弱琼脂平板、血琼脂平板2525及及3737培养培养可疑菌落可疑菌落镜检、芽管及厚膜孢子试验等鉴定镜检、芽管及厚膜孢子试验等鉴定4.结果报告 初级报告：镜检典型阳性结果，报告临床。初级报告：镜检典型阳性结果，报告临床。 最终报告：报告细菌种属、药敏试验、结

43、果评价及建最终报告：报告细菌种属、药敏试验、结果评价及建议；检出霍乱弧菌应立即向当地疾病预防控制中心报告议；检出霍乱弧菌应立即向当地疾病预防控制中心报告 阴性报告：根据分离目的菌而定阴性报告：根据分离目的菌而定第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。（三）临床意义 能引起肠道感染的常见致病菌有沙门菌、志贺菌、霍乱能引起肠道感染的常见致病菌有沙门菌、志贺菌、霍乱弧菌及致病性大肠埃希菌等。弧菌及致病性大肠埃希菌等。 能引起食物中毒的常见致病菌

44、有沙门菌、副溶血弧菌、能引起食物中毒的常见致病菌有沙门菌、副溶血弧菌、致病性大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、肉毒梭菌、蜡样芽致病性大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、肉毒梭菌、蜡样芽胞杆菌等胞杆菌等 幽门螺杆菌是引起胃炎、消化性溃疡主要致病菌，胃癌幽门螺杆菌是引起胃炎、消化性溃疡主要致病菌，胃癌的危险因子的危险因子第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。互动讨论 正常人粪便中含有大量细正常人粪便中含有大量细菌，而能引起肠道感染的细菌菌，而能引起肠道感

45、染的细菌种类较多，致病菌和正常菌往种类较多，致病菌和正常菌往往共存生长。试分析如何快速往共存生长。试分析如何快速准确的检出致病菌？准确的检出致病菌？ 第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。五、痰液（呼吸道）标本的细菌学检验（一）标本的采集 1.自然咳痰法晨痰最佳，深部痰晨痰最佳，深部痰2.小儿取痰法3.特殊器械采集法4.标本的运送和保存立即送检，室温不超过立即送检，室温不超过2 2小时小时第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区

46、（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。（二）微生物学检验 1.常见病原菌 第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。2.检验程序第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。白细胞

47、数(LP)上皮细胞数(LP)细菌培养25个10个合格10个25个不合格3.检验方法 （1）涂片检查目的:确定标本是否适合做细菌培养确定标本是否适合做细菌培养为选用培养基提供参考为选用培养基提供参考适合细菌培养的痰液镜检标准第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。（1）涂片检查 普通细菌检查：涂片行革兰染色镜检，根据染色性、形态及排列初步报告 结核杆菌检查：制成厚涂片，抗酸染色镜检 放线菌及诺卡菌检查硫磺样颗粒涂片硫磺样颗粒涂片衣氏放线菌衣

48、氏放线菌第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。痰培养前的处理痰液的洗净痰液的洗净痰液的均质化痰液的均质化 普通细菌培养 嗜肺军团菌培养标本标本血琼脂、巧克力琼脂和血琼脂、巧克力琼脂和BCYEBCYE琼脂平板琼脂平板3535，5 51010COCO2 2环境环境根据培养时间、菌落特点等鉴定根据培养时间、菌落特点等鉴定（2）细菌的培养与鉴定第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以

49、综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。异染颗粒异染颗粒 白喉棒状杆菌培养标本标本吕氏血清斜面、血琼脂平板和亚碲酸钾琼脂平板吕氏血清斜面、血琼脂平板和亚碲酸钾琼脂平板3535、需氧环境、需氧环境典型菌落典型菌落形态、生化试验、毒力试形态、生化试验、毒力试验验第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控联网应用为重点的“群众性治安防控工程”。百日咳鲍特菌在百日咳鲍特菌在CCBA培养基菌落培养基菌落 鲍特菌培养 标本标本鲍鲍- -

50、金培养基金培养基3535、需氧环境、需氧环境可疑菌落可疑菌落涂片镜检、涂片镜检、生化及血清学试验等鉴定生化及血清学试验等鉴定4.结果报告 初级报告：典型阳性结果，立即向临床报告初级报告：典型阳性结果，立即向临床报告 最终报告：报告细菌种属、药敏试验、各细菌所占比例、结果最终报告：报告细菌种属、药敏试验、各细菌所占比例、结果评价及建议评价及建议 阴性报告：报告阴性报告：报告“正常菌群正常菌群”或或“生长细菌的种类、数量生长细菌的种类、数量”第二节 临床常见标本的细菌学检验“雪亮工程是以区（县）、乡（镇）、村（社区）三级综治中心为指挥平台、以综治信息化为支撑、以网格化管理为基础、以公共安全视频监控