第11章---生物传感器ppt课件.ppt
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1、 1生生 物物 传传 感感 器器(biosensor) 2目录目录v11.1 11.1 简要介绍简要介绍v11.2 11.2 酶传感器酶传感器v11.3 11.3 微生物传感器微生物传感器v11.4 11.4 免疫传感器免疫传感器v11.5 11.5 半导体生物传感器半导体生物传感器v11.6 11.6 生物传感器应用与未来生物传感器应用与未来v本章小结本章小结 311.1 简要介绍简要介绍v生物传感器的发展史生物传感器的发展史v定义及说明定义及说明v生物传感器的基本组成和工作原理生物传感器的基本组成和工作原理v生物传感器的分类生物传感器的分类v生物传感器的固定方法生物传感器的固定方法v生物传
2、感器的特点生物传感器的特点 4生物传感器的发展史生物传感器的发展史(1)(1)v最先问世的生物传感器是最先问世的生物传感器是酶电极酶电极,ClarkClark和和LyonsLyons最先提出组成酶电极最先提出组成酶电极的设想。的设想。v7070年代中期,人们注意到酶电极的年代中期,人们注意到酶电极的寿命一般都比较短,提纯的酶价格寿命一般都比较短,提纯的酶价格也较贵,而各种酶多数都来自微生也较贵,而各种酶多数都来自微生物或动植物组织,因此自然地就启物或动植物组织,因此自然地就启发人们研究发人们研究酶电极的衍生型酶电极的衍生型:微生:微生物电极、细胞器电极、动植物组织物电极、细胞器电极、动植物组织
3、电极以及免疫电极等新型生物传感电极以及免疫电极等新型生物传感器,使生物传感器的类别大大增多;器,使生物传感器的类别大大增多;v 进入本世纪进入本世纪8080年代之后,随着离子年代之后,随着离子敏场效应晶体管的不断完善,于敏场效应晶体管的不断完善,于19801980年年CarasCaras和和JanafaJanafa率率先研制成功先研制成功可测定青霉素的可测定青霉素的酶酶FETFET。 年代年代 特点特点 研究内容研究内容 60 60 生物传生物传感器初期感器初期 酶电极酶电极7070 发展时发展时期期 微生物传感器,微生物传感器,免疫传感器,免疫传感器,细胞类脂质传细胞类脂质传感器,组织传感器
4、,组织传感器,生物亲感器,生物亲和传感器和传感器8080进入生物进入生物电子学传电子学传感器时期感器时期酶酶FETFET酶光二极管酶光二极管 5生物传感器发展的整体划分生物传感器发展的整体划分: :v第一代生物传感器以第一代生物传感器以将生物成分截留在膜上或结合在膜将生物成分截留在膜上或结合在膜上上为基础,这类器件由透析器为基础,这类器件由透析器( (膜膜) )、反应器、反应器( (膜膜) )和电化和电化学转换器所组成,其实验设备相当简单。学转换器所组成,其实验设备相当简单。v第二代生物传感器是指将第二代生物传感器是指将生物成分直接吸附或共价结合生物成分直接吸附或共价结合在转换器的表面在转换器
5、的表面上,从而可略去非活性的基质膜。上,从而可略去非活性的基质膜。v第三代生物传感器是第三代生物传感器是把生物成分直接固定在电子元件上把生物成分直接固定在电子元件上,例如例如FETFET的栅极上,它可直接感知和放大界面物质的变化,的栅极上,它可直接感知和放大界面物质的变化,从而将生物识别和电信号处理集合在一起。这种放大器从而将生物识别和电信号处理集合在一起。这种放大器可采用差分方式以消除干扰。可采用差分方式以消除干扰。生物传感器的发展史生物传感器的发展史(2) 6快速葡萄糖分析仪快速葡萄糖分析仪 7血糖乳酸自动分析仪血糖乳酸自动分析仪 8生物传感器定义及说明生物传感器定义及说明v生物传感器利用
6、生物活性物质选择性的识别和生物传感器利用生物活性物质选择性的识别和测定实现测量,主要由两大部分组成:一为测定实现测量,主要由两大部分组成:一为功功能识别物质能识别物质(分子识别元件),由其对被测物(分子识别元件),由其对被测物质进行特定识别;其二是质进行特定识别;其二是电、光信号转换装置电、光信号转换装置(换能器),由其把被测物所产生的化学反应(换能器),由其把被测物所产生的化学反应转换成便于传输的电信号或光信号。转换成便于传输的电信号或光信号。 9生物传感器的基本组成和工作原理生物传感器的基本组成和工作原理v生物传感器的基本组成生物传感器的基本组成v生物传感器的工作原理分类生物传感器的工作原
7、理分类 10生物传感器基本构成示意图生物传感器基本构成示意图 11生物传感器的分子识别元件生物传感器的分子识别元件 分子识别元件分子识别元件 生物活性材料生物活性材料酶膜酶膜全细胞膜全细胞膜组织膜组织膜细胞器膜细胞器膜免疫功能膜免疫功能膜各类酶类各类酶类细菌,真菌,动植物细胞细菌,真菌,动植物细胞动植物组织切片动植物组织切片线粒体,叶绿体线粒体,叶绿体抗体,抗原,酶标抗原等抗体,抗原,酶标抗原等 12生物传感器的工作原理生物传感器的工作原理 13生物传感器的工作原理生物传感器的工作原理1.将化学变化转变成电信号(间接型)将化学变化转变成电信号(间接型)2.将热变化转换为电信号(间接型)将热变化
8、转换为电信号(间接型)3.将光效应转变为电信号(间接型)将光效应转变为电信号(间接型)4.直按产生电信号方式(直接型)直按产生电信号方式(直接型) 化学物质 物理 热被测 化学 (产生 光 ) 电信号物质 变化 声生物敏感膜电化学器件热敏元件光敏元件声敏元件 14将化学变化转变成电信号的生物传感器将化学变化转变成电信号的生物传感器 15将热变化转换为电信号的生物传感器将热变化转换为电信号的生物传感器热辐射热辐射热传导热传导 16将光效应转变为电信号的生物传感器将光效应转变为电信号的生物传感器 被测物 h 电信号固定化酶光检测器 17直按产生电信号方式的生物传感器直按产生电信号方式的生物传感器
9、例:Cass 等提出一种测定葡萄糖的传感器,是用二茂二茂络铁络铁为电子传递体。G G、GLGL代表葡萄糖和葡萄糖内脂,代表葡萄糖和葡萄糖内脂,GODGODoxox和和GODGODredred为氧化型和还原为氧化型和还原型的葡萄糖氧化酶,而型的葡萄糖氧化酶,而FeFecp2cp2R R和和FeFecp2cp2R R+ +则为还原型和氧化型二茂则为还原型和氧化型二茂络铁。络铁。葡萄糖被葡萄糖被GODGOD氧化的同时,氧化的同时,GODGOD被还原成被还原成GODGODredred,氧化型的电子,氧化型的电子传递体传递体2Fe2Fecp2cp2R R+ +可将可将GODredGODred再氧化成再氧
10、化成GODGODoxox反应直接在电极表面上发生反应直接在电极表面上发生 18Love is ever the beginning of knowledge as fire is of light. Thomas Carlyle 知识总是从爱好开始,犹如光总是从火开始一样。知识总是从爱好开始,犹如光总是从火开始一样。 19生物传感器的特点生物传感器的特点1.1.根据生物反应的奇异和多样性,从理论上讲可以制根据生物反应的奇异和多样性,从理论上讲可以制造出测定所有生物物质的多种多样的生物传感器;造出测定所有生物物质的多种多样的生物传感器;2.2.这类生物传感器是在无试剂条件下工作的这类生物传感器是
11、在无试剂条件下工作的( (缓冲液缓冲液除外除外) ),比各种传统的生物学和化学分析法操作简,比各种传统的生物学和化学分析法操作简便、快速、准确;便、快速、准确;3.3.可连续测量、联机操作、直接显示与读出测试结果可连续测量、联机操作、直接显示与读出测试结果。 20生物传感器的分类生物传感器的分类v按分子识别元件分类按分子识别元件分类v按换能器分类按换能器分类 21 固定化酶 固定化 微生物 固定化免疫物质 固定化细胞器 生物组织切片微生物微生物传感器传感器分子识别分子识别元件元件酶传感器酶传感器免疫传感器免疫传感器细胞器传感器细胞器传感器组织传感器组织传感器按分子识别元件分类按分子识别元件分类
12、 22按器件分类按器件分类 电化学电极 光学换能器 介体 半导体 传递系统 换能器 热敏电阻 压电晶体介体生物传感器介体生物传感器换能器半导体生物半导体生物传感器传感器生物电极生物电极光生物传感器光生物传感器热生物传感器热生物传感器压电晶体生物传感器压电晶体生物传感器 23生物传感器的生物传感器的固定方法固定方法固定化技术:把生物活性材料与固定化技术:把生物活性材料与载体载体固定化成固定化成为生物敏感膜。为生物敏感膜。1.1.物理方法:夹心法、吸附法、包埋法;物理方法:夹心法、吸附法、包埋法;2.2.化学方法化学方法: : 共价连接法、交联法;共价连接法、交联法;3.3. 近年来近年来, ,
13、由于半导体生物传感器迅速发展由于半导体生物传感器迅速发展, , 因而又出现了采用集成电路工艺制膜技术。因而又出现了采用集成电路工艺制膜技术。 24夹心法夹心法v将生物活性材料封闭将生物活性材料封闭在双层滤膜之间,形在双层滤膜之间,形象地称为夹心法。象地称为夹心法。v这种方法的特点是操这种方法的特点是操作简单,不需要任何作简单,不需要任何化学处理,固定生物化学处理,固定生物量大,响应速度快,量大,响应速度快,重复性好。重复性好。 25吸附法吸附法v用非水溶性固相载体用非水溶性固相载体物理吸附或离子结合,物理吸附或离子结合,使蛋白质分子固定化使蛋白质分子固定化的方法。的方法。v载体种类较多,如活载
14、体种类较多,如活性炭、高岭土、硅胶、性炭、高岭土、硅胶、玻璃、纤维素、离子玻璃、纤维素、离子交换体等。交换体等。 26包埋包埋法法v把生物活性材料包埋并固把生物活性材料包埋并固定在高分子聚合物三维空定在高分子聚合物三维空间网状结构基质中。间网状结构基质中。v此方法的特点是一般不产此方法的特点是一般不产生化学修饰,对生物分子生化学修饰,对生物分子活性影响较小;缺点是分活性影响较小;缺点是分子量大的底物在凝胶网格子量大的底物在凝胶网格内扩散较固难。内扩散较固难。 27 A. A. 单体氧化剂配比为单体氧化剂配比为1 1:2 B. 2 B. 单体氧化剂配比为单体氧化剂配比为1 1:4 4C. 单体氧
15、化剂配比为单体氧化剂配比为1:5 D. 单体氧化剂配比为单体氧化剂配比为1:6 E E聚合反应时间为聚合反应时间为1515分钟分钟 F. F. 聚合反应时间为聚合反应时间为2525分钟分钟G. G. 聚合反应时间为聚合反应时间为3535分钟分钟 28共价连接法共价连接法v使生物活性分子通过使生物活性分子通过共共价键价键与固相载体结合固与固相载体结合固定的方法。定的方法。v此方法的特点是结合牢此方法的特点是结合牢固,生物活性分子不易固,生物活性分子不易脱落,载体不易被生物脱落,载体不易被生物降解,使用寿命长;降解,使用寿命长;v缺点是实现固定化麻烦,缺点是实现固定化麻烦,酶活性可能因发生化学酶活
16、性可能因发生化学修饰而降低。修饰而降低。 29交联法交联法v依靠双功能团试剂使蛋依靠双功能团试剂使蛋白质结合到惰性载体或白质结合到惰性载体或蛋白质分子彼此交联成蛋白质分子彼此交联成网状结构。网状结构。v这种方法广泛用于酶膜这种方法广泛用于酶膜和免疫分子膜制备,操和免疫分子膜制备,操作简单。作简单。 3011.2 酶传感器酶传感器v酶传感器信号变换方式酶传感器信号变换方式v葡萄糖传感器葡萄糖传感器 31 酶传感器:酶敏感膜酶传感器:酶敏感膜+电化学器件电化学器件酶的催化作用是在一定条件下使底物分酶的催化作用是在一定条件下使底物分解,故酶的催化作用实质上是加速底物解,故酶的催化作用实质上是加速底物
17、分解速度。分解速度。 32信号变换方式信号变换方式(1)(1)电位法电位法 电位法是通过不同离子生成在不同感受体,从电位法是通过不同离子生成在不同感受体,从测得膜电测得膜电位去计算与酶反应有关的各种离子的浓度位去计算与酶反应有关的各种离子的浓度。一般采用铵离。一般采用铵离子电极(氨气电极)、氢离子电极、氧化碳电极等;子电极(氨气电极)、氢离子电极、氧化碳电极等;(2)(2)电流法电流法 电流法是从与酶反应有关的物质的电流法是从与酶反应有关的物质的电极反应得到的电流电极反应得到的电流值来计算被测物质值来计算被测物质的方法。电化学装置采用的是氧电极。的方法。电化学装置采用的是氧电极。燃料电池型电极
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