《微生物的实验室培养》ppt课件.ppt

《《微生物的实验室培养》ppt课件.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《《微生物的实验室培养》ppt课件.ppt（57页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、微生物微生物病毒病毒细菌细菌放线菌放线菌真菌真菌原生动物原生动物是一切肉眼看不见或看不清楚的微是一切肉眼看不见或看不清楚的微小小生物生物的总称。的总称。一、微生物一、微生物特点：小特点：小 简简 低低病病毒毒的的结结构构病毒病毒病病 毒毒 SARS冠状病毒、冠状病毒、 禽流感病毒禽流感病毒朊病毒（蛋白质病毒）朊病毒（蛋白质病毒）细菌的外形与大小细菌的外形与大小细菌细菌 A. A. 球菌球菌 B. B. 杆菌杆菌 C. C. 弧菌弧菌 常见的细菌三种典型形态常见的细菌三种典型形态ABC细菌的结构细菌的结构芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的

2、抵抗力。环境有很强的抵抗力。芽孢又小又轻，可以随风飘散。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌。又可以萌发，形成一个细菌。芽孢：芽孢：细菌形成的细菌形成的椭圆形的休眠体椭圆形的休眠体菌落菌落单个或少数细菌在固体培养基上大单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。菌落。菌落是鉴定菌种的菌落是鉴定菌种的重要依据。重要依据。菌落细菌的菌落特征细菌的菌落特征因种而异因种而异 放

3、线菌放线菌结构结构：单细胞原核生物单细胞原核生物分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝）（2）繁殖）繁殖孢孢子子丝丝|孢孢子子链霉素、土霉素、四环素、链霉素、土霉素、四环素、氯霉素、红霉素、庆大霉素氯霉素、红霉素、庆大霉素 微生物中发现了几千种抗生素，其微生物中发现了几千种抗生素，其中中2/3是由放线菌产生的是由放线菌产生的 应用应用:真菌真菌酵母菌酵母菌酵母菌和霉菌酵母菌和霉菌青霉青霉生生 殖殖腐生生活腐生生活孢子生殖孢子生殖微生物的实验室微生物的实验室培养条件：培养条件：（1）合适的营养和环境条件）合适的营养和环境条件（2）确保其他微生物无法混入）确保其他微生物无

4、法混入二二. 培养基培养基 1. 概念：概念： 按照微生物对按照微生物对营养物质营养物质的不同需求，配制出的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。供其生长繁殖的营养基质。液体培养基液体培养基固体培养基固体培养基据物理性质分据物理性质分天然培养基天然培养基合成培养基合成培养基据化学成分分据化学成分分选择培养基选择培养基鉴别培养基鉴别培养基据用途分据用途分常用于工业生产常用于工业生产用于微生物的分离、用于微生物的分离、鉴定、计数鉴定、计数加琼脂加琼脂常用于工业生产常用于工业生产常用于分类、鉴定常用于分类、鉴定培养、分离出特定微生物培养、分离出特定微生物鉴别不同种类的微生物鉴别不同种类的微生物在培

5、养基中加入某种化学在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要生物的生长，促进所需要的微生物的生长。的微生物的生长。根据微生物的代谢特点，在根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成。化学药品配制而成。加入高浓度食盐的培养基加入高浓度食盐的培养基: : 不加氮源的无氮培养基不加氮源的无氮培养基: : 不加含碳有机物的无碳培养基不加含碳有机物的无碳培养基: : 加入青霉素等抗生素的培养基加入青霉素等抗生素的培养基: : 选择培养基选择培养基分离酵母菌、霉菌等真菌分离酵母菌、霉菌等真菌分离金黄色葡萄球菌分离金

6、黄色葡萄球菌分离固氮菌分离固氮菌分离自养型微生物分离自养型微生物伊红和美蓝伊红和美蓝, ,和大肠杆菌的代谢产物结合和大肠杆菌的代谢产物结合, ,使菌落使菌落呈呈深紫色深紫色, ,并带有金属光泽并带有金属光泽, ,可以用来鉴别大肠杆菌可以用来鉴别大肠杆菌鉴别培养基鉴别培养基大肠杆菌大肠杆菌如如:生长因子生长因子(即细菌生长即细菌生长必需，而自身不能合成的必需，而自身不能合成的化合物化合物,如维生素、某些氨如维生素、某些氨基酸、碱基基酸、碱基)牛肉膏牛肉膏当中含有多肽类、氨基酸类、核苷酸类、有牛肉膏当中含有多肽类、氨基酸类、核苷酸类、有机酸类、矿物质类及维生素等物质。机酸类、矿物质类及维生素等物质

7、。该产品广泛应该产品广泛应用于生物制药发酵及各种培养基的制备。用于生物制药发酵及各种培养基的制备。牛肉膏是采用新鲜牛肉牛肉膏是采用新鲜牛肉经过消化、过滤、浓缩经过消化、过滤、浓缩而得到的一种棕黄色至而得到的一种棕黄色至棕褐色的膏状物。有牛棕褐色的膏状物。有牛肉自然香味，易溶于水，肉自然香味，易溶于水，水溶液呈淡黄色。水溶液呈淡黄色。蛋白胨不同的生物体需要特定的氨基酸和多肽，因此存在着不同的生物体需要特定的氨基酸和多肽，因此存在着各种蛋白胨，各种蛋白胨，一般来说，用于蛋白胨生产的蛋白包括一般来说，用于蛋白胨生产的蛋白包括动物蛋白（肉类）和植物蛋白（豆类）等两种。动物蛋白（肉类）和植物蛋白（豆类）

8、等两种。蛋白胨是一种外观呈蛋白胨是一种外观呈淡黄色的粉剂，具有淡黄色的粉剂，具有肉香的特殊气息。它肉香的特殊气息。它可以作为微生物培养可以作为微生物培养基的主要原料。基的主要原料。吸管、培养皿等吸管、培养皿等160170、12h接种环、接种针等接种环、接种针等7075、30min 80、15min100、56min消毒消毒灭菌灭菌定定义义方方法法较为较为温和的理化方法温和的理化方法，杀死物体表面或内部的杀死物体表面或内部的部分微生物部分微生物（不包括芽孢、孢子）（不包括芽孢、孢子）使用使用强烈的理化因素强烈的理化因素杀死物体内外杀死物体内外所有的所有的微生物。微生物。（包括芽孢、孢子）（包括芽

9、孢、孢子）煮沸消毒法煮沸消毒法巴氏消毒法巴氏消毒法化学药剂消毒化学药剂消毒灼烧灭菌灼烧灭菌干热灭菌干热灭菌高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌酒精、氯气、石炭酸等酒精、氯气、石炭酸等紫外线紫外线培养基，培养基，100KPa、121、1530min四四. 实验操作实验操作-大肠杆菌的纯化培养大肠杆菌的纯化培养（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 计算称量溶化灭菌计算称量溶化灭菌倒平板倒平板（冷却至（冷却至50）倒平板操作倒平板操作（二）纯化大肠杆菌最常用的方法：最常用的方法：平板划线法平板划线法和和稀释涂布平板法稀释涂布平板法接种环接种环接种针接种针平板划线的操作方法平板划线的操

10、作方法平板划线法平板划线法 一旦划破，会造成划线不均匀，一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的；难以达到分离单菌落的目的； 二是存留在划破处的单个细胞无法二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。处生长，会形成一个条状的菌落。 一旦划破，会造成划线不均匀，一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的；难以达到分离单菌落的目的； 二是存留在划破处的单个细胞无法二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。处生长，会形成一个条

11、状的菌落。稀释涂布平板法稀释涂布平板法涂布器涂布器菌落数在菌落数在3030300300间计数效果较好。间计数效果较好。 1 1、临时保藏法：、临时保藏法： 对象：对象： 温度：温度： 缺点：缺点： 2 2、甘油管藏法：、甘油管藏法： 对象：对象： 温度：温度： 结果分析与评价结果分析与评价 课题延伸课题延伸（P20）频繁使用的菌种频繁使用的菌种 44（冰箱）（冰箱） 容易被污染或容易被污染或产生变异产生变异 长期保存的菌种长期保存的菌种 -20-20（冷冻箱）（冷冻箱） 1.1.关于微生物营养物质的叙述中，正确的是关于微生物营养物质的叙述中，正确的是( )( ) A. A.是碳源的物质不可能同

12、时是氮源是碳源的物质不可能同时是氮源 B. B.凡碳源都提供能量凡碳源都提供能量 C. C.除水以外的无机物只提供无机盐除水以外的无机物只提供无机盐 D. D.无机氮源也能提供能量无机氮源也能提供能量2.2.下面对灭菌的理解不正确的是下面对灭菌的理解不正确的是( () )A.A.防止杂菌污染防止杂菌污染B.B.消灭杂菌消灭杂菌C.C.培养基和发酵设备都必须灭菌培养基和发酵设备都必须灭菌 D.D.灭菌必须在接种前灭菌必须在接种前3.3.某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。

13、请回答与此实验括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。相关的问题。（1 1）培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了）培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了 和和 。除此之外，培养基还必须含有的基本成分。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是是 和和 。（2 2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是 。（3 3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于平板置于 中培养，培养的温度设定在中培养，培养的温度设定在3737。要使该实验所得。要使该实

14、验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种结果可靠，还应该同时在另一平板上接种 作为对照进行实验。作为对照进行实验。（4 4）培养）培养2020小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有明湖水样品中有 种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越细菌污染的程度越 。（5 5）如果提高培养基中）如果提高培养基中NaClNaCl的浓度，可以用于筛选耐的浓度，可以用于筛选耐 细菌，这细菌，这种培养基被称为种培养基被称为 。氮源氮源碳源碳源无机盐无机盐水水高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌恒温箱恒温箱无菌水无菌水多多高高选择培养基选择培养基盐盐