生物选修3基因工程ppt课件.ppt

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1、变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分一、基因工程的概念一、基因工程的概念基因工程的别名基因工程的别名基因拼接技术或基因拼接技术或DNA重组技术重组技术操作对象操作对象操作环境操作环境操作水平操作水平基本过程基本过程结果结果生物体外生物体外基基 因因DNA分子水平分子水平剪切、拼接、导入、表达剪切、拼接、导入、表达人类需要的基因产物人类需要的基因产物基因工程基因工

2、程： 按照人们的意愿，把一种生物的某种按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取基因提取出来，出来，加以加以修饰改造修饰改造，然后放到另一种生物的，然后放到另一种生物的细胞细胞里，里，定定向向地改造生物的地改造生物的遗传性状遗传性状。基因拼接技术或基因拼接技术或DNA重组技术重组技术变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分限制酶切开的是什么键？限制酶切开的是什么键？（左上与右下相同，左下与右上相同）（左上与右下相同，左下与右上相同）磷酸二酯键磷酸二酯键变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与

3、电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶1）特点：）特点：2）结果：）结果：3）功能：）功能：4）来源：）来源：专一性（即专一性（即识别特定核苷酸序列识别特定核苷酸序列，在，在特定的特定的切点切割切点切割）产生黏性末端或平末端产生黏性末端或平末端切开每条链中两个脱氧核苷酸切开每条链中两个脱氧核苷酸之间的之间的磷酸磷酸二酯键二酯键原核生物原核生物左上与右下相同左上与右下相同左下与右上相同左下与右上相同变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中

4、一个重要组成部分磷酸二磷酸二酯键酯键磷酸二磷酸二酯键酯键思考：思考：1 1、限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶与与DNADNA水解酶水解酶相比有何不同？相比有何不同？DNADNA水解酶将水解酶将DNADNA分子水解分子水解成单个核苷酸，限制性核成单个核苷酸，限制性核酸内切酶只能将酸内切酶只能将DNADNA分子分子分解成特定的分解成特定的DNADNA片段片段变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分2 2、末端特点？、末端特点？1 1、EcoRIEcoRI、SmaISmaI限制酶识别序列？切点？限制酶识别

5、序列？切点？变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分5-A3-TTCGAAGCTT-3 A-55-CTGCA 3-G G-3ACGTC-55-AAT3-TTAGGG-3CCC-55-CCC3-GGGATT-3TAA-5变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分作用实质：作用实质：结果：结果： 具有缝合具有缝合DNA片段的作用片段的作用形成磷酸二酯键形成磷酸二酯键种类：种类：Ecoli DNA连接酶连接酶T4

6、 DNA连接酶连接酶 连接黏性末端连接黏性末端既能连接黏性末端，既能连接黏性末端，又可以连接平末端又可以连接平末端 DNADNA连接酶与连接酶与DNADNA聚合酶异同？聚合酶异同？变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分ATCATGGCTT A ADNA连接酶连接酶变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分CGCTT A AGAATTDNA聚合酶聚合酶变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系

7、统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分 DNADNA连接酶连接酶 DNADNA聚合酶聚合酶相同点相同点不不同同点点模板模板作用作用对象对象作用作用结果结果用途用途DNADNA连接酶与连接酶与DNADNA聚合酶的比较聚合酶的比较催化两个脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键催化两个脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键不需要模板不需要模板以以DNADNA的一条链为模板的一条链为模板游离的游离的DNADNA片段片段单个的脱氧核苷酸单个的脱氧核苷酸形成完整的形成完整的DNADNA分子分子形成形成DNADNA的一条链的一条链基因工程基因工程DNADNA复制复制变电站电气主接线是指

8、变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分运载体种类：种类：质粒的特点：质粒的特点：（3 3）常含有标记基因（如：抗生素抗）常含有标记基因（如：抗生素抗性基因、抗生素合成基因、固氮性基因、抗生素合成基因、固氮基因、色素基因）基因、色素基因）质粒、噬菌体质粒、噬菌体可以将外源基因载入大肠杆菌等宿主细胞中，而可以将外源基因载入大肠杆菌等宿主细胞中，而植物植物病毒和动物病毒病毒和动物病毒能够将外源基因分别带到植物细胞和动物细胞中能够将外源基因分别带到植物细胞和动物细胞中质粒、质粒、 噬菌体的衍生物、动植物病毒。噬菌体的衍生物、

9、动植物病毒。（1）细胞质中能自主复制的小型双链）细胞质中能自主复制的小型双链环状环状DNA分子；以独立于染色体（或分子；以独立于染色体（或拟核拟核DNA分子）之外的方式存在。分子）之外的方式存在。（2）存在于许多细菌及酵母菌等生）存在于许多细菌及酵母菌等生物体内物体内（4）能在受体细胞中复制并稳定保存）能在受体细胞中复制并稳定保存（5）具有一个至多个）具有一个至多个切点，供外源切点，供外源DNA片段插入片段插入变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与

10、电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分能自我复制并带能自我复制并带着插入的目的基着插入的目的基因一起复制因一起复制有切割位点有切割位点有标记基因的存有标记基因的存在，将来可用含在，将来可用含青霉素的培养基青霉素的培养基鉴别。鉴别。变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分3、DNA连接酶催化的反应是连接酶催化的反应是(

11、)ADNA复制时母链与子链之间形成氢键复制时母链与子链之间形成氢键 B黏性末端碱基之间形成氢键黏性末端碱基之间形成氢键C两个两个DNA片段黏性末端之间的缝隙的连接片段黏性末端之间的缝隙的连接 DA、B、C都不正确都不正确C变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分4、作为基因的运输工具、作为基因的运输工具载体，必须具备的条载体，必须具备的条件及理由是件及理由是( )A、能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，、能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便于对目的基因进行筛选以便于对目的基因进行筛选

12、B、具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达、具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达C具有某些标记基因，以便于进行筛选具有某些标记基因，以便于进行筛选D、能够在宿主细胞中复制并稳定保存，以便为目、能够在宿主细胞中复制并稳定保存，以便为目的基因的插入的基因的插入C变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分1、目的基因的获取、目的基因的获取2、基因表达载体的构建、基因表

13、达载体的构建3、将目的基因导入受体细胞、将目的基因导入受体细胞4、目的基因的检测与鉴定、目的基因的检测与鉴定变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分 第一步：目的基因的获取第一步：目的基因的获取1 1、目的基因主要是指、目的基因主要是指 _编码蛋白质的结构基因编码蛋白质的结构基因2 2、方法：、方法：基因组文库基因组文库部分基因文库如：部分基因文库如：聚合酶链式反应聚合酶链式反应变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一

14、个重要组成部分逆转录酶逆转录酶DNADNA聚合酶聚合酶变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分蛋白质的氨基酸序列蛋白质的氨基酸序列mRNAmRNA的核苷酸序列的核苷酸序列基因的脱氧核苷酸序列基因的脱氧核苷酸序列推测推测推测推测目的基因目的基因化学合成化学合成变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分反转录法：反转录法： 目的基因的目的基因的mRNAmRNA杂交双链杂交双链( (单链单链RNA/RNA/单链单

15、链DNA)DNA)单链单链DNADNA反转录酶反转录酶DNADNA聚合酶聚合酶双链双链DNADNA( (目的基因目的基因) )根据已知的氨基酸根据已知的氨基酸序列合成序列合成DNADNA法法 ：蛋白质的氨基酸序列蛋白质的氨基酸序列mRNAmRNA的核苷酸序列的核苷酸序列基因的脱氧核苷酸序列基因的脱氧核苷酸序列推测推测推测推测目的基因目的基因化学合成化学合成变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分基因文库基因文库 基因组文库基因组文库部分基因文库部分基因文库（如（如: :cDNAcDNA文库文库）基因

16、文库？基因文库？将含有将含有某种生物某种生物不同基因的许多不同基因的许多DNADNA片断，片断，导入到导入到受体菌受体菌的群体中，各个受体菌分别含的群体中，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库有这种生物的不同基因，称为基因文库变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分受体菌的整个群体包含了这种生物的全部基因受体菌的整个群体包含了这种生物的全部基因基因组文库的构建模式图基因组文库的构建模式图变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线

17、是电力系统接线组成中一个重要组成部分基因组文基因组文库与部分库与部分基因文库基因文库的关系的关系变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分cDNA文库的构建模式图文库的构建模式图 杂交双链杂交双链( (单链单链RNA/RNA/单链单链DNA)DNA)单链单链DNADNA反转录酶反转录酶双链双链DNADNA( (cDNAcDNA) )某种生物的某种生物的mRNAmRNA某种酶某种酶DNADNA聚合酶聚合酶与载体连接后导入受体菌贮存，组成与载体连接后导入受体菌贮存，组成cDNAcDNA文库文库变电站电气主

18、接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分原核细胞的基因结构原核细胞的基因结构非编码区非编码区非编码区非编码区编码区编码区启动子启动子终止子终止子内含子内含子 外显子外显子 启动子启动子终止子终止子真核细胞的基因结构真核细胞的基因结构非编码序列非编码序列变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要

19、组成部分转录转录转录转录mRNA翻译翻译多肽链多肽链初始初始mRNA剪接剪接成熟成熟mRNA翻译翻译多肽链多肽链出核孔出核孔原核、真核基因表达比较原核、真核基因表达比较变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分概念：概念： PCRPCR全称为全称为_，是一项在生物，是一项在生物_复制复制_的核酸合成技术的核酸合成技术 条件：条件：_、_、_、 _._.原理：原理：_聚

20、合酶链式反应聚合酶链式反应体外体外特定特定DNADNA片段片段DNADNA复制复制已知基因的核苷酸序列已知基因的核苷酸序列四种脱氧核苷酸四种脱氧核苷酸1 1对引物对引物DNADNA聚合酶聚合酶(Taq(Taq酶酶) )变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变性变性复性复性延伸延伸变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分1. 1. 变性变性（90-9590-95）双链双链DNADNA模板在热作模板在热作用

21、下，用下，_断裂，断裂，形成形成_氢键氢键单链单链DNADNA2.2.复性复性 (55-65)(55-65)温度降低，温度降低， 与与DNADNA模板结合，形成模板结合，形成局部局部_。 双链双链引物引物3.3.延伸延伸（70-7570-75）在在 的作用下，的作用下，连接连接 ，合，合 成与模板互补的成与模板互补的DNADNA链。链。 脱氧核苷酸脱氧核苷酸TaqTaq酶酶变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分利用利用PCRPCR技术扩增目的基因技术扩增目的基因变电站电气主接线是指变电站的变压器、

22、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分 DNADNA复制复制 PCRPCR技术技术不不同同点点解旋方式解旋方式场所场所酶酶温度条件温度条件引物引物联系联系PCRPCR技术与技术与DNADNA复制的比较复制的比较解旋酶催化解旋酶催化高温变性解旋高温变性解旋 细胞内细胞内 主要在细胞核内主要在细胞核内 细胞外细胞外 主要在主要在PCRPCR扩增仪内扩增仪内解旋酶、普通的解旋酶、普通的DNADNA聚合酶等聚合酶等耐热的耐热的DNADNA聚聚合酶（合酶（TaqTaq酶）酶）细胞内温和条件细胞内温和条件需控制温度，需控制温度， 在较高温度下进

23、行在较高温度下进行需要（一对）需要（一对）不需要不需要模板、原料均相同模板、原料均相同变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分第二步：基因表达载体的构建（第二步：基因表达载体的构建（核心核心）2 2、基因表达载体的组成？、基因表达载体的组成？使目的基因在受体细胞中使目的基因在受体细胞中稳定存在稳定存在，并且可以，并且可以遗传遗传给下一代给下一代使目的基因能够使目的基因能够表达和发挥作用表达和发挥作用启动子启动子目的基因目的基因终止子终止子标记基因标记基因1 1、基因、基因表达载体表达载体构建的目的构

24、建的目的？（？（P162P162）变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分质粒质粒DNADNA分子分子限制酶处理限制酶处理两个切口（位点）两个切口（位点）获得目的基因获得目的基因DNADNA连接酶连接酶重组重组DNADNA分子（分子（重组质粒重组质粒）同一种同一种一个切口一个切口( (位点位点) )两个黏性末端两个黏性末端用用相同相同的限制核酸内的限制核酸内切酶分别切割目的基因和切酶分别切割目的基因和载体载体DNADNA（如质粒），目（如质粒），目的基因和载体的基因和载体DNADNA的两端的两端形成

25、形成相同相同的黏性末端，在的黏性末端，在DNADNA连接酶的作用下，将连接酶的作用下，将目的基因和载体目的基因和载体DNADNA连接连接在一起，形成在一起，形成重组重组DNADNA分分子。子。变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分它们有什么作用？它们有什么作用？a、目的基因、目的基因b、启动子、启动子c、终止子、终止子d、标记基因、标记基因位于基因的首端位于基因的首端,是是mRNA结合位点结合位点位于基因的末端位于基因的末端,终终止转录止转录检测目的基因是否导入受体细胞检测目的基因是否导入受体细胞

26、变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分第三步：将目的基因导入第三步：将目的基因导入受体细胞受体细胞目的基因进入目的基因进入_内，并且在内，并且在 受体细胞内维持受体细胞内维持_和和_的过程的过程转化转化 受体细胞受体细胞稳定稳定表达表达1 1、将目的基因导入植物细胞的方法：农杆菌转化法、将目的基因导入植物细胞的方法：农杆菌转化法（1 1）农杆菌介绍：）农杆菌介绍：（2 2）适用范围及原理）适用范围及原理变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主

27、接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分1、将目的基因导入植物细胞将目的基因导入植物细胞（1）农杆菌）农杆菌 转化法转化法特点特点:能感染能感染双子叶植物双子叶植物和和祼子植物祼子植物,对对单子叶植物无感染能力单子叶植物无感染能力Ti质粒质粒的的TDNA可转移至受体细可转移至受体细胞并整合到其染色体上胞并整合到其染色体上转化过程转化过程:Ti质粒质粒目的基因目的基因构建构建表表达达载载体体导入导入植植物物细细胞胞插入插入植物细胞植物细胞 染色体染色体DNA表达表达新新性性状状转入转入农农杆杆菌菌组织培养技术组织培养技术变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输

28、配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分（2）基因枪法）基因枪法 基因枪法又称微弹轰击法，是利用压缩气体产生的动力，基因枪法又称微弹轰击法，是利用压缩气体产生的动力，将包裹在金属颗粒表面的表达载体将包裹在金属颗粒表面的表达载体DNA打入受体细胞中，使目打入受体细胞中，使目的基因与其整合并表达的方法。的基因与其整合并表达的方法。变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分（3）花粉通道法）花粉通道法 植物花粉在柱头上萌发后，花粉管要穿过花柱直通胚囊。植物花粉在柱头上萌发后，花粉管要穿过

29、花柱直通胚囊。花粉管通道法就是在植物受粉后，花粉形成的花粉管还未愈合花粉管通道法就是在植物受粉后，花粉形成的花粉管还未愈合前，剪去柱头，然后，滴加前，剪去柱头，然后，滴加DNA（含目的基因），使目的基（含目的基因），使目的基因借助花粉管通道进入受体细胞。因借助花粉管通道进入受体细胞。变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分2、将目的基因导入动物细胞将目的基因导入动物细胞方法方法: 显微注射技术显微注射技术操作程序操作程序:提纯含目的基提纯含目的基因表达载体因表达载体取受精卵取受精卵显微注射显微注射移

30、植到子宫移植到子宫受精卵发育受精卵发育新性状动物新性状动物变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分3、将目的基因导入微生物细胞将目的基因导入微生物细胞常用法常用法：Ca2+处理（氯化钙），增加处理（氯化钙），增加细胞壁细胞壁的通透性的通透性常用菌常用菌：大肠杆菌：大肠杆菌微生物作受体细胞原因：微生物作受体细胞原因：繁殖快繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对少、多为单细胞、遗传物质相对少过程：过程：Ca2+处理处理大肠杆菌大肠杆菌感受态感受态细胞细胞表达载体表达载体与感受态与感受态细胞混合细胞混合感受态细

31、感受态细胞吸收胞吸收DNA变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分 目的基因是否真正插入受体细胞的目的基因是否真正插入受体细胞的DNADNA中，是否能够中，是否能够在受体细胞中稳定遗传和正确表达，只有通过检测、鉴定在受体细胞中稳定遗传和正确表达，只有通过检测、鉴定才能得知。才能得知。 常用的检测手段主要从分子水平和个体水平进行。常用的检测手段主要从分子水平和个体水平进行。第四步：目的基因的检测与鉴定第四步：目的基因的检测与鉴定变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成

32、输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分（一）分子水平1. 1. 检测转基因生物的染色体检测转基因生物的染色体DNADNA上是否插入了目的基因上是否插入了目的基因 提取受体生提取受体生物全部物全部DNA适当限制适当限制酶切割酶切割DNA片段片段用同位素标记的用同位素标记的目的基因片段杂交目的基因片段杂交显显 出出杂交带杂交带（表明目的基因已插入）（表明目的基因已插入）分子杂交技术分子杂交技术从转基因生物中提取的基因组从转基因生物中提取的基因组DNADNA探针？探针？杂交的对象？杂交的对象？用放射性同位素标记的含目的基因的用放射性同位素标记的含目的基因的DNADNA片段片段

33、DNA-DNA分子杂交分子杂交变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分2. 2. 检测目的基因是否转录出了检测目的基因是否转录出了mRNAmRNA 提取受体生提取受体生物的物的mRNA用同位素标记的用同位素标记的目的基因片段杂交目的基因片段杂交显显 出出杂交带杂交带（表明目的基因已转录出了（表明目的基因已转录出了mRNA）用放射性同位素标记的含目的基因的用放射性同位素标记的含目的基因的DNADNA片段片段探针？探针？杂交的对象？杂交的对象？从转基因生物中提取的从转基因生物中提取的mRNA.mRNA.

34、DNA-mRNA分子杂交分子杂交变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分3. 3. 检测目的基因是否翻译出蛋白质检测目的基因是否翻译出蛋白质 抗原抗原抗体杂交抗体杂交提取受体生提取受体生物的蛋白质物的蛋白质与相应抗体杂交与相应抗体杂交显显 出出杂交带杂交带（表明目的基因已形成蛋白质产品）（表明目的基因已形成蛋白质产品）从转基因生物中提取的蛋白质从转基因生物中提取的蛋白质抗原？抗原？抗体？抗体？将目的基因编码的蛋白质注射进动物体内进将目的基因编码的蛋白质注射进动物体内进行免疫产生的相应抗体行免疫产生的

35、相应抗体变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分（二）个体水平例：用棉铃饲喂棉铃虫，如虫吃后不出现中毒症状，例：用棉铃饲喂棉铃虫，如虫吃后不出现中毒症状，说明未摄入目的基因或摄入目的基因未表达。如虫吃说明未摄入目的基因或摄入目的基因未表达。如虫吃后中毒死亡，则说明摄入了抗虫基因并得到表达。后中毒死亡，则说明摄入了抗虫基因并得到表达。抗性鉴定（抗虫鉴定、抗病鉴定）、活性鉴定等抗性鉴定（抗虫鉴定、抗病鉴定）、活性鉴定等变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。

36、变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分 6、1997年，科学家将动物体内的能够合成胰岛素的基因与大肠杆年，科学家将动物体内的能够合成胰岛素的基因与大肠杆菌的菌的DNA分子重组，并且在大肠杆菌中表达成功。请据右下图回分子重组，并且在大肠杆菌中表达成功。请据右下图回答问题。答问题。(1) 此图表示的是采取此图表示的是采取 合成基因的方法获合成基因的方法获取取 基因的过程。基因的过程。(2) 图中图中DNA是以是以 为为模板，形成单链模板，形成单链DNA

37、，在酶的作用下合成双链，在酶的作用下合成双链DNA，从而获得了所需要的目的基因。，从而获得了所需要的目的基因。(3) 图中代表图中代表 ，它往往含，它往往含 基基因，以便对目的基因的检测。因，以便对目的基因的检测。(4) 图中表示图中表示 ，为使，为使此过程顺利进行，一般须将大肠杆菌用此过程顺利进行，一般须将大肠杆菌用 处处理，以增大其细胞壁的理，以增大其细胞壁的 。（5）图中表示）图中表示 随大肠杆菌的繁殖而随大肠杆菌的繁殖而进行增殖，此目的基因在大肠杆菌内表达的标志进行增殖，此目的基因在大肠杆菌内表达的标志是是 。 逆转录逆转录目的目的控制胰岛素合成的信使控制胰岛素合成的信使RNA 将目的

38、基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞 标记标记重组重组DNA分子分子 氯化钙氯化钙通透性通透性目的基因目的基因 大肠杆菌能产生人的胰岛素大肠杆菌能产生人的胰岛素 变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分【例例】科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNADNA分子进行重组，并成分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。但在进行基因工程的操作过程中，需使用功地在大肠杆菌中得以表达。但在进行基因工程的操作过程中，需使用特定的限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒，便于重

39、组和筛选。已知特定的限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶的识别序列和切点是的识别序列和切点是GGGATCCGATCC，限制性核酸内，限制性核酸内切酶切酶的识别序列和切点是的识别序列和切点是GATCGATC，据图回答：，据图回答：变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分(1)(1)过程表示的是采取过程表示的是采取_ _ _的方法来获取目的基因。的方法来获取目的基因。（2 2）根据图示分析，在形成重组）根据图示分析，在形成重组DNADNA分子过程中，应

40、用限制性核酸内切酶分子过程中，应用限制性核酸内切酶_（或或）切割质粒，用限制性核酸内切酶）切割质粒，用限制性核酸内切酶_（或或）切割）切割目的基因。用限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒后形成的黏性末端通过目的基因。用限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒后形成的黏性末端通过_ _ _原则进行连接。原则进行连接。(3)(3)人的基因之所以能与大肠杆菌的人的基因之所以能与大肠杆菌的DNADNA分子进行重组，原因是分子进行重组，原因是_ _ (4)(4)人体的生长激素基因能在细菌体内成功表达出人的生长激素是因为人体的生长激素基因能在细菌体内成功表达出人的生长激素是因为_ _ _。写出目的基因导入细菌中表

41、达的过程。写出目的基因导入细菌中表达的过程反转录（人工合成）反转录（人工合成）碱基互补配对碱基互补配对人的基因与大肠杆菌人的基因与大肠杆菌DNA组成成分相同，结构相同组成成分相同，结构相同两种生物共用一套（遗传）密码两种生物共用一套（遗传）密码mRNA生长激素基因生长激素基因生长激素生长激素转录转录翻译翻译变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分总结：总结：两者的组成成分及结构基本相同两者的组成成分及结构基本相同目的基因通过转录和翻译表达遗传信息目的基因通过转录和翻译表达遗传信息生物共用一套遗传密码

42、生物共用一套遗传密码基因重组基因重组一、基因工程相关原理一、基因工程相关原理变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分分子杂交：有一定同源性的两条核酸单链，在适分子杂交：有一定同源性的两条核酸单链，在适宜的温度和离子浓度等条件下，通过碱基互补退宜的温度和离子浓度等条件下，通过碱基互补退火形成稳定的双链分子的过程。火形成稳定的双链分子的过程。变电站电气主接线是指变电站的

43、变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分GACATAGCTACAGACATAGCTACA受体细胞的受体细胞的DNADNA片段片段CTGTATCGATGTCTGTATCGATGTGTACAGCGTAGTACAGCGTA目的基因目的基因 目的基因未插入受目的基因未插入受体细胞体细胞DNA中中 变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分GTACAGCGTAGTACAGCGTAGACATAGCTACAGACATAGCTACA受体细胞的受体细胞

44、的DNADNA片段片段CTGTATCGATGTCTGTATCGATGT目的基因目的基因 目的基因未插入受目的基因未插入受体细胞体细胞DNA中中 变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分GTACAGCGTAGTACAGCGTATACGTCATGTCGCATGCTAGTACGTCATGTCGCATGCTAG受体细胞的受体细胞的DNADNA片段片段 ATGCAGTACAGCGTACGATCATGCAGTACAGCGTACGATC目的基因目的基因 目的基因已插入受体目的基因已插入受体细胞细胞DNA中中 变电

45、站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分TACGTCATGTCGCATGCTAGTACGTCATGTCGCATGCTAG受体细胞的受体细胞的DNADNA片段片段 ATGCAGTACAGCGTACGATCATGCAGTACAGCGTACGATCGTACAGCGTAGTACAGCGTA目的基因目的基因 目的基因已插入受体目的基因已插入受体细胞细胞DNA中中 变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分GTACAGCG

46、TAGTACAGCGTATACGTCATGTCGCATGCTAGTACGTCATGTCGCATGCTAG受体细胞的受体细胞的DNADNA片段片段 ATGCAGTACAGCGTACGATCATGCAGTACAGCGTACGATC目的基因目的基因 目的基因已插入受体目的基因已插入受体细胞细胞DNA中中 基因探针基因探针变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分，变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分1、抗虫转

47、基因植物、抗虫转基因植物2、抗病转基因植物、抗病转基因植物3、抗逆转基因植物、抗逆转基因植物4、利用转基因改良植物的品质、利用转基因改良植物的品质变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分优点：减少环境污染、减低生产成本、提高产量优点：减少环境污染、减低生产成本、提高产量例子：棉花、水稻、玉米、马铃薯、番茄等等例子：棉花、水稻、玉米、马铃薯、番茄等等主要杀虫基因：主要杀虫基因： Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因、毒蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因、 淀粉酶抑制剂基因、植物凝集素基因等淀粉酶抑制剂基因、植物凝

48、集素基因等典型例子：转基因抗虫棉典型例子：转基因抗虫棉Bt毒蛋白基因毒蛋白基因变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分抗病基因：抗病基因： 病毒外壳蛋白基因、病毒外壳蛋白基因、 病毒的复制酶基因病毒的复制酶基因.抗真菌基因：抗真菌基因： 几丁质酶基因、几丁质酶基因、 抗毒素合成基因抗毒素合成基因.变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分转黄瓜抗青枯病基因的甜椒转黄瓜抗青枯病基因的甜椒变电站电气主接线是指变

49、电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分不会引起过敏的转基因大豆不会引起过敏的转基因大豆优点：优点：变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分特点：发展较迟，应用方面广特点：发展较迟，应用方面广1、提高生长速度、提高生长速度2、改善畜产品的品质、改善畜产品的品质3、生产药物、生产药物4、作为器官移植的供体、作为器官移植的供体变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力

50、系统接线组成中一个重要组成部分原因：外源生长激素基因的表达可以使转基因动物生长更快原因：外源生长激素基因的表达可以使转基因动物生长更快转基因鲤鱼转基因鲤鱼变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分优点：避免食物过敏、腹泻、恶心等不适优点：避免食物过敏、腹泻、恶心等不适转基因牛的转基因牛的乳汁，降低乳汁，降低乳糖含量乳糖含量变电站电气主接线是指变电站的变压器、输电线路怎样与电力系统相连接，从而完成输配电任务。变电站的主接线是电力系统接线组成中一个重要组成部分优点：优点： 产量高、质量好、产量高、质量好、