2022年高中生物知识点总结(选修部分).docx

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1、精选word文档 下载可编辑高中生物知识点总结(选修部分)选修要点总结90、稳态神经系统和体液调节下，内环境的相对稳定温度、PH、渗透压，水、无机盐、血糖等化学物质含量血浆3545缓冲对NaHCO3/H2CO3Na2HPO4/NaH2PO42/3细胞内液组织液91、65%体液1/3细胞外液血浆淋巴（内环境）不是血液血液血浆血清食物排尿92、体内水来源饮水水排出途径出汗皮肤代谢水（有氧呼吸）面虫、骆驼呼气肺（氨基酸脱水缩合）排遗消化道93、K不吃也排不经过出汗排肾上腺分泌醛固酮（固醇）保Na排K高温工作、重体力劳动、呕吐、腹泻应特别注意补充足够的水、Na（食盐）细胞外液渗透压下降，出现四肢发冷、

2、血压下降、心率加快K对细胞内液细胞渗透压起决定作用，维持心肌紧张、心肌正常兴奋性K心94、血糖三来源（食物、分解、转化）三去向糖的主要功能供能胰岛素唯一降血糖激素；增加糖的去路，减少糖的来源胰高血糖素、肾上腺素升血糖胰高血糖素促进胰岛素分泌，胰岛素却抑制胰高血糖素分泌血糖升高下丘脑某区域胰岛B细胞胰高血糖素肾上腺素胰岛素胰岛A细胞肾上腺髓质下丘脑另一区域血糖降低160-180糖尿一次性摄糖过多，暂时尿糖持续糖尿不一定糖尿病，如肾炎重吸收不行糖尿病血糖高且有糖尿验尿验血三多一少症状？不吃少吃多吃含膳食纤维多的粗粮和蔬菜95、营养物质蛋白质不足婴幼儿、儿童、少年生长发育迟缓、体重过轻成年人浮肿提供

3、能量营养物质功能提供构建和修复机体组织的物质提供调节机体生理功能的物质维生素维持机体新陈代谢、某些特殊生理功能生物高考复习要点记忆手册第1页VA夜盲症维生素VB脚气病VC坏血病VD佝偻病、骨软化病、骨质疏松症96、温度感受器分为冷觉感受器和温觉感受器（分布皮肤、粘膜、内脏器官）体温来自代谢释放热量（不是ATP提供），体温恒定是产热量，散热量动态平衡结果寒冷炎热皮肤冷觉感受器温觉感受器血管传入神经立毛肌下丘脑体温调节中枢下丘脑骨骼肌传出神经汗皮肤血管收缩骨骼肌战粟（产能特多）血管舒张皮肤立毛肌收缩皮肤立毛肌收缩汗液分泌增多鸡皮疙瘩肾上腺素缩小汗毛孔甲状泉激素减少散热增加产热散热量增加不能减少产热

4、调节水分、血糖、体温97、下丘脑分泌激素促激素释放激素抗利尿激素感受刺激下丘脑渗透压感受器传导兴奋产生渴觉第一道防线皮肤、粘膜等非特异性免疫（先天免疫）第二道防线体液中杀菌物质、吞噬细胞98、免疫特异性免疫（获得性免疫）第三道防线体液免疫和细胞免疫在特异性免疫中发挥免疫作用的主要是淋巴细胞淋巴细胞的起源和分化胸腺T骨髓B免疫细胞B、T免疫系统的物质基础免疫器官扁桃体、淋巴结、脾免疫物质抗体、淋巴因子（白介素、干扰素）99、抗原特点一般异物性但也有例外如癌细胞、损伤或衰老的细胞大分子性特异性抗原决定簇（病毒的衣壳）100、体液免疫记忆细胞再次受相同抗原刺激抗原吞噬细胞T细胞B细胞效应B细胞抗体（

5、摄取处理）（呈递）（识别）感应阶段反应阶段效应阶段效应B细胞产生抗体(免疫球蛋白)、抗毒素、凝集素效应T细胞产生淋巴因子、干扰素、白细胞介素识别抗原B细胞、效应T细胞、记忆B/T效应B细胞获得有三途径（直接、间接、记忆）生物高考复习要点记忆手册第2页记忆细胞受相同抗原再次刺激后引起的二次免疫反应更迅速、更强再次接受过敏原（概念）过敏反应抗体分布细胞表面组织胺体液调节101、免疫失调引起的疾病自身免疫疾病风湿类风湿系统性红斑狼疮先天性先天性胸腺发育不全免疫缺陷病获得性艾滋病、肺炎、气管炎（人类免疫缺陷病毒）HIV攻击T细胞（AIDS）获得性免疫缺陷综合症102、色素吸收、传递、转换光能色素不能储

6、存光能蛋白质、氨基酸也不能储存少数特殊状态叶绿素a最终电子供体水高能量、易失电子光能电能最终电子受体:NADP+103、C4植物玉米、高梁、甘庶、苋菜既C3又C4CO2固定能力强先CO2+C3C4C3、C4叶肉细胞都含正常叶绿体选修C3维管束鞘细胞无叶绿体图C4维管束鞘细胞含无基粒的叶绿体不进行光反应(P29)C4植物花环型结构里圈维管束鞘细胞外圈部分叶肉细胞降低呼吸消耗增加净光合量104、提高产量延长光合作用时间光光质、强度、长短提高农作物对增大光合作用面积温度影响酶的活性光能利用率提高光合作用效率水矿质元素N、P、K、MgCO2农家肥、CO2发生器105、生物固氮N2NH3根瘤菌的特异性蚕

7、豆根瘤菌侵入蚕豆、菜豆、豇豆；大豆根瘤菌侵入大豆。N素根瘤菌有机物豆科植物异养需氧共生固氮菌根瘤薄壁细胞愈伤组织固氮菌自生自养根瘤菌拌种豆科植物绿肥自生固氮菌圆褐固氮菌（固氮+激素）生物固氮（主根瘤菌）工业固氮高能固氮106、N循环硝化、反硝化、氨化作用-反硝化氧气不足NO3N2自生固氮菌的分离原理无氮培养基对固氮菌的选择生长物质基础线粒体、叶绿体中的DNA（质基因）线粒体107、细胞质遗传典型代表叶绿体花斑植株三种特点母系遗传（受精卵中的细胞质几乎全来自卵细胞）后代性状不出现一定分离比生物高考复习要点记忆手册第3页（形成配子时，质基因不均等分配）编码区编码蛋白质连续的原核细胞非编码区编码区上

8、游RNA聚合酶结合位点基因结构调控编码区下游108、基因的结构真核细胞非编码区基因结构编码区内含子非编码序列外显子能编码蛋白质内含子外显子原核基因无外显子内含子之说主要分布于微生物剪刀限制性内切酶特异性（专一性）（200多种）获得粘性末端109、基因的操作工具针线DNA连接酶扶手（磷酸二脂键）不是踏板（氢键）条件复制保存多切点标记基因种类质粒、病毒运输工具运载体染色体外小型环状DNA存在于细菌、酵母菌质粒特点质粒是常用的运载体最常用大肠杆菌对宿主细胞的生存无基因工程(基因拼接技术、DNA重组技术、转基因技术)决定性作用直接分离常用鸟枪法提取目的基因人工合成（反转录法、根据已知AA序列合成DNA

9、）目的基因与运载体结合同一种限制酶110、基因操作步骤将目的基因导入受体细胞细菌、酵母菌、动植物CaCl2处理细胞壁（受精卵好繁殖速度快）目的基因的检测和表达标记基因、目的基因是否表达？逆转录碱基互补配对mRNA单链DNA双链DNA推测推测合成氨基酸序列mRNA序列DNA碱基序列目的基因药（胰岛素、干扰素、白细胞介素、乙肝疫苗）111、基因工程的成果治病基因诊断与基因治疗（基因替换）新品种（转基因）食品工业（食物）环境监测（DNA分子杂交探针）生物固氮、基因诊断、基因治疗、单细胞蛋白（微生物菌体本身）、单克隆抗体、生物导弹（单抗+抗癌药物）112、间接联系核心核膜高尔基体内质网细胞膜线粒体膜间

10、接（具膜小泡）（内吞外排说明双向）分泌蛋白抗体、蛋白质类激素、胞外酶（消化酶）等分泌到细胞外粗面内质网上的核糖体内质网运输加工高尔基体加工成熟蛋白质胞外生物高考复习要点记忆手册第4页113、生物膜系统（不等于生物膜）细胞膜、核膜及由膜围绕而成的细胞器离体营养物质+激素适宜温度+无菌植物组织培养离体愈伤组织根芽（胚状体）植物体选无病毒尖（生长点）紫草素114、植物细胞工程两种不同杂种细胞新植物体植物体细胞去掉细胞壁原生质体杂种细胞新植物体杂交种间存在生殖隔离不能有性杂交好处克服远源杂交不亲和障碍培育新品种是其它动物细胞工程技术的基础动物细胞培养液体培养基动物血清115、动取自动物胚胎或出生不久的

11、幼龄动物的器官或组织物用胰蛋白酶处理细原代培养传代培养（细胞株细胞系遗传物质发生改变）胞灭活的病毒做诱导剂+物理、化学方法工动物细胞融合最重要用途制备单克隆抗体程理论基础细胞膜的流动性单克隆抗体指单个B淋巴细胞经克隆形成的细胞群产生的化学性质单一、特异性强的抗体（优点特异性强、灵敏度高）。每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体（共百万种）*杂交瘤细胞*生物导弹116、微生物包含了除植物界和动物界以外的所有生物质粒（小型环状DNA）控制抗药性、固氮、抗生素生成核区（大型环状DNA）控制主要遗传性状有的细菌有荚膜、芽孢、鞭毛碳源无机/有机碳源自养/异养117、微生物生长氮源加不加额外的氮源所需的营养

12、物质生长因子（维生素、氨基酸、碱基构成酶和核酸）水无机盐固体培养基分离、鉴定、计数物理性质半固体培养基运动、保藏菌种液体培养基工业生产118、培养基天然培养基工业生产化学性质合成培养基分类鉴定选择培养基青霉素选出酵母菌、霉菌等真菌用途NaCl金黄色葡萄球菌鉴定培养基伊红美蓝大肠杆菌深紫色和金属光泽自己设计实验把混合在一起的圆褐固氮菌、硝化细菌、大肠杆菌区分开，并筛选纯种。酶合成的调节诱导酶基因和诱导物控制119、微生物代谢调节酶活性的调节结构改变可逆快速准确必需物质，一直产生氨基酸、核苷酸、维生素初级代谢产物无种的特异性多糖、脂类120、代谢产物非必需物质，一定阶段抗生素、毒素生物高考复习要点

13、记忆手册第5页次级代谢产物有种的特异性四素色素、激素121、微生物群体生长曲线3241（1）调整期代谢活跃，开始合成诱导酶初级代谢产物收获的最佳时期（2）对数期形态和生理特性稳定，代谢旺盛；科研用菌种，接种最佳时期（3）稳定期次级代谢产物收获最佳时期，芽孢生成（种内斗争最剧烈）及时补充营养物质，可以延长稳定期（4）衰亡期多种形态，出现畸形，释放次级代谢产物生存环境恶劣与无机环境斗争最激烈的是4衰亡期。营养物质消耗有害代谢产物积累PH不适宜导致4时期的出现。注意前三个时期类似“S”型增长曲线，但是多了衰亡期122、影响微生物生活的环境因素PH值影响酶的活性、细胞膜的稳定性，从而影响微生物对营养物

14、质的吸收温度影响酶和蛋白质的活性O2浓度产甲烷杆菌123、高压蒸汽灭菌法1/5、1/2、2/3、75%由里向外、细密、不重复溶化后分装前必须要调节pH细菌培养的过程培养基的配制灭菌搁置斜面接种培养观察实例谷氨酸发酵（黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌）概念菌种选育诱变育种、基因工程、细胞工程培养基的配制成分、比例，pH适宜124、发酵工程内容灭菌去除杂菌扩大培养和接种菌种多次培养达到一定数量发酵过程（中心阶段）控制各种条件，生产发酵产品分离提纯菌体过滤、沉淀（单细胞蛋白即微生物菌体本身）代谢产物蒸馏、萃取、离子交换应用医药工业生产药品和基因工程药品食品工业传统发酵产品、食品添加剂、单细胞蛋白等125、

15、C/N=4/1菌体大量繁殖但产生的谷氨酸少(P79)记住C/N=3/1菌体繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增溶氧不足产生乳酸或琥珀酸pH呈酸性产生乙酰谷氨酰胺（P95）生物高考复习要点记忆手册第6页扩展阅读高中生物选修一知识点总结(201*最新修改版)高中生物选修一生物技术实践知识点总结专题一传统发酵技术的应用课题一果酒和果醋的制作1、发酵通过微生物技术的培养来生产大量代谢产物的过程。2、有氧发酵醋酸发酵谷氨酸发酵无氧发酵酒精发酵乳酸发酵3、酵母菌是兼性厌氧菌型微生物真菌酵母菌的生殖方式出芽生殖(主要)分裂生殖孢子生殖4、在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖。C6H12O66O26CO26

16、H2O5、在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。C6H12O62C2H5OH2CO26、20左右最适宜酵母菌繁殖酒精发酵时一般将温度控制在18-257、在葡萄酒自然发酵的过程中,起主要作用的是附着在葡萄皮表面的野生型酵母菌.在发酵过程中,随着酒精浓度的提高,红葡萄皮的色素也进入发酵液,使葡萄酒呈现深红色.在缺氧呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到制约。8、醋酸菌是单细胞细菌(原核生物),代谢类型是异养需氧型,生殖方式为二分裂9、当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。2C2H5OH

17、4O2CH3COOH6H2O10、控制发酵条件的作用醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。醋酸菌最适生长温度为3035，控制好发酵温度，使发酵时间缩短，又减少杂菌污染的机会。有两条途径生成醋酸直接氧化和以酒精为底物的氧化。11、实验流程挑选葡萄冲洗榨汁酒精发酵果酒（醋酸发酵果醋）12、酒精检验果汁发酵后是否有酒精产生，可以用重铬酸钾来检验。在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈现灰绿色。先在试管中加入发酵液2L，再滴入物质的量浓度为3mol/L的H2SO43滴，振荡混匀，最后滴加常温下饱和的重铬酸钾溶液3滴，振荡试管，观察颜色13、充气口是在

18、醋酸发酵时连接充气泵进行充气用的；排气口是在酒精发酵时用来排出二氧化碳的；出料口是用来取样的。排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连接，其目的是防止空气中微生物的污染。开口向下的目的是有利于二氧化碳的排出。使用该装置制酒时，应该关闭充气口；制醋时，应该充气口连接气泵，输入氧气。疑难解答（1）你认为应该先冲洗葡萄还是先除去枝梗？为什么？应该先冲洗，然后再除去枝梗，以避免除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会。（2）你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染？如要先冲洗葡萄，再除去枝梗；榨汁机、发酵装置要清洗干净，并进行酒精消毒；每次排气时只需拧松瓶盖，不要完全揭开瓶盖等。（3）制葡萄酒时，为什

19、么要将温度控制在1825？制葡萄醋时，为什么要将温度控制在3035？温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。20左右最适合酵母菌的繁殖。因此需要将温度控制在其最适温度范围内。而醋酸菌是嗜温菌，最适生长温度为3035，因此要将温度控制在3035。课题二腐乳的制作1、多种微生物参与了豆腐的发酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一种丝状真菌。代谢类型是异养需氧型。生殖方式是孢子生殖。营腐生生活。2、原理毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。3、实验流程让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制4、酿造腐乳的主要生产工

20、序是将豆腐进行前期发酵和后期发酵。前期发酵的主要作用创造条件让毛霉生长。使毛酶形成菌膜包住豆腐使腐乳成型。后期发酵主要是酶与微生物协同参与生化反应的过程。通过各种辅料与酶的缓解作用，生成腐乳的香气。5、将豆腐切成3cm3cm1cm的若干块。所用豆腐的含水量为70左右，水分过多则腐乳不易成形。*水分测定方法如下精确称取经研钵研磨成糊状的样品510g(精确到0.02mg)，置于已知重量的蒸发皿中，均匀摊平后，在100105电热干燥箱内干燥4h，取出后置于干燥器内冷却至室温后称重，然后再烘30min，直至所称重量不变为止。样品水分含量（%）计算公式如下(烘干前容器和样品质量-烘干后容器和样品质量)/

21、烘干前样品质量毛霉的生长条件将豆腐块平放在笼屉内，将笼屉中的控制在1518，并保持一定的温度。来源来自空气中的毛霉孢子，直接接种优良毛霉菌种时间5天加盐腌制将长满毛霉的豆腐块分层整齐地摆放在瓶中，同时逐层加盐，随着层数的加高而增加盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些。加盐腌制的时间约为8天左右。用盐腌制时，注意控制盐的用量盐的浓度过低，不足以抑制微生物的生长，可能导致豆腐腐败变质；盐的浓度过高会影响腐乳的口味食盐的作用抑制微生物的生长，避免腐败变质析出水分，是豆腐变硬，在后期制作过程中不易酥烂调味作用，给腐乳以必要的咸味浸提毛酶菌丝上的蛋白酶。配制卤汤卤汤直接关系到腐乳的色、香、味。卤汤是由酒及各

22、种香辛料配制而成的。卤汤中酒的含量一般控制在12%左右。酒的作用防止杂菌污染以防腐与有机酸结合形成酯，赋予腐乳风味酒精含量的高低与腐乳后期发酵时间的长短有很大关系，酒精含量越高，对蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延长；酒精含量过低，蛋白酶的活性高，加快蛋白质的水解，杂菌繁殖快，豆腐易腐败，难以成块。香辛料的作用调味作用杀菌防腐作用参与并促进发酵过程防止杂菌污染用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用沸水消毒。装瓶时，操作要迅速小心。整齐地摆放好豆腐、加入卤汤后，要用胶条将瓶口密封。封瓶时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染。疑难解答（1）利用所学的生物学知识，解释豆腐长白毛是怎么一回事

23、？豆腐生长的白毛是毛霉的白色菌丝。严格地说是直立菌丝，在豆腐中还有匍匐菌丝。（2）为什么要撒许多盐，将长毛的豆腐腌起来？盐能防止杂菌污染，避免豆腐腐败。（3）我们平常吃的豆腐，哪种适合用来做腐乳？含水量为70%左右的豆腐适于作腐乳。用含水量高的豆腐制作腐乳，不易成形。（4）吃腐乳时，你会发现腐乳外部有一层致密的“皮”。这层“皮”是怎样形成的呢？它对人体有害吗？它的作用是什么？“皮”是前期发酵时在豆腐表面上生长的菌丝（匍匐菌丝），对人体无害。它能形成腐乳的“体”，使腐乳成形。课题三制作泡菜制作泡菜所用微生物是乳酸菌，其代谢类型是异养厌氧型。在无氧条件下，降糖分解为乳2C3H6O3+能量含抗生素牛

24、奶不能生产酸奶酸。分裂方式是二分裂。反应式为C6H12O6的原因是抗生素杀死乳酸菌。常见的乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌。乳酸杆菌常用于生产酸奶。亚硝酸盐为白色粉末，易溶于水，在食品生产中用作食品添加剂。膳食中的亚硝酸盐一般不会危害人体健康，国家规定肉制品中不超过30mg/kg，酱腌菜中不超过20mg/kg，婴儿奶粉中不超过2mg/kg。亚硝酸盐被吸收后随尿液排出体外，但在适宜pH、温度和一定微生物作用下形成致癌物质亚硝胺。亚硝酸盐含量发酵时间（d）专题二微生物的培养与应用课题一微生物的实验室培养培养基人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。

25、培养基按照物理性质可分为液体培养基半固体培养基和固体培养基。在液体培养基中加入凝固剂琼脂（是从红藻中提取的一种多糖，在配制培养基中用作凝固剂）后，制成琼脂固体培养基。微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。根据菌落的特征可以判断是哪一种菌。液体培养基应用于工业或生活生产，固体培养基应用于微生物的分离和鉴定，半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。按照成分培养基可分为人工合成培养基和天然培养基。合成培养基是用成分已知的化学物质配制而成，其中成分的种类比例明确，常用于微生物的分离鉴定。天然培养基是用化学成分不明的天然物质配制而成，常用于实际工业生产。一般在腌制10天后亚硝酸盐

26、含量开始降低，故在10天之后食用最好*测定亚硝酸盐含量的原理是在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量。酶按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等。碳源能为微生物的代谢提供碳元素的物质。如CO2、NaHCO3等无机

27、碳源；糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳源。氮源能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如N2、NH3、NO3、NH4（无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。只有固氮微生物才能利用N2。培养基还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性，培养细菌是需要将pH调至中性或微碱性，培养厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件无菌技术获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，要注意以下几个方面对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。将用于微生物培养

28、的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？答无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。消毒与灭菌的区别消毒指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。消毒方法常用煮沸消毒法，巴氏消毒法（对于一些不耐高温的液体）还有化学药剂（如酒精、氯气、石炭酸等）消毒、紫外线消毒。灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。灭菌方法有灼烧灭菌、

29、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。灭菌方法比较项理化因素的作用强度消毒灭菌较为温和强烈消灭微生物的数量部分生活状态的微生物全部微生物芽孢和孢子能否被消灭不能能接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法；玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱；表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯。-+培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅。制作牛肉膏蛋白胨固体培养基（1）方法步骤计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。（2）倒平板操作的步骤将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞。右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰。用左手的拇指和食指将培养皿打

30、开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（约1020mL）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖。等待平板冷却凝固，大约需510min。然后，将平板倒过来放置，使培养皿盖在下、皿底在上。倒平板操作的讨论培养基灭菌后，需要冷却到50左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？提示可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？答通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。平板冷凝后，为什么要将平板倒置？答平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地

31、挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？答空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。纯化大肠杆菌（1）微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。（2）平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作。将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。（3）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进

32、行培养。分为系列稀释操作和涂布平板操作两步。（4）用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落，以便于纯化菌种。（5）平板划线法操作步骤将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红。在火焰旁冷却接种环，并打开棉塞。将试管口通过火焰。将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液。将试管通过火焰，并塞上棉塞。左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养皿。灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线。重复以上操作，在三、四、五区域内划线。注意不要将最后一区的划线与第

33、一区相连。将平板倒置放入培养箱中培养。平板划线操作的讨论为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？答操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？答以免接种环温度太高，杀死菌种。在作第二次以及其后的

34、划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？答划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。（6）涂布平板操作的步骤将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。取少量菌液，滴加到培养基表面。将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却810s。用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布平板操作的讨论涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？提示应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接

35、触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围；等等。菌种的保存（1）对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。临时保藏方法将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养。当菌落长成后，将试管放入4的冰箱中保藏。以后每36个月，都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上。缺点这种方法保存的时间不长，菌种容易被污染或产生变异。（2）对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。在3mL的甘油瓶中，装入1mL甘油后灭菌。将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在20的冷冻箱中保存。疑难解答（1）生物的营养营养是指生物摄取、利用营养物质的过程。营养物质是指维持机体生命活动，保

36、证发育、生殖所需的外源物质。人及动物的营养物质水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类。植物的营养物质矿质元素、水、二氧化碳等三类。微生物的营养物质水、无机盐、碳源、氮源及特殊营养物质五类。（2）确定培养基制作是否合格的方法将未接种的培养基在恒温箱中保温12天，无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。课题二土壤中分解尿素的细菌的分离与计数尿素是一种重要的农业氮肥，尿素并不能直接被农作物吸收。只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为他们能合成脲酶尿素最初是从人的尿液中发现的筛选菌株人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度

37、、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。（2）选择性培养基在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。（3）配制选择培养基的依据根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。例如，培养基中不加入有机物可以选择培养自养微生物；培养基中不加入氮元素，可以选择培养能固氮的微生物；加入高浓度的食盐可选择培养金黄色葡萄球菌等。统计菌落数目（1）测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数。（2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统

38、计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活细菌。为了保证结果准确，一般设置35个平板，选择菌落数在30300的平板进行计数，并取平均值。统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，因此，统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示。采用此方法的注意事项一般选取菌落数在30300之间的平板进行计数为了防止菌落蔓延，影响计数，可在培养基中加入TTC本法仅限于形成菌落的微生物设置对照设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。对照实验是指除了被测试的条件以外，其他条件都相同的实验，其作用是比照试验组，排除任何其他可能原因的干扰，证明确实是所测试的条件引起相应的结果。实验

39、设计实验设计包括实验方案，所需仪器、材料、用具和药品，具体的实施步骤以及时间安排等的综合考虑和安排。（1）土壤取样同其他生物环境相比，土壤中的微生物，数量最大，种类最多。在富含有机质的土壤表层，有更多的微生物生长。从富含有机物、潮湿、pH7的土壤中取样。铲去表层土，在距地表约38cm的土壤层取样。（2）样品的稀释样品的稀释程度将直接影响平板上生长的菌落数目。在实际操作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数在30300之间、适于计数的平板。测定土壤中细菌的数量，一般选用104105106测定放线菌的数量，一般选用101034（1）实验室中微生物的筛选应用的原理105测定真菌的

40、数量，一般选用1021031（3）微生物的培养与观察不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间。细菌303712天放线菌252857天霉菌252834天每隔24小时统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足而导致一楼菌落的数目。一般来说，在一定的培养条件下（相同的培养基、唯独及培养时间），同种微生物表现出稳定的菌落特征。形状、大小、隆起程度、颜色疑难解答（1）如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好能统计3个平板，计算出平板菌落数的平均值每克样品中的菌落数=（C/V）*M其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平

41、均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（ml），M代表稀释倍数课题三分解纤维素的微生物的分离纤维素，一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是地球上含量最丰富的多糖类物质。纤维素与纤维素酶（1）棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物，木材、作物秸秆等也富含纤维素。（2）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。纤维素最终被水解成葡萄糖，为微生物的生长提供营养。纤维素分解菌的筛选（1）筛选方法刚果红染色法。能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选。（2）刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理刚果红

42、是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。这样，我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。分离分解纤维素的微生物的实验流程土壤取样选择培养（此步是否需要，应根据样品中目的菌株数量的多少来确定）梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落（1）土壤采集选择富含纤维素的环境。（2）刚果红染色法分离纤维素分解菌的步骤倒平板操作、

43、制备菌悬液、涂布平板（3）刚果红染色法种类一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是在倒平板时就加入刚果红。课题延伸对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选后，只是分离纯化的第一步，为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵两种。纤维素酶的测定方法，一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。疑难解答（1）为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌？由于生物与环境的相互依存关系，在富含纤维素的环境中，纤维素分解菌的含量相对提高，因此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于普通环境。（2）将滤纸埋在土壤中有什么作

44、用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集，实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将纸埋于深约10cm左右腐殖土壤中。（3）两种刚果红染色法的比较方法一是传统的方法，缺点是操作繁琐，加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂；其优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用。方法二的优点是操作简便，不存在菌落混杂问题，缺点是由于纤维素和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质，可以使能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应。但这种只产生淀粉酶的微生物产生的透明圈较为模糊，因为培养基中纤维素占主要地位，因此可以与纤维素酶产生的透明圈相区分。方法二的另一缺点是有些微生物具有降解色素的能力，它们在长时间培养过程中会降解刚果红形成明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区分。（4）为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？在选择培养的条件下，可