2022年现代实验技术在中药胚胎毒性中的应用.docx

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1、【摘 要】本次研究分别阐述了目前中药药理学常用的几种现代实验技术，体外细胞培养、微核实验、血清药理学实验，对补充论述目前涌现的两种发展前景较大的新实验技术，基因芯片技术、胚胎干细胞技术进行，最后做出展望。【关键词】现代实验技术；中药；胚胎毒性胚胎毒性指外来化合物在无明显母体毒性使用剂量下，通过胎盘屏障对胎儿产生损害，影响后者正常发育，中医将具有胚胎毒性的药物称为“妊娠禁忌药”，是中医重要的理论之一1。古代中医通过长时间的经验积累、症状观察总结出了一整套有关“妊娠禁忌药”体系，但随着现代中医药学发展，中药制剂广泛应用于临床，不良反应及毒性事件例数显著增加，以往的经验、理论已不能满足现阶段临床需要

2、。为保障母婴健康，预防、治疗胎毒，通过现代实验技术对中药胚胎毒性内容进行完善显得非常必要。1 体外细胞培养细胞培养技术是最常用的现代实验技术，通过获取组织细胞应用特殊的器材于体外条件下培养或生长，培养过程中细胞并不再形成组织；培养物可为单个细胞也可为细胞群2。细胞培养技术也是中药毒性实验最常用的方法，应用于胚胎毒性研究，可通过获取胎儿或胎盘组织细胞，经体位细胞培养后，将提取出的药物与细胞混合，直接观察具有活性细胞的生命活动，同时可应用相差、荧光、电镜、同位素标记等方法观察细胞状况，对药剂的药性做出初步的判断。细胞培养技术具有方便、快捷、耗材少、可直接观察等优点，但同时因体外细胞状态可能与体内差

3、异较大，其培养结果并不能直接代表体内结果。2 微核实验细胞回复突变实验是目前常用的检测遗传毒性的实验方法之一，通过动物实验，在被检动物接受被检化合物后，对细胞微核变化情况进行观察，细胞微核因其为细胞受遗传毒性作用的遗传学终点，其突变具有极高的研究价值2。王小红等，以黄苓水煎服，按照不同剂量灌服雌性小白鼠，待其受孕14日后处死，并取母鼠胸骨与胎鼠分别行骨髓微核、胎肝血微核实验，结果表明服用不同剂量服用者与未服用者间数据差异不显著（P0.05）。3 血清药理研究血清药理学实验方法通过给动物服药，后取其血清作为药物源，进行药理学观察。整个过程中，被研究药物其粗大颗粒物质、分子组成复杂的成分通过消化吸

4、收、代谢等体内过程，取含药血清进行药理实验，较接近药物于体内环境产生药理作用，针对中药特别是重要复方，实验效果较显著，能有效排除中药成分中非药理成分，杂质等，规避了中药需处理、服用、消化等过程，较体外培养更佳客观、确切，理论上较科学、真实，其研究结果相对细胞培养来说更加可靠3。目前常用的实验动物为小白鼠，后者经过长时间的培养杂交，已能够控制培养所需品种，以满足特殊实验需要。应用于中药胎毒研究，使用大量怀孕纯系小白鼠进行药理实验，观察小白鼠胎儿发育情况，或进行药动力学实验，甚至进行尸检，能得出相对可靠的结论。如肖凯等使用乌头类中药进行小白鼠胚胎发育毒性实验，选用盐附子、生川乌、生草乌等中药，按不

5、同用药剂量进行实验，结果显示使用剂量较大对象出现轻微母体毒性，表现为体重增加缓慢、摄食量减少，其中生草乌可致胎鼠发育迟缓，甚至是胸骨数减少。血清药理学实验是中医胎毒研究最常用的方法，可获得大量有价值的结论，但该法也有一定的缺陷，如血清中药浓度并非随给药剂量增加而增加，采血时间及血清是否活灭标准争议较大。4 其它实验方法基因芯片技术，利用DNA分子可变性、杂交的特性，结合计算机科学、物理、数学、聚合酶链式反应等技术，将核酸技术持续化、微型化，为DNA准确测序、转录、基因诊断、突变性判断提供了条件4。该技术因起步相对较晚，且综合性较强，尚处于发展阶段，但因其精准、确切、可操作等特性，拥有广阔的前景

6、，对中药胚胎毒性药理学研究具有巨大的推动作用。胚胎干细胞实验，胚胎干细胞是生物体内特殊的多功能干细胞，具有较强的可塑性，能够分化成为各类生物组织、器官，弥补了体外细胞培养细胞不能分化、与生物体内差异较大等缺点，为体外发育细胞培养实验提供了条件。5 总结中药是我国传统文化的精华之一，在很长的一段历史内，在我国医疗事业中起到支柱性作用，但步入现代后，因其缺乏足够的实验结果、理论支持，中药面临信任危机。中药特别是复方成分复杂，应用传统实验方法行“胚胎毒性”药理研究较为困难，但随着现代实验技术的不断发展进步，高效、准确的进行中药“胚胎毒性”研究成为可能。参考文献1宋美琴，牛丽.中药有效成分体外抗病毒活性研究进展J.国外畜牧学猪与禽，2011，31（03）102-102杨明杰，曹佳，余争平.微核实验的分子生物学研究进展J.癌变畸变突变，2010，22（4）130-133阴赪宏，李兰芳，姜廷良.中药含药血清药理研究现状J.中国中医药信息杂志，2011，34（10）283-284滕晓坤，肖华胜.基因芯片与高通量DNA测序技术前景分析J.中国科学（C辑生命科学），2010，42（11）320-32