临床血液常规检验仪器课件ppt.ppt
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1、第五章第五章 临床血液常规检验仪器临床血液常规检验仪器 临床检验常临床检验常规仪器是临床实验规仪器是临床实验室最常用最基本的室最常用最基本的的分析仪器,包括:的分析仪器,包括: 血细胞分析仪血细胞分析仪 血液凝固分析仪血液凝固分析仪第五章第五章 临床检验常规仪器临床检验常规仪器第一节第一节 血细胞分析仪血细胞分析仪教学要求教学要求 掌握血细胞分析仪的概念、库尔特原理、仪器的掌握血细胞分析仪的概念、库尔特原理、仪器的基本结构。基本结构。 熟悉联合检测型血细胞分析仪器的检测原理,网熟悉联合检测型血细胞分析仪器的检测原理,网织红细胞检测原理,血红蛋白检测原理、仪器性织红细胞检测原理,血红蛋白检测原理
2、、仪器性能评价和维护。能评价和维护。 了解血细胞分析仪的分类、性能指标、常见故障了解血细胞分析仪的分类、性能指标、常见故障和排除及进展。和排除及进展。第一节第一节 血细胞分析仪学习内容血细胞分析仪学习内容一、血细胞分析仪的分型一、血细胞分析仪的分型二、血细胞分析仪的检测原理二、血细胞分析仪的检测原理三、血细胞分析仪的基本结构三、血细胞分析仪的基本结构四、血细胞分析仪的性能指标与评价四、血细胞分析仪的性能指标与评价五、血细胞分析仪的维护及常见故障五、血细胞分析仪的维护及常见故障六、血细胞分析仪的进展六、血细胞分析仪的进展 思考题思考题一、血细胞分析仪的分型一、血细胞分析仪的分型血细胞分析仪血细胞
3、分析仪(Blood cell analyzer,BCA)是指对一是指对一定体积全血内血细胞异质性进行自动分析的临床检验常定体积全血内血细胞异质性进行自动分析的临床检验常规仪器。又称血细胞自动计数仪规仪器。又称血细胞自动计数仪(ABCC)、血液学自动、血液学自动分析仪分析仪(AHA)。ABCC代表早期的低档次代表早期的低档次BCA,AHA外外延过大。延过大。一、血细胞分析仪的分型一、血细胞分析仪的分型 血细胞分析仪分型血细胞分析仪分型 按自动化程度按自动化程度 按检测原理按检测原理 按对白细胞的分类水平按对白细胞的分类水平嗜酸性细胞嗜酸性细胞淋巴细胞淋巴细胞单核细胞单核细胞中性粒细胞中性粒细胞血
4、小板血小板嗜碱性细胞嗜碱性细胞 血细胞与等渗的电解质溶液相比为相对的不良导血细胞与等渗的电解质溶液相比为相对的不良导体体 电阻值大于稀释液的电阻值电阻值大于稀释液的电阻值 当细胞通过检测器微孔的孔径感受区时,在内外当细胞通过检测器微孔的孔径感受区时,在内外电极之间恒流源电路上,电阻值瞬间增大,产生电极之间恒流源电路上,电阻值瞬间增大,产生一个电压脉冲信号一个电压脉冲信号 产生的脉冲信号数,等于通过的细胞数,脉冲信产生的脉冲信号数,等于通过的细胞数,脉冲信号幅度大小与细胞体积大小成正比号幅度大小与细胞体积大小成正比1.1.电阻抗型血细胞分析仪检测原理电阻抗型血细胞分析仪检测原理二、血细胞分析仪的
5、检测原理二、血细胞分析仪的检测原理(一)血细胞分析仪的细胞计数原理(一)血细胞分析仪的细胞计数原理 请记住哦!请记住哦!库尔特(电阻抗)血细胞检测原理库尔特(电阻抗)血细胞检测原理二、血细胞分析仪的检测原理二、血细胞分析仪的检测原理(1 1)白细胞的检测)白细胞的检测细胞悬液加溶血素后送入白细胞检测通道细胞悬液加溶血素后送入白细胞检测通道二、血细胞分析仪的检测原理二、血细胞分析仪的检测原理白细胞直方图(三分群)白细胞直方图(三分群)(2 2)红细胞和血小板的检测)红细胞和血小板的检测 红细胞和血小板共用红细胞和血小板共用一个检测通道(小孔一个检测通道(小孔管)。正常人红细胞管)。正常人红细胞体
6、积和血小板体积间体积和血小板体积间有一个明显界限,血有一个明显界限,血小板计数准确容易小板计数准确容易 CPU对血小板和红细胞分布图对血小板和红细胞分布图进行判断进行判断 二、血细胞分析仪的检测原理二、血细胞分析仪的检测原理(2 2)红细胞和血小板的检测)红细胞和血小板的检测浮动界标浮动界标二、血细胞分析仪的检测原理二、血细胞分析仪的检测原理(2 2)红细胞和血小板检测的直方图)红细胞和血小板检测的直方图二、血细胞分析仪的检测原理二、血细胞分析仪的检测原理 2.联合检测型血细胞分析仪检测原理联合检测型血细胞分析仪检测原理 主要体现在白细胞分类,实质是选用较特异的方主要体现在白细胞分类,实质是选
7、用较特异的方法将血中含量较少的嗜酸、嗜碱性粒细胞检出,法将血中含量较少的嗜酸、嗜碱性粒细胞检出,发现异常细胞。共有特点是:均使用了鞘流技术。发现异常细胞。共有特点是:均使用了鞘流技术。 前前 鞘鞘 流流后后 鞘鞘 流流检检 测测 窗窗二、血细胞分析仪的检测原理二、血细胞分析仪的检测原理 (1 1)多角度激光散射联合检测原理)多角度激光散射联合检测原理 基于细胞大小、折射率、基于细胞大小、折射率、核形、核浆比值、以及颗核形、核浆比值、以及颗粒性质等,均可影响不同粒性质等,均可影响不同角度下的散射光强度角度下的散射光强度 不同白细胞在以上几个方不同白细胞在以上几个方面完全一致的几率很小,面完全一致
8、的几率很小,从而对白细胞进行分类从而对白细胞进行分类二、血细胞分析仪的检测原理二、血细胞分析仪的检测原理(2 2)容量、电导、光散射检测原理)容量、电导、光散射检测原理光散射光散射电导性电导性电阻抗电阻抗每个细胞接受三维分析每个细胞接受三维分析定义到三维散点图的相应位置定义到三维散点图的相应位置 二、血细胞分析仪的检测原理二、血细胞分析仪的检测原理 体积体积(volume(volume,V) V) 电阻抗原理测定细胞体积和数量电阻抗原理测定细胞体积和数量 电导性电导性(conductivity(conductivity,C) C) 高频电磁探针,测量细高频电磁探针,测量细胞内部结构,细胞内核浆
9、比例胞内部结构,细胞内核浆比例 光散射光散射(scatter(scatter,S)S)细细 胞内粗颗粒的光散射强胞内粗颗粒的光散射强 度要比细颗粒更强度要比细颗粒更强二、血细胞分析仪的检测原理二、血细胞分析仪的检测原理(3 3) 光散射与细胞化学联合检测原理光散射与细胞化学联合检测原理 这类仪器是应用激光散射与细胞化学染色技术对这类仪器是应用激光散射与细胞化学染色技术对白细胞进行分类计数。白细胞进行分类计数。 二、血细胞分析仪的检测原理二、血细胞分析仪的检测原理高角度前向散射光:细胞核及颗粒的信息高角度前向散射光:细胞核及颗粒的信息低角度前向散射光:细胞大小的信息低角度前向散射光:细胞大小的信
10、息结合细胞化学染色结合细胞化学染色技术对白细胞进行技术对白细胞进行分类计数分类计数二、血细胞分析仪的检测原理二、血细胞分析仪的检测原理(4 4)电阻抗、射频与细胞化学联合检测原理)电阻抗、射频与细胞化学联合检测原理 这类仪器是利用电阻抗、射频这一成熟细胞计数技术结合这类仪器是利用电阻抗、射频这一成熟细胞计数技术结合细胞化学技术,通过细胞化学技术,通过4 4个不同的检测系统对白细胞、幼稚个不同的检测系统对白细胞、幼稚细胞进行分类和计数。细胞进行分类和计数。 嗜酸性粒细胞检测系统嗜酸性粒细胞检测系统 嗜碱性粒细胞检测系统嗜碱性粒细胞检测系统 淋巴、单核和粒细胞检测系统淋巴、单核和粒细胞检测系统 幼
11、稚细胞检测系统幼稚细胞检测系统二、血细胞分析仪的检测原理二、血细胞分析仪的检测原理 白细胞分类散射图白细胞分类散射图 联合使用多项技术联合使用多项技术( (流式、激光、射频、电导、流式、激光、射频、电导、电阻抗、细胞化学染色电阻抗、细胞化学染色) )同时分析一个细胞,综合分同时分析一个细胞,综合分析实验数据,从而得出较为准确的白细胞析实验数据,从而得出较为准确的白细胞“五分类五分类”结果。结果。 二、血细胞分析仪的检测原理二、血细胞分析仪的检测原理(5)网织红细胞检测原理)网织红细胞检测原理 网织红细胞中嗜碱性物质网织红细胞中嗜碱性物质RNARNA,在活体状态下与特,在活体状态下与特殊的荧光染
12、料结合殊的荧光染料结合 荧光强度与荧光强度与RNARNA含量成正比含量成正比 用流式细胞术检测用流式细胞术检测 网织红细胞大小和网织红细胞大小和 RNARNA含量及血红蛋含量及血红蛋 白的含量白的含量二、血细胞分析仪的检测原理二、血细胞分析仪的检测原理试剂反应前后的变化试剂反应前后的变化反应前反应前反应后反应后二、血细胞分析仪的检测原理二、血细胞分析仪的检测原理荧光荧光(RNA)强度强度ReticulocytesPLTRBC高荧光强度高荧光强度低荧光强度低荧光强度中荧光强度中荧光强度WBC前向散射光前向散射光( (细胞大小细胞大小) )二、血细胞分析仪的检测原理二、血细胞分析仪的检测原理3.干
13、式离心分层型血细胞分析仪的细胞计数原理干式离心分层型血细胞分析仪的细胞计数原理 将血液充入到含特殊试剂(抗凝剂、荧光染料)将血液充入到含特殊试剂(抗凝剂、荧光染料)的毛细管内的毛细管内 专用离心机上离心,仪器根据血中各种血细胞成专用离心机上离心,仪器根据血中各种血细胞成份的比重不同分层亦不同的原理,血细胞被吖啶份的比重不同分层亦不同的原理,血细胞被吖啶橙染色后,各层细胞会有明显的颜色差异,然后橙染色后,各层细胞会有明显的颜色差异,然后将毛细管放在特殊的判读机上对不同细胞层进行将毛细管放在特殊的判读机上对不同细胞层进行比对定量分析比对定量分析 计算机综合信息处理,得到红细胞、中性粒细胞、计算机综
14、合信息处理,得到红细胞、中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞、血小板、血红蛋白等参数。单核细胞、淋巴细胞、血小板、血红蛋白等参数。二、血细胞分析仪的检测原理二、血细胞分析仪的检测原理(二)血细胞分析仪的血红蛋白测定原理(二)血细胞分析仪的血红蛋白测定原理 除干式、无创型外,各型除干式、无创型外,各型BCABCA对血红蛋白测定对血红蛋白测定都采用光电比色原理都采用光电比色原理 血细胞悬液中加入溶血剂后,红细胞溶解释放出血细胞悬液中加入溶血剂后,红细胞溶解释放出血红蛋白,后者与溶血剂中有关成分结合形成血血红蛋白,后者与溶血剂中有关成分结合形成血红蛋白衍生物,进入血红蛋白测试系统红蛋白衍生物,进入血红蛋白
15、测试系统 特定波长特定波长(530(530550nm)550nm)下进行光电比色下进行光电比色二、血细胞分析仪的检测原理二、血细胞分析仪的检测原理 基本结构基本结构 机械系统机械系统 电学系统电学系统 血细胞检测系统血细胞检测系统 血红蛋白测定系统血红蛋白测定系统 计算机控制系统计算机控制系统三、血细胞分析仪的基本结构三、血细胞分析仪的基本结构 1.1.机械系统机械系统 包括机械装置(如全自动有进样针、包括机械装置(如全自动有进样针、分血器、稀释器、混匀器、定量装置等)分血器、稀释器、混匀器、定量装置等)和真空泵,以完成样本的定量吸取、稀释、和真空泵,以完成样本的定量吸取、稀释、传送、混匀,以
16、及将样本移入各种参数的传送、混匀,以及将样本移入各种参数的检测区检测区三、血细胞分析仪的基本结构三、血细胞分析仪的基本结构 2. 2.电学系统电学系统 包括主电源、电压元器件、控温装置、包括主电源、电压元器件、控温装置、自动真空泵电子控制系统,以及仪器的自自动真空泵电子控制系统,以及仪器的自动监控、故障报警和排除等动监控、故障报警和排除等 三、血细胞分析仪的基本结构三、血细胞分析仪的基本结构 3. 3.血细胞检测系统血细胞检测系统 国内常用的血细胞国内常用的血细胞分析仪,使用的检测技术可分为电阻抗检分析仪,使用的检测技术可分为电阻抗检测技术和光散射检测技术两大类测技术和光散射检测技术两大类三、
17、血细胞分析仪的基本结构三、血细胞分析仪的基本结构 电阻抗检测技术:电阻抗检测技术:由检测器、放大器、甄别器、由检测器、放大器、甄别器、阈值调节器、检测计数系统和自动补偿装置组成阈值调节器、检测计数系统和自动补偿装置组成 流式光散射检测技术:流式光散射检测技术:由激光光源、检测装置和由激光光源、检测装置和检测器、放大器、甄别器、阈值调节器、检测计检测器、放大器、甄别器、阈值调节器、检测计数系统和自动补偿装置组成数系统和自动补偿装置组成三、血细胞分析仪的基本结构三、血细胞分析仪的基本结构 4.4.血红蛋白测定系统血红蛋白测定系统 由光源、透镜、滤光片、由光源、透镜、滤光片、流动比色池和光电传感器等
18、组成。流动比色池和光电传感器等组成。 5.5.计算机控制系统计算机控制系统 三、血细胞分析仪的基本结构三、血细胞分析仪的基本结构四、血细胞分析仪的性能指标与评价四、血细胞分析仪的性能指标与评价(一)仪器的性能指标(一)仪器的性能指标 1.1.测试参数测试参数 2.2.细胞形态学分析细胞形态学分析 3.3.测试速度测试速度 4.4.样本量样本量 5.5.工作条件与基本功能工作条件与基本功能 6.6.技术要求技术要求 (二)血细胞分析仪的评价(二)血细胞分析仪的评价 ICSH ICSH公布了电子血细胞分析仪的评价方公布了电子血细胞分析仪的评价方案:在细胞计数、血红蛋白测定方面,要案:在细胞计数、血
19、红蛋白测定方面,要评价仪器测试样本的总变异、携带污染率、评价仪器测试样本的总变异、携带污染率、线性范围、可比性和准确性等线性范围、可比性和准确性等四、血细胞分析仪的性能指标与评价四、血细胞分析仪的性能指标与评价四、血细胞分析仪的性能指标与评价四、血细胞分析仪的性能指标与评价(二)血细胞分析仪的评价(二)血细胞分析仪的评价 1.1.精密度精密度 2.2.携带污染率携带污染率 3.3.总重复性总重复性 4.4.线性范围线性范围 5.5.标本老化标本老化 6.6.抗干扰性抗干扰性 7.7.白细胞分类的鉴定白细胞分类的鉴定(三)血细胞分析仪的校准(三)血细胞分析仪的校准 出厂前已经过厂方技术鉴定合格,
20、但由于运出厂前已经过厂方技术鉴定合格,但由于运输振动或因故障维修后或长时间停用后再启用等输振动或因故障维修后或长时间停用后再启用等原因,以及正常使用半年以上或认为有必要时,原因,以及正常使用半年以上或认为有必要时,都必须对仪器进行调校及性能测试,这对了解仪都必须对仪器进行调校及性能测试,这对了解仪器性能,发现问题,确保检验质量有重要意义器性能,发现问题,确保检验质量有重要意义四、血细胞分析仪的性能指标与评价四、血细胞分析仪的性能指标与评价五、血细胞分析仪的维护与常见故障排除五、血细胞分析仪的维护与常见故障排除 (一)仪器的维护(一)仪器的维护 血细胞分析仪属高精密仪器,应有专人负责,血细胞分析
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