紫外荧光分光光度计介绍ppt课件.pptx
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1、我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物紫外荧光分光光度计UV fluorescence spectrophotometer报告人:熊哲我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物PPT模板下载: 行业PPT模板: 节日PPT模板: PPT素材下载: PPT图表下载: 优秀PPT下载: PPT教程: Word教程: Excel教程: 资料下载: PPT课件下载: 范文下载: 试卷下载: 教案下载: PPT论坛
2、: 目录CONTENTS原理01影响因素02操作步骤03注意事项04我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物第一章 原理3荧光定义:当紫外线照射到某些物质的时候,这些物质会发射出各种颜色和不同强度的可见光,而当紫外线停止照射时,所发射的光也随之快速的消失,这种光被称为荧光。我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物4第一章 原理荧光光度计简单结构 荧光光度计结构示意图光源发出的复色光,首先经过激发单色器,可
3、以分解为单色光来激发样品,样品受激发以后,发射出来的光又是复色光,所以需要发射单色器再次将其分解为单色光,检测器检测发射出来的光的强度。为了防止激发光到达检测器影响测试结果,发射单色器和激发单色器一般成直角排列。 我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物5第一章 原理同步荧光光谱 激发、发射单色器以一定波长间隔或能量间隔同时扫描,以激发波长或者是发射波长为恒坐标,以荧光强度(IF)为纵坐标作图,便得同步荧光光谱。 同步荧光法按光谱扫描方式的不同可分为恒(固定) 波长法、恒能量法、可变角法和恒基体法。
4、恒能量分析法 恒能量同步荧光光谱法在克服拉曼光、提高分析灵敏度方面均有显著效果。 恒能量同步荧光法系在激发波长ex和发射波长em的同时扫描过程中保持两者一恒定的能量差? 关系。 恒能量同步荧光法对于多环芳烃的鉴别和测定特别有利。我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物6第一章 原理荧光强度与溶液浓度的关系荧光是由物质吸收光能后发射而出,因此,溶液的荧光强度 F 和溶液吸收光能的程度以及物质的荧光频率有关:K为常数,取决于荧光物质的量子效率,根据 LB 定律:我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为
5、什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物7第一章 原理荧光强度与溶液浓度的关系当 2.303bc 0.05时(浓度很小,溶液较稀时),上式括号内第一项以后的各项均可忽略不计,所以: 对于一荧光物质的稀溶液,当 I0 及 b 一定时,即在低浓度(2.303bc 0.05)时,溶液的荧光强度与荧光物质的浓度呈(线性)正比关系。然而,如果 2.303bc 0.05 时,则荧光强度和溶液的浓度不呈线性关系,此时应考虑幂级数中的二次方甚至三次方项。随着溶液浓度的进一步加大,将会出现荧光强度不仅不随溶液浓度线性增大,甚至随着浓度的增大而下降的现象,这是
6、由浓度效应而导致的。我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物8第一章 原理荧光强度的浓度效应1. 内滤效应。当溶液浓度过高时,溶液中杂质对入射光的吸收作用增大,相当于降低了激发光的强度。另一方面,浓度过高时,入射光被液池前部的荧光物质强烈吸收后,处于液池中、后部的荧光物质,则因受到的入射光大大减弱而使荧光强度大大下降;而仪器的探测窗口通常是对准液池中部的,从而导致了所检测到的荧光强度大大下降。2. 在较高浓度的溶液中,可能发生溶质间的相互作用,产生荧光物质的激发态分子与其基态分子中的二聚物或与其他溶
7、质分子的复合物,从而导致荧光光谱的改变和/或荧光强度的下降。当浓度更大时,甚至会形成荧光物质的基态分子聚集体,导致荧光强度更严重的下降。3. 假如荧光物质的发射光谱与其吸收光谱呈现重叠,便可能发生所发射的荧光被部分再吸收的现象,导致荧光强度下降。溶液的浓度增大时会促使再吸收的现象加剧。我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物9第一章 原理The wavelength is a brief indication of the aromatic ring sizes (e.g., 290 nm for
8、monorings, 290-320 nm for aromatic ring systems containing two fused benzene rings, etc.我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物10第一章 原理仪器结构我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物11第一章 原理仪器结构我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的
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