血小板-抗原抗体检测参考ppt课件.ppt

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1、我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物1 血小板抗原抗体血小板抗原抗体广州医科大学附属第五医院输血科我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物2 目录血小板相关疾病血小板抗原血小板抗体抗体检测及交叉配血我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物3血小板抗原v 血小板抗原泛指存在于血小板膜的能够刺激机体产生抗体血小

2、板抗原泛指存在于血小板膜的能够刺激机体产生抗体, ,并能与之结合的血小板膜蛋白质和糖分子并能与之结合的血小板膜蛋白质和糖分子. .v 血小板相关抗原血小板相关抗原: : 红细胞血型抗原：红细胞血型抗原：ABOABO、LewisLewis和和P P系统抗原系统抗原等等，无无RHRH抗原抗原 白细胞抗原：白细胞抗原：HLAHLA抗原抗原v 血小板特异性抗原（血小板特异性抗原（human platelet antigenhuman platelet antigen，HPAHPA）我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边

3、有一个活的生物4血小板抗原血型抗原：血型抗原：ABOABO、LewisLewis和和P P系统抗原系统抗原等等，无无RHRH抗原抗原v 来源：血小板表面的A、B抗原来源主要有两个：大部分是血小板本身所固有（从巨核细胞分化而来）；小部分是从血浆吸附而来。如体外将O型血小板和A或B型血清温育，血小板就会带上A或B抗原。v 不同个体间血小板膜ABH抗原量存在差异;v 同一个体的每一个血小板抗原量差别非常大，由此可以解释有些人输入ABH不相容血液后,一部分输入的血小板迅速被破坏,而另外的血小板其生命力不受影响. 我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到

4、愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物5血小板抗原v白细胞抗原：白细胞抗原：HLAHLA抗原抗原v血小板存具有HLA-类抗原类抗原，主要是HLA-A和HLA-B位点的抗原（少量表达的HLA-C抗原）。vHLA-类分子为血小板的固有蛋白，少量从血浆中吸附。血小板HLA抗原的免疫原性比白细胞弱。我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物6血小板抗原v血小板特异性抗原（血小板特异性抗原（human platelet antigenhuman platelet antigen，HPAHPA）v主要位于

5、人血小板膜的一大类抗原,称之为血小板特异性抗原v高频率抗原以“a”表示，低频率抗原以“b”表示v人血小板同种抗原（HPA）自1959年被发现以来，迄今已经检出24个抗原，其中HPA-1，-2，-3，-4，-5，-6,-15被血小板命名委员会（PNC）列入抗原系统，包含14个对偶抗原，而HPA-7-14，-16,-17因为对偶抗原未检出而未达到系统命名标准。 我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物7血小板抗原我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉

6、快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物8血小板抗原我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物9血小板抗原v 24个抗原主要分布在糖蛋白GPb，GPa，GPb，GPa以及CD109上 ；v GPa（CD61）携带9种HPA抗原，分别为HPA-1，HPA-4，HPA-6bw，HPA-7bw，HPA-8bw，HPA-10bw，HPA-11bw，HPA-14bw，HPA-16bw v GPb（CD41）是跨膜蛋白，细胞外116 kD的重链，通过二硫键与22 kD的轻链共价结合。GPb上携带 HPA-3和

7、HPA-9bw；我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物10血小板抗体抗 体分 类疾 病HLA / HPA 抗 体其 它 抗 体同 种抗 体格兰茨曼血小板功能不全病抗GPb/aPb/a抗体同 种 异体 抗 体新生儿同种异体免疫性血小板减少症HPA1b(78%), HPA5b(19%)HPA-2,3,4(3%),HPA-15,HPA-9bw, Anti-CD36血小板输注无效症HLA-I抗体5080% 1725%(日本人为HPA-2b), HPA-15, anti-CD36极少数为ABO抗体血小板输血

8、后紫癜HPA-1a,HPA-1b,HPA-2b,HPA-3a,HPA-3b,HPA-15, anti-CD36少数为抗GPIa/IIa抗体被动同种异体免疫性血小板减少症HPA-1a,HPA-5b移植相关同种异体免疫性血小板减少症HPA-1a,HPA-3,HPA-5b自 身抗 体自发性血小板减少症多数位于GPb/ab/aGPIb/IX/VIb/IX/V，少数位于GPIV/V IV/V 和 GPIa/IIaGPIa/IIa继发于母体自发性血小板减少症同上药物依赖性抗体奎宁/奎尼丁抗体所致疾病抗原位于GPb/ab/a和GPIb/IXIb/IX我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样

9、一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物11抗体检测及交叉配血采取预防和治疗措施采取预防和治疗措施避免流产、出血等避免流产、出血等血小板相容性检测血小板相容性检测抗原定型抗原定型抗体检测抗体检测建立血小板供者库建立血小板供者库筛选基因型相容的供者筛选基因型相容的供者避免血小板抗体的产生避免血小板抗体的产生诊断血小板免疫性疾病诊断血小板免疫性疾病交叉配型交叉配型筛查血小板相容性供者筛查血小板相容性供者减少血小板输注无效减少血小板输注无效避免紫癜、出血和死亡避免紫癜、出血和死亡我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我

10、也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物12血小板抗原定型u 血清学定型 即用已知特异性抗体检测血小板血型抗原 缺点：特异性抗体来源困难 -人血清中血小板抗体通常为多特异性 -单克隆抗体匮乏，目前国际上仅有HPA-1a单抗， 无其它HPA单抗。u 基因定型 限制性片段长度多态性分析（RFLP） 序列特异性寡核苷酸聚合酶链反应(PCR-SSO) 序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)HPA-1 HPA-2 HPA-3 HPA-4 HPA-5 HPA-15 a b a b a b a b a b a b阳性对照条带等位基因条带 1bb 2ab 3bb 4aa 5aa 15aa我吓

11、了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物13血小板抗体检测 血清学我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物14血小板谱细胞血小板谱细胞（三人份（三人份O型混合血小板）型混合血小板）反应板反应板（已包被血小板单抗）（已包被血小板单抗）血小板单层血小板单层阳性反应阳性反应阴性反应阴性反应患者血清患者血清/血浆血浆抗人抗人IgG指示红细胞指示红细胞（人（人IgG致敏红细胞）致敏红细胞）50g,5min50g,5mi

12、n离心离心洗涤洗涤3 3次次50l/孔孔洗涤洗涤5 5次次水浴水浴30min30min阳性阳性阴性阴性50l/孔孔各各50l/孔孔200g,5min200g,5min离心离心200g,5min200g,5min离心离心我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物15我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物16单克隆抗体免疫固定血小板抗原方法（MAIPA）：该法先制备羊抗鼠IgG包被的多孔板，另外，将鼠抗人血小

13、板糖蛋白单克隆抗体和带有抗体的血小板共同孵育，再将孵育后的复合物加入多孔板，孵育，洗涤，最后加入酶联羊抗人抗体和酶反应底物后显色，定量测定血小板抗体。我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物17血小板相关疾病 临床上由于血小板血型抗原引起的血小板减少症主要有5种：v 血小板输注无效（PTR）v 输血后紫癜（PTP）v 新生儿同种免疫血小板减少症（FMAIT/NAIT）v 被动免疫血小板减少症（PAT）v 移植相关的同种免疫血小板减少症（TAT) 我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在

14、这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物18血小板相关疾病血小板免疫性疾病血小板免疫性疾病p血小板输注无效症p新生儿血小板减少症p输血后紫癜p自身免疫性血小板减少症p药物引起的血小板减少症p移植相关的血小板减少症血小板抗原血小板抗原p 同种异体抗原 HLA-I,HPA,ABHp 同种抗原 GPb/a,CD36p 自身抗原 GPb/a,GPb/p 药物依赖性抗原 肝素、奎宁等p 非特异性抗原临床病症临床病症p 淤点p 淤斑p 流产p（颅内）出血 p 死亡我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我

15、的猜测没有错：表里边有一个活的生物19血小板相关疾病-血小板输注无效(PTR）1.若输注后1小时 CCI 7500/L 12小时 CCI 6000/L 24小时 CCI 4500/L 连续3次，可判断为血小板无效输注2.血小板恢复（回收率）百分率（PR%）若输注血小板24小时后，PR%20%，可判断为血小板无效输注由HLA抗体引起PTR约占80%，其次为HPA或ABO抗体。现由于临床广泛输注去白细胞的成分血治疗血液病，发病率已经大为下降我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物20血小板相关疾病-血小

16、板输注无效(PTR）非免疫学原因(67.3%)发热脾功能亢进感染药物作用DIC血小板的质量问题免疫学原因(17.5%)HLA抗体HPA抗体ABO血型不合血小板自身抗体药物预防1.白细胞过滤2.辐照3. HLA和HPA配型输注我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物21血小板相关疾病-血小板输注无效(PTR）1.若输注后1小时 CCI 7500/L 12小时 CCI 6000/L 24小时 CCI 4500/L 连续3次，可判断为血小板无效输注2.血小板恢复（回收率）百分率（PR%）若输注血小板24小

17、时后，PR%20%，可判断为血小板无效输注由HLA抗体引起PTR约占80%，其次为HPA或ABO抗体。现由于临床广泛输注去白细胞的成分血治疗血液病，发病率已经大为下降我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物22血小板相关疾病-v输血后血小板减少性紫癜(post-transfusion thrombocytopenic purpura，PTTP)，又称“输血后紫癜”, Post-transfusion purpura, PTP: 由于血小板输注后发生同种免疫反应所致，一般发病率低。v患者被输入不相容的

18、血小板/全血或多次妊娠而产生血小板抗体，破坏输入的和自身血小板而导致急性和暂时性血小板减少。患者多见于（95%)有多次妊娠或输血史的老年女性。我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物23血小板相关疾病-v HPA-1a是引起该病的主要抗原。我国绝大部分人为HPA-1a抗原阳性。v 实验室检查：血小板计数降低、骨髓巨核细胞增生活跃、血清学检查血小板抗体存在但效价和病情无关。v 本病输血小板无效，甚至有加重病情的危险，肾上腺皮质激素不能缩短病程，但是，有可能改善出血症状。v 主要治疗措施为血浆置换或换血

19、，换血浆优于换全血。在输血后血小板显著减少和发生严重出血症状时，应立刻做血浆置换，一次交换65%85%的血浆量，平均在15天后出血症状减退，血小板数目上升。v 尽可能避免或减少输注血小板及含血小板的血液制品。 我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物24血小板相关疾病-我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物25血小板相关疾病-v第一胎即可发病；v病死率约13%；v治疗：输入相合的血小板以提高患儿的血小板

20、数，如找不到相合的血小板，可以输注经洗涤和辐射的母亲血小板，也可给患儿做放血治疗；v治疗前交叉配血：以母亲血清与供者血小板进行交叉配合试验；v预防：母亲在孕期可进行血浆置换我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物26 Passive alloimmune thrombocytopenia, PAT: 患者输入含有血小板特异性抗体的血浆，在数个小时之内出现血小板减少症，约一周后缓解。v一旦发现献血员血浆、血清中含有血小板特异性抗体应立即停止献血，这类献血员多为有妊娠史。vTransplantation

21、-associated alloimmune thrombocytopenia, TAT: 器官接受者的淋巴细胞产生抗外来移植物（血小板）的特异性抗体；或供体器官中残留的淋巴细胞产生抗宿主血小板的抗体我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物27发病机制一、抗血小板抗体v 约75%ITP患者可测到血小板相关自身抗体（PAIg），后者多为IgG、IgA也可是IgM。抗体通过Fab片段与血小板膜糖蛋白（Gpb/a等）结合。带有抗体的血小板接触到单核-巨噬细胞表面的FC受体，易被吞噬破坏。另外，抗血小板 抗

22、 体 对 巨 核 细 胞 分 化 也 有 抑 制 作 用 。二、 血小板生成时间缩短v ITP血小板生存可缩短至23天或更短，ITP患者血小板易在脾脏被扣留。脾脏可产生抗血小板抗体，脾内的巨噬细胞参与破坏血小板过程，切脾对相当部分的患者有效。我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物28v急性型：儿童多见，初起有上感，主要为病毒细菌所致。可有寒热，全身皮肤粘膜出血(瘢点，紫癜或血肿)、内脏出血。1%患者颅内出血，危及生命，但大多数呈自限性，一般46周可自行缓解。v慢性型：主要见于40岁以下女青年，症状

23、多在偶然中发现，也有皮肤粘膜的出血，内脏出血较少见，月经过多者可引起贫血。我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物29我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物30v检测LIFECODES PAKAUTO试剂盒我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物31一、糖皮质激素二、脾切除三、免疫抑制剂四、高剂量免疫球蛋白和

24、血浆置换我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物32 我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物33v绝大多数患者是由于vWF蛋白裂解酶（vWFCP）异常所致。vWFCP 是正常止血过程中必须成在高剪切力血流状态时内皮细胞表现、血小板表面受体和vWF多聚体三者之间相互作用，导致血小板与内皮细胞粘附。vWF水平过高会造成慢性内皮细胞损伤，可导致血栓性疾病。 v血管性血友病因子裂解酶（ADAMTS13），vWF

25、CP（ADAMTSl3）在TTP发病中起病因学作用，而其活性降低只是表现，本质的因素是其质、量或抗体存在。ADAMTSl3缺陷，活性下降，形成过多超大的vWF多聚体，可触发病理性血小板聚集，导致TTP。 我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物34v1、血浆置换 v2、血浆输注 v3、糖皮质激 v4、免疫抑制剂 v5、脾切除 v6、补充ADAMTS13蛋白 我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物35欢迎指导！v广州医科大学附属第五医院输血科我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物个人观点供参考，欢迎讨论