2022年总糖和还原糖的测定可用 .pdf

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1、总糖和还原糖的测定费林试剂热滴定法目的要求：掌握还原糖和总糖的测定原理，学习用直接滴定法测定还原糖的方法。实验原理：还原糖是指含有自由醛基（如葡萄糖）或酮基（如果糖）的单糖和某些二糖（如乳糖和麦芽糖）。在碱性溶液中，还原糖能将Cu2+ 、Hg2+ 、Fe3+、Ag+等金属离子还原，而糖本身被氧化成糖酸及其他产物。糖类的这种性质常被用于糖的定性和定量测定。本实验采用费林试剂热滴定法。费林试剂由甲、乙两种溶液组成。甲液含硫酸铜和亚甲基蓝（氧化还原指示剂）；乙液含氢氧化钠，酒石酸钾钠和亚铁氰化钾。将一定量的甲液和乙液等体积混合时，硫酸铜与氢氧化钠反应，生成氢氧化铜沉淀：2NaOH + CuSO4 =

2、 Cu(OH)2+ Na2SO4 在碱性溶液中，所生成的氢氧化铜沉淀与酒石酸钠反应，生成可溶性的络合物酒石酸钾钠铜：反应生成的氧化亚铜沉淀与费林试剂中的亚铁氰化钾（黄血盐）反应生成可溶性复盐，便于观察滴定终点。 Cu2O + K4Fe(CN)6 + H2OCu2O + K4Fe(CN)6 + H2OK2Cu2Fe(CN)6 + 2KOH 滴定时以亚甲基蓝为氧化还原指示剂。因为亚甲基蓝氧化能力比二价铜弱，待二价铜离子全部被还原后， 稍过量的还原糖可使蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无色的还原型的亚甲基蓝，即达滴定终点。根据样液量可计算出还原糖含量。名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - -

3、- - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 1 页，共 4 页 - - - - - - - - - 试剂和器材：一、试剂费林试剂：甲液： 称取 15g硫酸铜 （CuSO4 5H2O ） 及 0.05g 亚甲基蓝，溶于蒸馏水中并稀释到1000mL 。乙液：称取 50g 酒石酸钾钠及 75g NaOH ，溶于蒸馏水中，再加入4g 亚铁氰化钾 K4Fe（CN ）6，完全溶解后，用蒸馏水稀释到1000mL ，贮存于具橡皮塞玻璃瓶中。0.1 葡萄糖标准溶液：准确称取1.000g 经 98100干燥至恒重的无水葡萄糖，加蒸馏水溶解后移入 100

4、0mL容量瓶中，加入 5mL浓 HCl（防止微生物生长），用蒸馏水稀释到 1000mL 。6mol/L HCl ：取 250mL浓 HCl（35% 38% ）用蒸馏水稀释到500mL 。碘碘化钾溶液：称取5g 碘，10g碘化钾溶于 100mL蒸馏水中。6mol/L NaOH：称取 120gNaOH 溶于 500mL蒸馏水中。0.1%酚酞指示剂。二、材料藕粉，淀粉。三、器材试管 3.020cm （1）；移液管5mL （2）；烧杯 100m L(1); 250mL 锥形瓶 ; 调温电炉; 滴定管 25mL(1)。操作方法：一、样品中还原糖的提取准确称取 1g 藕粉，放在 100mL烧杯中，先以少量

5、蒸馏水调成糊状，然后加入约40mL蒸馏水，混匀，于 50恒温水浴中保温20min，不时搅拌，使还原糖浸出混。过滤，将滤液全部收集在 50mL的容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，即为还原糖提取液。名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 2 页，共 4 页 - - - - - - - - - 二、样品中总糖的水解及提取准确称取 1g 淀粉，放在大试管中，加入6mol/L HCl 10mL ，蒸馏水 15mL ，在沸水浴中加热 0.5h ，取出 12 滴置于白瓷板上， 加 1 滴 I-

6、KI溶液检查水解是否完全。 如已水解完全，则不呈现蓝色。水解毕。冷却至室温后加入1 滴酚酞指示剂，以6mol/L NaOH 溶液中和至溶液呈微红色， 并定容到 100mL ，过滤取滤液 10mL于 100mL容量瓶中， 定容至刻度，混匀，即为稀释1000 倍的总糖水解液，用于总糖测定。三、空白滴定准确吸取费林试剂甲液和乙液各5.00mL，置于 250mL锥形瓶中，加蒸馏水10mL 。从滴定管滴加约 9mL葡萄糖标准溶液，加热使其在2min 内沸腾，准确沸腾30s，趁热以每2s 1 滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点。记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。平行操作3 次，取其平

7、均值，按下式计算：式中：F10mL费林试剂（甲液和乙液各5.00mL）相当于葡萄糖的量， mg ；C 葡萄糖标准溶液的浓度，mg/mL ；V标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积，mL 。四、样品糖的定量测定(1) 样品溶液预测定： 吸取费林试剂甲液及乙液各5.00mL，置于 250mL锥形瓶中，加蒸馏水 10mL ，加热使其在 2min 内沸腾，准确沸腾30s，趁热以先快后慢的速度从滴定管中滴加样品溶液，滴定时要保持溶液呈沸腾状态。待溶液由蓝色变浅时，以每2s 1 滴的速度滴定，直至溶液的蓝色刚好褪去为终点。记录样品溶液消耗的体积。(2) 样品溶液测定：吸取费林试剂甲液及乙液各5.00mL， 置于

8、锥形瓶中，加蒸馏水 10mL ，加玻璃珠 3 粒，从滴定管中加入比与测试样品溶液消耗的总体积少1mL的样品溶液，加热使其在 2min 内沸腾，准确沸腾30s，趁热以每 2s 1 滴的速度继续滴加样液，直至蓝色刚好褪去为终点。记录消耗样品溶液的总体积。平行操作3 次，取其平均值。名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 3 页，共 4 页 - - - - - - - - - 五、结果处理其中：m 样品重量， g；式中： F10mL费林试剂（甲液和乙液各5.00mL）相当于葡萄糖的

9、量， mg ；V标定时平均消耗还原糖或总糖样品溶液的总体积，mL ；（100ml）V1还原糖或总糖样品溶液的总体积，mL ；1000mg换算成 g 的系数。注意事项（1）费林试剂甲液和乙液应分别贮存，用时才混合，否则酒石酸钾钠铜络合物长期在碱性条件下会慢慢分解析出氧化亚铜沉淀，使试剂有效浓度降低。（2）滴定必须是在沸腾条件下进行，其原因一是加快还原糖与Cu2 的反应速度； 二是亚甲基蓝的变色反应是可逆的，还原型的亚甲基蓝遇空气中的氧时会再被氧化为氧化型。此外，氧化亚铜也极不稳定，易被空气中的氧所氧化。保持反应液沸腾可防止空气进入，避免亚甲基蓝和氧化亚铜被氧化而增加消耗量。（3）滴定时不能随意摇动锥形瓶，更不能把锥形瓶从热源上取下来滴定，以防止空气进入反应溶液中。名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 4 页，共 4 页 - - - - - - - - -