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1、组织学组织学(histology):):研究机体微细结构研究机体微细结构 及其相关功能的科及其相关功能的科 学学 胚胎学(胚胎学(embryologyembryology):研究人体发生、):研究人体发生、 生长及其发育机生长及其发育机 制的一门科学制的一门科学 组织学绪论组织学绪论 Histology Introduction 三、组织学技术三、组织学技术 一、一、 组织学的概念组织学的概念 二、显微镜的应用二、显微镜的应用四四 、组织学的学习方法、组织学的学习方法一、组织学的概念一、组织学的概念 机体的微细结构机体的微细结构是用显微镜是用显微镜及其相关功能的及其相关功能的科学科学 。(细胞
2、、组织、器官、系统)研究研究 红细胞红细胞 白细胞白细胞 肌细胞肌细胞 精子精子 神经细胞神经细胞 组织组织器官器官系统系统 细胞细胞 细胞间质细胞间质 (细胞外基质(细胞外基质)+上皮组织上皮组织结缔组织结缔组织肌组织肌组织神经组织神经组织成人有11015个细胞,约210种. 细胞膜细胞膜 细胞质细胞质 细胞核细胞核细胞提出细胞提出组组织织建建立立形成形成21种 透射电镜透射电镜 -观察细胞内部结构观察细胞内部结构 扫描电镜扫描电镜 -观察组织或细胞表面的立体结构观察组织或细胞表面的立体结构电子显微镜电子显微镜光学显微镜光学显微镜解剖光学显微镜(放大镜)解剖光学显微镜(放大镜)组织光学显微镜
3、组织光学显微镜二、显微镜的应用二、显微镜的应用1、显微镜的分类、显微镜的分类光学显微镜光学显微镜 0.2um物体放大物体放大1000倍倍0.2nm物体放大物体放大1000倍倍 镜下结构简称镜下结构简称 LM 结构发明于结构发明于16世纪世纪 镜下结构简称镜下结构简称 EM 结构发明于结构发明于1932年年2、显微镜的特点、显微镜的特点 红细胞光镜红细胞光镜(LM) 红细胞扫描电镜红细胞扫描电镜(EM) 浆细胞光镜浆细胞光镜(LM)电子显微镜电子显微镜 浆细胞透射电镜浆细胞透射电镜(EM)三、组织学技术三、组织学技术 石蜡切片法(用于教学)石蜡切片法(用于教学) 冷冻切片法(用于临床检验)冷冻切
4、片法(用于临床检验) (肝、肾、淋巴结等)(肝、肾、淋巴结等)非切片法非切片法(牙齿、血液、疏松结缔组织等)(牙齿、血液、疏松结缔组织等)切片法切片法涂片铺片(撕片)铺片(撕片) 磨磨 片片 取材取材(一)、石蜡切片法(一)、石蜡切片法1、快速杀死动物取材。、快速杀死动物取材。2、组织愈新鲜愈好。、组织愈新鲜愈好。 3、材料大小一般不超过、材料大小一般不超过 0.5cm3。固定固定1、动物的组织在离体后便很快地进行解体、动物的组织在离体后便很快地进行解体 , 这些变化可能是由于细菌或是由于其这些变化可能是由于细菌或是由于其 本身所本身所含酶的作用。含酶的作用。2、在动物死后应立即将其固定起来、
5、在动物死后应立即将其固定起来,停止其分停止其分解作用解作用 , 尽可能保存其结构及成分尽可能保存其结构及成分,并能抵抗各并能抵抗各个步骤处理时所产生的损坏作用。个步骤处理时所产生的损坏作用。 3、常用的固定液有、常用的固定液有 10% 福尔马林福尔马林 , Bouin 液液 , 苦味酸、乙醇。苦味酸、乙醇。4、固定时间为、固定时间为24小时小时-很长。很长。冲洗冲洗1、用水将固定液置换。、用水将固定液置换。2、时间为、时间为24小时。小时。脱水脱水1、组织必须先脱去水分、组织必须先脱去水分 , 才能包埋才能包埋于蜡中。于蜡中。2、脱水的步骤是陆续经、脱水的步骤是陆续经 70% 、 80% 、
6、90% 、 95% 、 100 % 各级各级酒精酒精 , 以去净组织块内的水分以去净组织块内的水分 , 并并完全由酒精所代替完全由酒精所代替 。3、时间为、时间为3-6小时小时 透明透明1、因石蜡不溶于、因石蜡不溶于 酒精而溶于二酒精而溶于二甲苯甲苯 , 因而再用二甲苯替代酒精因而再用二甲苯替代酒精 , 同时因组织浸于油质二甲苯同时因组织浸于油质二甲苯 中也就变得透明了。中也就变得透明了。2、时间为、时间为24小时。小时。 浸蜡浸蜡1、将透明好的组织快放入溶化、将透明好的组织快放入溶化 的石蜡中,置于保温箱。的石蜡中,置于保温箱。2、时间为、时间为35小时。小时。包埋包埋最后把组织放在保持于最
7、后把组织放在保持于 52 58C 的已溶解的石的已溶解的石蜡中,置于常温下。蜡中,置于常温下。 切片切片待冷却后就变成待冷却后就变成坚硬的组织蜡块坚硬的组织蜡块 , 便可以进行切片便可以进行切片了。了。 贴片贴片染色染色 苏木精苏木精(Hematoxylin)伊红伊红(Eosin)碱性染料碱性染料将嗜碱性物质将嗜碱性物质(本身酸性本身酸性)染成蓝色染成蓝色酸性染料酸性染料将嗜酸性物质将嗜酸性物质(本身碱性本身碱性)染成红色染成红色细胞核中的细胞核中的DNA、RNA细胞质细胞质中中的的RNA细胞质细胞质、膜性结构膜性结构(线粒体线粒体、溶酶溶酶体体、滑面内质网滑面内质网)(嗜碱性嗜碱性)(嗜酸性
8、嗜酸性) Giemsa染色染色 、银染色、银染色(二)染色方法(二)染色方法特殊染色特殊染色:HE染色:染色: 嗜中性嗜中性四、组织学的学习方法四、组织学的学习方法巨噬细胞巨噬细胞 消化分解消化分解1、形态结构和功能的关系、形态结构和功能的关系3、立体和断面的关系、立体和断面的关系4、前后联系、前后联系,对比总结对比总结2、理论和实践的关系、理论和实践的关系功能功能(有溶酶体有溶酶体)多糖多糖PA氧化氧化醛醛Schiff试剂试剂紫红色沉淀紫红色沉淀五、五、 Histochemistry and Cytochemistry 组织化学与细胞化学组织化学与细胞化学 试剂试剂 + 组织中待检物质组织中
9、待检物质 有色沉淀有色沉淀 (多糖、酶、脂类、核酸)多糖、酶、脂类、核酸) ( periodic acid Schiff reaction): 是确定组织或细胞中有无多糖的方法。是确定组织或细胞中有无多糖的方法。 原理:原理:PAS反应反应单柱上皮不同方位的切片图结构与功能舒张状态舒张状态收缩状态收缩状态静态与动态综合与比较六、细胞 一 细胞膜细胞膜 cell membrane 二二 细胞质细胞质 cytoplasm 三三 细胞核细胞核 nucleus细胞膜(一)、(一)、 cytoplasm 基质基质 核糖体核糖体 ribosome 细胞器细胞器 内质网内质网 ERER 高尔基复合体高尔基复合体 Golgi 溶酶体溶酶体 LysLys 线粒体线粒体 MitMit 过氧化物酶体过氧化物酶体 peroxisome 中心体中心体 centrosome 细胞骨架细胞骨架 cytoskeleton 包含物包含物: :糖原、脂滴、分泌颗粒糖原、脂滴、分泌颗粒线粒体线粒体 Mit Mit : 能量供应站能量供应站 线粒体粗面内质网
限制150内