FASCAria日常保养与维护.doc

《FASCAria日常保养与维护.doc》由会员分享，可在线阅读，更多相关《FASCAria日常保养与维护.doc（3页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、关于FACSAria 流式细胞仪的使用与保养知识FACSAria是B-D公司2003年最新推出的世界上第一台台式高速多荧光检测和分选的流式细胞仪，结合目前用户的使用情况，在这里提供有关FACSAria使用保养和维护的小知识，以确保仪器 能够良好地运行。一 仪器的运行环境 流式细胞仪属于一种高精密度的仪器，环境是决定仪器运行状态好坏的重要因素之一。有的用户将仪器放置在一个很小的空间内，仪器在运行过程中将产生热量，由于空间过小，将会影响散热，造成仪器内部过热。轻者，会影响电子元件和集成电子线路的工作环境，使它们偏离工作区；严重者，部分电子元件本身工作中产生的热量无法排出，最后使该元件烧坏。 有些用

2、户给出的空间足够大，但是防尘做的不好。桌子和仪器上到处可见灰尘。流式细胞仪属于精密的光学仪器，如果灰尘附着在它的光学部件上，对仪器的检测灵敏度和分辨率会造成很大的影响。因此，仪器放置的位置应离窗户稍远些，放置仪器的房间与走道之间最好有一个缓冲带。尽量少开或不开窗户，要勤清洁仪器周围的灰尘，养成良好的习惯，确保仪器一直工作在良好的状态中。二 仪器的开机和关机开机前，先掀起流动室和分选室的罩盖，开启电源，开计算机，等计算机进入WINDOWS后，开启激光电源，运行B-D FACS DiVA软件， 检查废液、鞘液、双蒸水、酒精及清洗液的提示器是否有报警（见下图），如果有，应倒掉废液或灌满所提示桶内的液

3、体，然后执行BD FACSDiVa仪器菜单中的“Fluidics Startup”,该命令的功能是清除仪器管道内的所有液体，换成鞘液桶内液体。从B D FACSDiVa分选（Sort）菜单，进入分选模式（Sort Setup），选择所需要的分选速度（High、Medium和Low），点击液流显示窗上的开液流开关，检查液流是否正好流入废液槽中间，否则，调整废液槽的位置。同时，观察液流是否是一条线，如果不是，要将喷嘴取下重装。 在日常关机前，必须先将激光器关掉，因为激光长时间照射在没有液流流动的流动室石英杯壁上，会影响它的光学特性，降低其透光率。选择“Fluidics Shutdown”命令，该命

4、令的功能是清空管道内鞘液，用双蒸水代替，清洗进样管整个关机过程约3分钟。该命令执行完成后，请检查喷嘴下面是否有水滴，如果有，取下喷嘴，擦干周围的水；检查高压分选板上是否有水珠，如果有，要用棉签或餐巾纸擦干。三 分析和分选的使用步骤当只进行常规的分析实验而不做分选时，建议客户不要使用PBS作为鞘液，而采用双蒸水作为鞘液，因为液流的流速非常快，与细胞接触的时间非常之短,所以，尚未等细胞生物特性发生改变,细胞已经通过检测区，不会对检测结果造成任何影响。同时，建议客户在做分析的实验时，请选择低（Low）的鞘液压力，这样可以有效延长喷嘴的寿命。在进行分选实验时，首先应根据喷嘴的大小选择鞘液压力，High

5、和Medium用于70um口径的喷嘴，Low用于100um口径的喷嘴，请从分选菜单（Sort）进入分选模式设置(Sort Setup)选择鞘液压力的大小，不要从仪器菜单（Instrument）进入鞘液压力（Sheath Pressure）选择，通过前者选择，仪器的一些参数（如：震动频率，延迟时间等）会自动的根据你的选择而改变。如果被分选的细胞要进行无菌培养时，需对仪器的内部管道进行消毒，具体的消毒方法如下：准备好70%的酒精、消毒过的双蒸水和PBS鞘液，分别装入各个标记的桶内，按正常程序开机，从仪器菜单（Instrument）进入清洁模式（Cleaning Modes）,选择无菌分选准备（Pr

6、epare for Aseptic Sort）,运行2分钟（勿超过2分钟），取一支装有3ml消毒过的双蒸水样品管，放在进样托架上。进入清洁模式（Cleaning Modes）,选择清洗流动室（Clean Flow cell）,然后再运行Fluidics Startup命令，一旦启动结束，再选择无菌分选准备。重复以上的步骤，便可进行样本分选（重复次数应视仪器具体情况而定）。分选实验结束后，请将鞘液压力选成“Low”，将鞘液桶内的PBS换成双蒸水，运行10分钟，然后按正常程序关机。四 仪器的维护保养一台高精密仪器的使用状态与仪器的维护保养有着密切的关系，个别用户错误地认为，仪器不用的时候，不要去开

7、启它的电源，这样可以延长它的寿命。事实恰恰相反，所有的仪器，开的越多故障发生率就越低，(某些部件有时间寿命除外)。我们建议FACSAria的用户，每周务请开机2-3次。如果实在没有样本，请打开液流15分钟后关机。应经常检查一下喷嘴的插槽口附近是否有盐结晶，如果有请按照用户使用手册（P166）指示,取下喷嘴和喷嘴锁定杆，用棉签蘸少许双蒸水将其擦掉。下面结合实际应用情况，分别对B D FACS DiVa软件提供的几种清洗模式一一作些介绍：1 样本管反冲（Sample Line Backflush）:用户应该不定期地执行该命令，以保持样本管的畅通，特别是当用户检测的样本浓度比较高或样本比较粘稠时。等

8、样本检测完后，立刻执行该命令，以清除残留在管道内的细胞。另，此命令可用于判断进样针是否堵塞。2 流动室清洗（Clean Flowcell）:流动室是流式细胞仪的检测中心，它的干净与否将直接影响检测的灵敏度和精度。建议客户每周要做一次流动室的清洗工作。请选择Instrument Cleaning Modes Clean Flow Cell。根据提示，手动在上样架上放一支装约3ml有效氯浓度0.5%漂白液的试管，然后点击“OK”。 清洗完成后，清洗液留在进样管和流动室内，所以需执行“开启液路”或“关机”命令清洗流动室，清除残留的清洗液。3 添加液体后排除气泡（Prime After Tank Re

9、fill）：一般情况下不用执行该命令。但是，当发现添加完液体后，管道内有空气或气泡产生，且桶内的液体受到气泡的阻力不流动时，或者在开机状态添加液体过程中液体管路与液流车断开， 请选择Instrument Cleaning Modes Prime after Tank Refill，在如下命令窗口中相应方形容器的位置上选勾。见下图：4 长清洗（Long Clean）：长清洗是由电脑软件控制，对仪器的管道做一次系统全面的清洁工作，建议客户每2-3月做一次，如果仪器使用较频繁，可每月做一次。请选择Instrument Cleaning Modes Long Clean。它有3种可供选择的清洗方式（漂水、蒸馏水和乙醇），提请客户特别注意，不要选择用酒精进行清洗（若不分选，将乙醇桶内的溶液换成滤过的蒸馏水）。整个清洗过程约持续8-10分钟。如果要对样本进样仓进行清洗，可在进样仓清洗功能前选勾（Clean Bulk Injection Chamber）。