2022年微生物的大小测定与显微计实用 .pdf
《2022年微生物的大小测定与显微计实用 .pdf》由会员分享,可在线阅读,更多相关《2022年微生物的大小测定与显微计实用 .pdf(5页珍藏版)》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。
1、微生物实验1 实验二 微生物的大小测定与显微计数一、实验目的1.学习并掌握用测微尺测定微生物细胞大小的方法。2.了解血细胞计数板的构造及计数原理。3.掌握使用血细胞计数板进行微生物计数的方法。二实验原理1.酵母菌大小测定在显微镜下, 测微尺可完成对微生物大小的测定。测微尺包括目镜测微尺和镜台测微尺。目镜测微尺是一块放入目镜中的圆形玻片,在玻片中央把10mm 的长度刻成100 等分,用于测量经显微镜放大后的细胞图像。测量前, 需先用镜台测微尺校正。镜台测微尺是专门用来校正目镜测微尺的。2.微生物数量的测定血细胞计数板(图一)是一块特制的载玻片,薄片上有4 条槽构成3 个平台,中间较宽的平台又被一
2、短槽隔成两半,每一边平台各刻有一个方格网,每个方格网共分为9 个大方格,中间的大方格即为计数室。计数室(图二)的刻度有两种:一种大方格分为 16 个中方格,每个中方格分成25 个小方格;一种大方格分成25 个中方格, 中方格分成16 个小方格。每个大方格都是400 个小方格,边长为1mm,面积1mm2,盖上盖玻片后,盖玻片与载玻片之间的高度为0.1mm,所以计数室的容积为0.1mm3。三 实验仪器、材料和用具1. 实验用具:载玻片、盖片、200 l 移液器及 tip 、擦镜纸、装有蒸馏水的洗瓶。2. 实验仪器:普通生物显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、血球计数板、手动计数器; 3. 菌种 :酿酒
3、酵母 (200rpm,28, 24h,稀释 20 倍)四实验步骤1 酵母菌大小测定(1) 目镜测微尺的校正血细胞计数板构造图二血细胞计数室构造(16 25)名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 1 页,共 5 页 - - - - - - - - - 微生物实验2 在 100 倍镜下, 使目镜测微尺的目镜和镜台测微尺某一个区域内两线完全重合。计数两重合刻度之间目镜测微尺和镜台测微尺的格数(格数必须是整数)。(2) 细胞大小的测定1) 将稀释 40 倍的少量的酵母培养液涂在载玻
4、片上,用盖玻片推开,放在载物台上。2) 用 100 倍镜观察,用目镜测微尺来测量酵母菌菌体的长、宽各占几格。测定20 个菌体,统计计算。(3)测定完毕后,将目镜测微尺和物镜测微尺擦拭干净包好归还。2.微生物数量的测定1) 菌液准备:将啤酒酵母在28, 100r/min 培养 8h。40 倍稀释(由助教完成) 。2) 镜检计数室:加样前,对计数板的计数室镜检,若有污物需要清洗,干燥后使用。3) 加样品:将血细胞计数器中间平台盖上盖玻片,用无菌水吸管将摇匀的啤酒酵母菌悬液由盖玻片的边缘滴一小滴,让菌液靠毛细渗透作用自动进入到计数室。4) 显微镜计数:加样后将血细胞计数板置于显微镜的载物台上,静置1
5、min 后,用4倍镜找到计数室,再换10 倍镜进行计数。对两个计数室各计数一次。5) 酵母菌计数完毕后,马上将其用洗瓶冲洗,自然晾干,或者用擦镜纸轻轻擦干。6) 重新加样:按照前面的步骤再计数5 次。利用公式计算出血细胞的数量。五、实验结果1. 酵母菌大小测定已知镜台测微尺每格10m , 所以根据下列公式可以算出目镜测微尺每格所代表的实际长度:格数两重合线间目镜测微尺格数两重合线间镜台测微尺)目镜测微尺每格长度(10m物镜倍数(目镜10 )目镜测微尺格数 (小格)镜台测微尺格数 (小格)目镜测微尺每格长度( m)100111 0 11.0 0.99 表一目镜测微尺标定结果. 菌号1 2 3 4
6、 5 6 7 8 9 10 目镜测微尺格数(长轴)9.1 8.5 8.0 8.9 8.1 6.3 9.2 7.2 7.0 8.5 目镜测微尺格数(短轴)6.0 6.0 6.9 8.0 6.0 5.3 7.2 6.8 6.8 6.1 名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 2 页,共 5 页 - - - - - - - - - 微生物实验3 菌号11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 目镜测微尺格数(长轴)6.9 7.1 7.1 8.0 8.0 9.0 7.
7、0 10.0 9.0 7.0 目镜测微尺格数(短轴)5.0 6.5 5.2 7.8 6.2 8 5.1 8.9 7.0 5.2 表二酵母菌大小的测定结果(100 ) 经计算得:酵母菌长轴平均值7.995 0.99m 7.92 m ;酵母菌短轴平均值6.500 0.99m 6.44 m酵母菌体积平均值=4abc/3= 172.04m3随机误差使测量值具有一定的分散性,实验标准偏差可用s 表征,s 可以用贝塞尔公式算出:)1/()(12nyysnii其中 n 在这次实验中为20 计算得1.01长轴s m 1.10短轴sm不确定度sntU)/(置信度为 0.95 时,查表, t = 2.093,则n
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 2022年微生物的大小测定与显微计实用 2022 微生物 大小 测定 显微 实用
限制150内