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1、临床检验知识点 微生物1.原核细胞型微生物:仅有原始核,无核膜、无核仁,染色体仅为单个裸露DNA分子,无有丝分裂,缺乏完整的细胞器。属于这类微生物的有细菌、放线菌、螺旋体、支原体、衣原体、立克次体。 2.真核细胞型微生物细胞核分化程度较高,有典型的核结构(有核膜、核仁、多个染色体,由DNA和组蛋白组成),通过有丝分裂进行繁殖。胞浆内有多种完整的细胞器。属于这类微生物的有真菌和原虫。 3.非细胞型微生物结构最简单,体积最微小,能通过细菌滤器,无细胞结构,由单一核酸(DNA或RNA)和(或)蛋白质外壳组成,无产生能量的酶系统。必须寄生在活的易感细胞内生长繁殖。这类微生物有病毒、亚病毒和肮粒。 4.
2、微生物是存在于自然界的一大群形体微小、结构简单、肉眼不能直接看到,必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百至数万倍才能看到的微小生物。微生物包括病毒、细菌、螺旋体、支原体、立克次体、衣原体、放线菌、真菌和原虫等。 5.细菌形体微小,通常以微米为测量单位。 6.条件致病性微生物(正常菌群)临床上多引起内源性感染。 7.G+菌特有成分:磷壁酸(重要表面抗原,可用于细菌血清学分型)(外毒素)。 G-菌特有成分:外膜层(由脂多糖(内毒素)、脂质双层(磷脂)、脂蛋白)。 8.G+菌和G-菌细胞壁的共同成分是肽聚糖。结构由聚糖骨架、四肽侧链和五肽交联桥(G-菌无。是溶菌酶、青霉素作用部位)。 9.细菌的主要
3、遗传物质:核质(染色体)、质粒(存在于胞质,双链闭合环状DNA分子)、转位因子10.细菌外毒素的化学本质是蛋白质。不耐热,易被热破坏,5620分钟即可破坏,性质不稳定,易被酸和酶破坏,经0.3%到0.4%的甲醛液处理后失去毒性但仍保留免疫原性的生物制品称为类毒素。 11.内毒素是革兰阴性细菌壁中的脂多糖成分(LPS),由O特异性多糖,非特异性核心多糖和脂质A3。其中脂质A是内毒素的主要毒性组分。 12.荚膜本身无毒,但能抵抗吞噬细胞的吞噬和消化作用,增强细菌的侵袭力,是病原菌的重要毒力因子。 13.芽孢是有革兰阳性菌形成的,无致病性,是细菌的休眠体,而非细菌的繁殖方式。特有的吡啶二羧酸成分,具
4、有保护和稳定蛋白质等生命物质的作用。 将芽胞是否被杀死而作为判断灭菌效果的指标。 14.L型革兰阳性菌细胞壁几乎完全缺失,原生质仅被一层胞膜包绕,一般呈球形,称原生质体,菌落:“油煎蛋”(荷包蛋)样菌落(典型L型细菌)。颗粒型菌落(简称G型菌落)丝状菌落(简称F型菌落)。 15.细菌个体的生长繁殖:细菌一般是以二分裂方式进行无性繁殖,个别细菌如结核分枝杆菌可以通过分枝方式繁殖。 16.自营菌:以无机物为原料;异营菌(腐生菌:以无生命的有机物质为营养物质;寄生菌:以宿主体内有机物为原料),所有致病菌都是异营菌。 17.细菌营养物质:水、碳源、氮源、无机盐类和生长因子。 18.细菌个体的生长繁殖方
5、式:无性二分裂,在对数期以几何级数增长。 19.细菌分类(伯杰)等级依次为界、门、纲、目、科、属、种(最小分类单位)。 20.常用的细菌培养方法是:需氧培养法、二氧化碳培养法和厌氧培养法。 21.通常由正常无菌部位采取的标本接种血平板,置于空气或含5%10%CO2的气缸中培养,大部分细菌可于2448h生长良好。 22.透射电子显微镜适于观察细菌内部的超微结构;扫描电子显微镜适于对细菌表面结构及附件的观察。 23.细菌染色的基本程序:涂片(干燥)固定初染染色(媒染)(脱色)(复染,使脱色菌体着色)。 24.SS琼脂有较强的抑菌力,用于志贺菌和沙门菌的分离。因选择性过强,可影响检出率,所以,使用时
6、最好加一种弱选择平板以配对互补。 25.碱性琼脂或TCBS琼脂用于从粪便中分离霍乱弧菌及其他弧菌。 26.痰标本:血平板、中国蓝麦康凯、巧克力平板作分离。 27.中国蓝麦康凯用于筛选G-杆菌。 28.含杆菌肽的巧克力平板(含有V和X因子)用于筛选嗜血杆菌。 29.连续划线分离法:杂菌不多的标本。 分区划线分离法:杂菌量较多的标本。 30.斜面接种法:该法主要用于单个菌落的纯培养、保存菌种或观察细菌的某些特性。 31.倾注平板法:牛乳、饮水和尿液细菌计数。 32.涂布接种法:常用于纸片法药物敏感性测定,也可用于被检标本中的细菌计数。 33.半固体培养基用于观察细菌的动力(沿穿刺线生长呈模糊或根须
7、状,并使培养基变混浊为动力阳性)34.双环:在菌落周围完全溶解的晕圈外有一个部分溶血的第二圆圈。 35.氧化-发酵试验(O/F试验):有氧参加氧化型(专性需氧);无氧降解发酵型;不分解葡萄糖而分解蛋白胨产碱型。(肠杆菌科细菌发酵型全+)。 将待检菌同时接种于2支HL培养基中,其中1支滴加无菌液体石蜡,35培养2天或更长时间,观察结果。氧化型细菌在无氧环境中不能分解葡萄糖,故仅不加石蜡的培养基产酸;发酵型细菌无论在有氧或无氧环境中都分解葡萄糖,故2支培养基均产酸;产碱型细菌不分解葡萄糖,故2支培养基均无变化。 36.甲基红试验(与V-P试验相反):阳性红色,阴性黄色。大肠埃希菌(+),产气肠杆菌
8、(-)。 球菌1.葡萄球菌属:G+,触酶阳性、耐热、耐干燥、耐高盐,是抵抗力最强的无芽胞细菌。 2.表皮葡萄球菌:触酶试验阳性、血浆凝固酶试验阴性、对新生霉素敏感(医院感染,血培养污染)。 3.腐生葡萄球菌:触酶试验阳性、血浆凝固酶试验阴性、对新生霉素耐药(尿路感染)。 4.金黄色葡萄球菌:触酶试验、凝固酶试验(最简单)、耐热DNA酶试验、甘露醇发酵试验均阳性。对新生霉素敏感。透明溶血环。 SPA葡萄球菌A蛋白为完全抗原有种属特异性无型特异性结合在细胞壁的黏肽部分具有抗吞噬作用90%以上的金葡菌株有此抗原可与IgG的Fc段结合致病性:感染(化脓性感染,食物中毒,表现为急性胃肠炎),医院内感染,
9、毒素性疾病。主要致病物质有血浆凝固酶、葡萄球菌溶血素、杀白细胞素、肠毒素、表皮溶解毒素和毒性休克综合征毒素等。 耐药性检测:检耐甲氧西林金葡菌(MRSA),耐甲氧西林的凝固酶阴性葡萄球菌(MRSE),耐万古霉素金葡菌(VRSA),耐万古霉素表皮葡萄球菌(VRSE)。NCCLS/CLSI推荐用头孢西丁纸片法检测mecA基因介导对苯唑西林耐药的葡萄球菌。 5.链球菌属:链球菌属为触酶阴性,兼性厌氧,呈圆形或卵圆形的革兰阳性球菌,在液体培养基中生长时易形成长链而表现为沉淀生长(但肺炎链球菌为混浊生长)。触酶试验阴性,能分解葡萄糖产酸不产气,对其他糖类的分解因不同菌株而异。有些链球菌分解精氨酸产氨、水
10、解七叶苷、马尿酸盐及淀粉等。还有些链球菌可耐受65g/lnac和胆汁。抗力不强,对各种常用消毒剂敏感,60加热30分钟即可杀灭。 链球菌属的鉴定:胆汁七叶苷试验;Optochin敏感性试验;马尿酸盐水解试验;CAMP试验;杆菌肽敏感试验。optochin敏感试验。 A群链球菌(猩红热)杆菌肽敏感;B群链球菌(败血症、肺炎、脑膜炎、咽喉炎)CAMP试验阳性(与金葡菌,箭头状溶血),水解马尿酸;D群链球菌七叶苷试验阳性(40%胆汁培养基,变黑); 甲型()溶血性链球菌:菌落呈灰色针尖状,菌落周围有12mm宽的草绿色溶血环,故又称草绿色链球菌。本菌为条件致病菌。 乙型()溶血性链球菌:通称溶血性链球
11、菌,菌落较小,灰白色,菌落周围有24mm宽的透明溶血环。该型细菌致病性最强,常引起人和动物多种疾病。 丙型()链球菌:呈灰白色细小菌落,在菌落周围无溶血环。一般无致病性。 人类链球菌感染中85%以上由A群链球菌引起,对青霉素G高度敏感,化脓型链球菌:杆菌肽敏感试验阳性。 6.肺炎链球菌:混浊生长,有荚膜(荚膜肿胀试验:阳性),大叶性肺炎。分解菊糖、胆汁溶解试验阳性、Optochin敏感试验阳性与草绿色链球菌鉴别。 肺炎链球菌的鉴定试验:胆汁溶解试验;菊糖发酵试验;动物试验;英膜肿胀试验;optochin敏感试验。 7.肠球菌属:G+,肠球菌属为革兰阳性,成双或短链状排列的卵圆形球菌,无芽胞,无
12、荚膜,部分肠球菌有稀疏鞭毛,营养要求高,需氧及兼性厌氧,触酶阴性,在胆汁七叶苷和含65%Nacl培养基中可以生长,此点可与链球菌鉴别。 8.奈瑟菌属:G-双球菌,无鞭毛,无芽胞,有菌毛。专性需氧,氧化酶阳性。 9.脑膜炎奈瑟菌:流行性脑脊髓膜炎(简称流脑),空气传播,对人致病的主要是A群。氧化酶、触酶试验阳性;分解葡萄糖、麦芽糖产酸不产气。 10.淋病奈瑟菌:不酵解麦芽糖与蔗糖、30%H202试验阳性(与脑膜炎奈瑟菌鉴别)。 11.卡他莫拉菌:社区呼吸道感染的主要病原体之一。 肠杆菌科1.肠杆菌科:均为G-杆菌。均不形成芽胞。多数有周鞭毛(运动),少数菌属细菌可形成荚膜。发酵葡萄糖产酸、产气,
13、触酶阳性。(鉴别肠道致病菌和非致病菌常选用葡萄糖发酵试验)。 菌体(O)抗原,鞭毛(H)抗原和表面抗原(如Vi抗原、K抗原)少数菌属如志贺菌属和克雷伯菌属无鞭毛,无运动能力。 2.大肠埃希菌:俗称大肠杆菌,肠道正常菌群。泌尿系统感染。超广谱-内酰胺酶(ESBLs)的主要产酶株。尿素酶试验阴性,吲哚、甲基红、V-P、枸橼酸盐试验(IMViC),克氏双糖铁琼脂(KIA)上斜面和底层均产酸产气,H2S阴性,动力、吲哚、尿素(MIU)。硝酸盐还原、动力多数阳性。 引起肠道感染的大肠埃希菌有下列五个病原群(1)肠产毒性大肠埃希菌(ETEC):引起霍乱样肠毒素腹泻(水泻);(2)肠致病性大肠埃希菌(EPE
14、C):主要引起婴儿腹泻;(3)肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC):可侵入结肠黏膜上皮,引起痢疾样腹泻(黏液脓血便);(4)肠出血性大肠埃希菌(EHEC):又称产志贺样毒素(VT)大肠埃希氏菌(SLTEC或UTEC),其中O157:H7(常规检测项目)可引起出血性大肠炎和溶血性尿毒综合征(HUS)。临床特征为严重的腹痛、痉挛,反复出血性腹泻,伴发热、呕吐等。严重者可发展为急性肾衰竭;(5)肠黏附性大肠埃希菌(EAggEC):腹泻; 与志贺菌相鉴别:醋酸钠和葡萄糖铵利用试验及粘质酸盐产酸三种试验。大肠埃希菌均为阳性,而志贺菌均为阴性。 3.志贺菌属:痢疾杆菌(细菌性痢疾)。我国以福氏和宋内志贺菌引起的
15、菌痢最常见。强选择鉴别培养基沙门、志贺菌选择培养基(SS);弱选择培养基麦康凯或中国蓝培养基。 分解葡萄糖产酸不产气,不分解乳糖(宋内志贺菌可迟缓分解乳糖),MR试验阳性,只有O抗原而无鞭毛抗原。 4.沙门菌属:无芽胞,无荚膜的革兰阴性直杆菌。有周身鞭毛(除鸡沙门菌外),能运动,多数有菌毛。 5.伤寒沙门菌:产酸不产气。动力、脲酶,氧化酶一,触酶,硝酸盐还原。肥达试验。SR变异(光滑变粗糙,生理盐水中自凝);HO变异(失去鞭毛);相位变异(双相变单相);VW变异(失去Vi抗原)。 肠热症(伤寒与副伤寒病,慢性发热症状),第一、二周采血液,第二、三周采粪便与尿液。整个病程中骨髓分离细菌阳性率较高
16、。) 6.变形杆菌属:迁徙生长。具有尿素酶,可以水解尿素,产生氨7.普通变形杆菌:靛基质和麦芽糖均阳性,鸟氨酸脱羧酶阴性;奇异变形杆菌相反。 外-斐反应:普通变形杆菌OX19、OX2、0Xk的菌体抗原与某些立克次体有共同抗原,是用以诊断某些立克次体病的依据。 8.鼠疫耶尔森菌:鼠疫。两极浓染。“钟乳石”状。2830。KIA结果利用葡萄糖,不利用乳糖,不产H2S,MIU均为阴性反应,丙氨酸脱氨酶试验呈阴性反应即可初步鉴定。 9.小肠结肠炎耶尔森菌:无芽胞,无英膜、25培养时形成周鞭毛,呈翻滚旋转状运动,37培养无动力翻滚旋转状运动。分解葡萄糖和蔗糖产酸不产气,绝大数菌株不发酵乳糖,硫化氢阴性,脲
17、酶阳性,靛基质不定。鸟氨酸脱羧酶阳性,脲酶阳性。 10.假结核耶尔森菌:两端浓染。25培养有周鞭毛,有动力,37培养无动力。 11.肺炎克雷伯菌:医院感染,有荚膜,无鞭毛,无芽胞,G-杆菌。灰白色大而黏的菌落,长丝状。触酶阳性、脲酶阳性。动力和鸟氨酸脱羧酶阴性是本菌的最大特点。易产超广谱-内酰胺酶。对氨苄西林天然耐药。 12.肠杆菌属(阴沟肠杆菌、产气肠杆菌)有周鞭毛,能运动。IMVC:肠杆菌属多为;而大肠埃希菌是。 13.黏质沙雷菌:革兰阴性细小杆菌。沙雷菌具DNA酶和葡萄糖酸盐阳性(与其他菌属细菌的根本区别)。 弧菌科1.弧菌科:G-杆菌。共同特点是一群氧化酶阳性、具有极端鞭毛、动力阳性、
18、发酵葡萄糖。弧菌属极端鞭毛、甘露醇、脂酶、生长需要NaCl、对O129敏感五项为。 2.霍乱弧菌(耐碱不耐酸,pH8.49.2时生长最好)霍乱(米泔水样粪便);副溶血性弧菌(嗜盐性弧菌,无盐不生长,绿色菌落)食物中毒(海产品)。 不染色标本穿梭流星状运动(鱼群状);O1群霍乱弧菌诊断血清,如果原运动活泼的现象停止(为制动试验阳性)。 3.副溶血性弧菌:是一种嗜盐性弧菌。常存在于近海海水、海产品及盐渍食品中。副溶血性弧菌的生化反应培养基需加入30g/LNaCl,本菌在70g/LNaCl培养基中生长,在无盐或100g/LNaCl培养基中不生长。致病因子有黏附因子(主要为菌毛)、毒素(如耐热性溶血素
19、、TDH类毒素),所致疾病为食物中毒及急性胃肠炎,常为被污染的海产品及盐腌制品所引起,此菌尚可引起浅表创伤感染、败血症等。 4.气单胞菌属:在65g/LNaCl中不生长。氧化酶试验阳性可与肠杆菌科细菌鉴别,发酵葡萄糖可与非发酵菌鉴别。 弯曲菌和幽门螺杆菌1.弯曲菌属:是一类微需氧,不分解糖类,氧化酶阳性,菌体弯曲呈逗点状、S形或螺旋状,有动力的革兰阴性菌。 2.幽门螺杆菌:是一类氧化酶和过氧化氢酶均阳性、微需氧、在37能够生长,在25和42均不能生长的革兰阴性弯曲的细菌。 厌氧菌1.厌氧菌:一类是革兰染色阳性有芽胞的厌氧芽胞梭菌(外毒素),另一类是无芽胞的革兰阳性及革兰阴性球菌与杆菌(正常菌群
20、,条件致病性的内源性感染)。气-液相色谱分析。 有芽胞的厌氧菌只有梭菌属;放线菌感染硫黄样颗粒。 常规血培养阴性的细菌心内膜炎、并发脓毒症血栓性静脉炎、伴有黄疸的菌血症等,应考虑可能有厌氧菌感染。厌氧菌标本的采集多采用特殊的采集方法,如针筒抽取等。 2.破伤风梭菌:常见的一种芽胞杆菌,能引起破伤风。当机体受创伤时,破伤风梭菌可侵入伤口生长繁殖,产生外毒素,引起机体强直性痉挛、抽搐,称为破伤风。破伤风梭菌的致病物质主要是外毒素又称痉挛毒素。 3.产气英膜梭菌:临床上气性坏疽病原菌中最多见的一种梭菌,能分解肌肉和结缔组织中的糖,产生大置气体,导致组织严重气肿,继而影响血液供应,造成组织大面积坏死。
21、 4.肉毒梭菌:一种寄生菌,能产生极强的外毒素。在厌氧条件下可产生极其强烈的外毒素一肉毒素。 5.艰难梭菌:梭菌属的一种专性厌氧菌,对氧十分敏感,很难分离培养,故得名。 需氧或兼性厌氧菌1.白喉棒状杆菌:G+,异染颗粒、毒力试验,Elek平板,亚碲酸钾血琼脂。外毒素(毒血症)只有携带-棒状噬菌体的溶原性白喉杆菌才能产生外毒素。 2.炭疽芽胞杆菌:人畜共患病,是致病菌中最大的革兰阳性杆菌,竹节状。倒松树状。(皮毛皮革厂)。串珠试验。 3.蜡样芽胞杆菌:表面粗糙似毛玻璃状或融蜡状。干热120经60分钟才能杀死。 4.产单核李斯特菌:20有动力,37动力缓慢,冷增菌(4)。伞状生长。通过胎盘或产道感
22、染新生儿。本菌常伴随EB病毒引起传染性单核细胞增多症。 分支杆菌1.各型结核杆菌均不发酵糖类,能产生过氧化氢酶,耐热触酶试验、聚山梨酯-80水解试验和耐热磷酸酶试验均为阴性,脲酶试验和中性红试验均为阳性。 2.卡介苗:毒力变异(减弱)保留抗原性。被动人工免疫。 3.麻风分枝杆菌:泡沫状,麻风细胞。 不发酵菌1.不发酵菌:不发酵或不分解糖类的G-无芽胞需氧杆菌。 2.铜绿假单胞菌:无芽胞,无英膜。有13根鞭毛,运动活泼。氧化酶阳性,能氧化分解葡萄糖、木糖,产酸不产气。本菌能利用枸檬酸盐,不产生明除,不产生HS能液化明胶,分解尿素,还原硝酸盐并产生N2,最适温度为35,但在4不生长,此点可与荧光假
23、单胞菌区别 3.不动杆菌属:生物学特征为“三阴”,即氧化酶、硝酸盐还原试验、动力阴性。临床重要的不动杆菌属细菌为醋酸钙不动杆菌、鲍曼不动杆菌和洛菲不动杆菌 4.产碱杆菌属:在含有蛋白胨的肉汤中产氨,可使pH上升至8.6。 5.军团菌属:人工管道的水源中常存在此菌,如医院空调冷却水中常有此菌,对常用化学消毒剂敏感。活性炭-酵母浸出液琼脂。肺部感染。 其他阴性杆菌1.流感嗜血杆菌:G-短小杆菌。加热血平板。(与金葡菌)卫星现象。脑膜炎。荚膜上的多糖抗原被称为M抗原。需要X因子、因子。 2.副流感嗜血杆菌:不需要因子。杜克嗜血杆菌本菌生长需要X因子,不需要因子。 3.杜克嗜血杆菌:可引起软性下疳。
24、4.百日咳鲍特菌:鲍-金培养基。 5.布鲁菌属:人畜共患病,菌血症,波浪热。首选多西环素。 衣原体1.衣原体:是一群体积较小,能通过细菌滤器,细胞内专性寄生,并有独特发育周期的原核细胞型微生物。鸡胚卵黄囊。 原体:为成熟的衣原体。吉姆萨染色呈紫色,Macchiavello染色呈红色。在细胞外较为稳定,无繁殖能力,但有高度感染性。 始体(网状体):吉姆萨染色和Macchiavello染色均呈蓝色。为衣原体发育周期中的繁殖型,代谢活泼,不能自胞外存活,无感染性。 衣原体细胞壁LPS为属特异性补体结合抗原。 2.沙眼衣原体(2SP培养基。碘液染色阳性):沙眼,非淋菌性泌尿生殖道感染(男性常见),性病
25、淋巴肉芽肿。 3.鹦鹉热衣原体:典型临床表现为非典型肺炎 立克次体1.立克次体:是一类严格寄生在细胞内的原核细胞型微生物。菌体内同时含有DNA和RNA。 普氏立克次体常以人的体虱为传播媒介,流行性斑疹伤寒(又称虱传斑疹伤寒)。流行性斑疹伤寒的外斐反应效价在1:160时有诊断意义。 2.莫氏立克次体(斑疹伤寒立克次体,外斐反应):贮存宿主是鼠类,主要传播媒介是鼠蚤或鼠虱,地方性斑疹伤寒(又称鼠型斑疹伤寒)。 3.恙虫病立克次体:通过恙螨幼虫叮咬传给人类,引起恙虫病。贝纳柯克斯体(又称Q热立克次体)引起Q热。 支原体1.支原体:是一类无细胞壁、呈高度多形态性,能通过除菌滤器,在人工培养基上能生长繁
26、殖的最小原核型微生物。革兰染色为阴性。无细胞壁仅有细胞膜是与细菌区别的主要特点。菌落呈“荷包蛋”样。 支原体对青霉素不敏感因为青霉素的作用机制为抑制肽聚糖的合成肽聚糖为细胞壁的组成成分而支原体无细胞壁2.肺炎支原体:酒瓶状。是人类原发性非典型性肺炎的主要病原体之一。补体结合试验(1:641:128为阳性)(检测IgM抗体) 螺旋体1.伯氏疏螺旋体,莱姆病,硬蜱;2.回归热螺旋体,流行性回归热,体虱;3.梅毒螺旋体(镀银染色),梅毒,性传播;4.钩端螺旋体:Fontana镀银染色法染成深褐色。钩体病(人畜共患病及自然疫源性疾病)。发病1周内血液的阳性率高,1周后尿和脑脊液等的阳性率高。 5.梅毒
27、的临床病程分三期: 第一期为硬性下疳,极易传播感染,也适于涂片镜检;第二期即梅毒疹期,全身皮肤黏膜出现皮疹,伴有淋巴结肿大,可累及骨、关节、眼及中枢神经系统;第一、二期称早期梅毒,传染性强,破坏性较小。部分早期梅毒可进一步发展到第三期梅毒,即晚期梅毒。病损部位螺旋体少但破坏性大。严重者可出现心血管和中枢神经系统受损,可危及生命。后天性梅毒表现为反复隐伏发病和再发的特点; 病毒1.噬菌体是病毒;2.流行性感冒病毒:正黏病毒科。血凝素(HA)、神经氨酸酶(NA),划分流感病毒亚型的依据。常用鸡胚接种培养,初次分离接种羊膜腔为最佳,传代适应后可移种尿囊腔。细胞培养一般用原代猴肾细胞(PMK)或犬肾传
28、代细胞(MDCK)。不耐热,对干燥、日光、紫外线以及甲醛、乙醇等均敏感。 3.呼吸道合胞病毒:单负链RNA副黏病毒科不能在鸡胚中增殖,引起婴幼儿下呼吸道疾病的最常见的病毒。最常见的传播途径是经飞沫传染,最易引起婴幼儿细支气管炎和细支气管肺炎包膜上的F蛋白为融合蛋白介导病毒穿入和细胞融合4.麻疹病毒:飞沫直接传播。麻疹疫苗,8月龄接种。 5.肠道病毒:属小RNA病毒科肠道病毒属。由粪-口途径传播。是人类最常见最重要的病毒。脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒、埃可病毒 6.轮状病毒:(秋季腹泻)婴幼儿急性腹泻的主要病因7.流行性乙型脑炎病毒:可通过三带喙库蚊叮咬传播,引起流行性乙型脑炎,简称乙脑。猪为最重
29、要的宿主和传染源。 8.登革病毒:登革热。埃及伊蚊和白纹伊蚊等传播9.巨细胞病毒:猫头鹰眼特征10.甲肝病毒:毛蚶11.乙型肝炎病毒:DNA病毒,其他肝炎病毒均为RNA病毒。 12.狂犬病病毒:嗜酸性包涵体(内基小体)。神经兴奋性增高,恐水病。 13.HPV:只能感染人的皮肤、黏膜的上皮细胞。尖锐湿疣主要由HPV-6引起14.朊病毒(亚病毒,还包括类病毒、卫星病毒)就是蛋白质病毒,是只有蛋白质而没有核酸的病毒。中枢神经系统退化性病变 真菌1.酵母型细胞和菌丝、孢子被染为革兰阳性(深紫色)。 2.假丝酵母菌(俗称念珠菌):出芽繁殖(芽生孢子)。芽管形成试验,假菌丝。沙保弱培养基。玉米粉培养基形成
30、厚膜孢子。 3.新型隐球菌:有荚膜,折光性强。印度墨汁作负染色。尿素酶试验阳性。 4.鉴定曲霉菌常用察氏琼脂。 5.卡氏肺孢菌病:AIDS最常见、最严重的机会感染性疾病。 6.马尔尼菲青霉菌:可引起马尔尼菲青霉病(感染)。 药敏试验1.扩散法(K-B法):选择直径6.35mm,吸水量20l的专用药敏纸片。质控菌株采用标准菌株是进行质控的主要措施,应从可靠的菌种保藏中心索购,金黄色葡萄球菌xxxx23,大肠埃希菌xxxx22,铜绿假单胞菌xxxx53及粪肠球菌xxxx12或xxxx86用于对试验结果进行监测。琼脂稀释法是细菌药敏试验的金标准。释法所测得的某抗菌药物抑制待测菌生长的最低浓度为最低(
31、或最小)抑菌浓度(MIC),稀释法也可测定最小杀菌浓度(MBC)。 质控菌株的一般保存方法是高层琼脂保存是最简单的保存菌种方法将细菌接种于半固体培养基中35培养18-24h封盖1cm厚的无菌石蜡油置4保存最长可保存1年细菌不死亡但性状可能发生变异 2.细菌耐药的机制(1)产-内酰胺酶是细菌对-内酰胺类药物耐药的主要机制。 (2)产生钝化酶如氨基糖苷类钝化酶、氯霉素乙酰转移酶等。 (3)青霉素结合蛋白的改变如MRSA的耐药机制。 (4)药敏作用靶位的改变如核糖体位点的改变引起大环内酯类、林可霉素耐药。 (5)抗菌药物渗透障碍。 3.消毒是去除或杀灭大多数微生物的过程。灭菌是去除或杀灭所有微生物的
32、过程。 寄生虫1.终宿主是指寄生虫的成虫或有性生殖阶段所寄生的宿主。 2.中间宿主是指寄生虫的幼虫或无性生殖阶段所寄生的宿主。 3.寄生虫病的流行:传染源,传播途径,易感人群。 4.寄生虫病的防治原则是:控制传染源;切断传播途径;保护易感者。 5.蠕形住肠线虫又称蛲虫。根据蛲虫在肛周产卵的特性,检查虫卵应在肛门周围皮肤上取材。方法有:夜间肛周查雌虫、粪便中查虫体等。 6.班氏吴策线虫和马来布鲁线虫的形态:成虫:两种丝虫成虫的形态相似,虫体细长如丝线,乳白色,体表光滑;微丝蜘:虫体细长,所以能在毛细血管内自由游动。在新鲜血片上,虫体作蛇样运动。感染期幼虫(丝状坳):虫体细长,尾端乳突。 7.华支
33、睾吸虫成虫虫体狭长、扁平,外形呈葵花籽仁状。虫卵是人体常见蠕虫虫卵中最小者。成虫主要寄生在肝胆管内。 8.布氏姜片吸虫是人体寄生虫卵中最大的一种。在粪便或呕吐物中检到虫体或虫卵即可确诊。 9.卫氏并殖吸虫虫卵内有一个卵细胞和10多个卵黄细胞。 10.卫氏并殖吸虫第一中间宿主为川卷螺,第二中间宿主为淡水溪蟹、石蟹和蛹站等。 11.日本血吸虫成虫:雌雄异体,成虫在宿主体内呈雌雄合抱状态。 12.链状带绦虫的虫卵具放射状条纹,内含一个发育成熟的六钩坳。 13.人是猪带绦虫的唯一终宿主,猪(或人)是中间宿主。 14.牛是肥胖带吻绦虫主要中间宿主。人是牛带绦虫的唯一终宿主,只被成虫寄生。 15.溶组织内
34、阿米巴的生活史基本过程为包囊一滋养体一包囊。 16.黑热病典型的临床表现是长期不规则发热、脾显著肿大、贫血及白细胞、血小板减少,血清球蛋白明显增高。 17.阴道毛滴虫仅有滋养体期而无包囊期,寄生于泌尿生殖道。 18.蓝氏贾第鞭毛虫的病原检查首选粪便检查,方法有生理盐水直接涂片法等。 19.环卵沉淀试验(COPT)是以血吸虫整卵为抗原的特异免疫血清学试验。 补充 1.拟线粒体 中介体2.耐高温耐湿物品灭菌高压蒸汽灭菌法(103.4kPa15-30分钟) 间歇灭菌主要运用于不耐100物品的灭菌 每日一次流通蒸汽加热取出再置37孵箱过夜使残存的芽孢发育成繁殖体次日再通过流通蒸汽加热使之被杀灭 干烤箱
35、杀灭芽胞的条件为1602h3.半固体穿刺保存法应加入的液体石蜡高度约为1cm4.普通光学显微镜其通常使用的自然光或灯光的波长为0.5um5.血清学鉴定 用含有已知特异性抗体的免疫血清(诊断血清)与分离培养的未知纯种细菌或标本中的抗原进行血清学反应以确定病原菌的种或型血清学诊断 用已知细菌的特异性抗原检测患者血清中相应抗体以诊断感染性疾病6.菌种保存 培养后最好在细菌尚未旺盛发育之前取出放冰箱保存链球菌肺炎链球菌可接种于血琼脂斜面保存肠道杆菌葡萄球菌可接种于不含糖的普通琼脂斜面脑膜炎奈瑟菌宜用巧克力斜面保存2天移种一次沙门菌适于保存在鸡蛋斜面霉菌、放线菌及芽胞菌保存2-4个月移种一次酵母菌间隔2
36、个月普通细菌1个月假单胞菌两周穿代一次7.微生物鉴定系统 将全部反应每3项为一组根据反应的次序第一个反应阳性记录1分第二项反应阳性记录2分第三项反应阳性记录4分阴性反应结果均记录0分 8.极端厌氧氧分压为0.05%-0.5%中度厌氧氧分压为2%-8%微需氧5%-10%CO29.不能在人工培养基上生长的微生物衣原体立克次体病毒麻风分支杆菌螺旋体(钩端螺旋体除外)注:支原体是可在无生命培养基上生长的最小的原核生物型微生物 10.人畜共患 鹦鹉热衣原体立克次体红斑丹毒丝菌产单核李斯特布鲁菌炭疽芽胞杆菌11.非淋球菌性尿道炎最常见的病原体为沙眼衣原体沙眼生物型解脲脲原体为第二位12.有芽胞的细菌 炭疽
37、芽胞杆菌(芽胞位于菌体中央小于菌体)蜡样芽胞杆菌(芽胞位于中心或次级端椭圆形)破伤风梭菌(芽胞位于菌体顶端圆形且大于菌体“鼓槌状”)产期荚膜梭菌(芽胞位于中央或次级端椭圆形小于菌体) 肉毒梭菌(芽胞位于次级端卵圆形大于菌体“汤匙状”“网球拍状”)13.无鞭毛动力(-) 嗜血杆菌不动杆菌莫拉菌黄杆菌肺炎克雷伯菌志贺菌耶尔森菌白喉棒状杆菌炭疽芽胞杆菌红斑丹毒丝分支杆菌14.细菌分类方法以细菌的形态和生理生化特征为依据传统分类法和数值分类法以化学分析和核酸分析为依据种系分类/自然分类15.碱性染料电离带正电酸性染料带负电16.脂酶试验主要用于鉴别厌氧芽胞梭菌属的细菌其中产芽胞梭菌、肉毒梭菌和诺维梭菌
38、为阳性其他为阴性17.分离鉴定病原菌时应选择最敏感的动物作实验对象小白鼠对肺链破伤风外毒素敏感豚鼠对结核白喉易感幼猫对金葡菌肠毒素敏感18.无菌动物是经剖宫产取出无论体内或体表均无微生物存在对各种病原体感受性相同体内不含任何抗体悉生动物是指给无菌动物引入已知5-17种正常肠道菌从培育而成的动物近交系动物一般称为纯系动物指采用兄妹交配繁殖20代以上的纯品系动物19.实验室分类分级分类1)一般生物安全防护实验室(不使用实验脊椎动物和昆虫) 2)实验脊椎动物生物安全防护实验室分级根据所处理的微生物的危害程度分为四级一级安全防护要求最低四级最高一级:对健康成年人无已知致病作用的微生物如教学微生物室二级
39、:对人或环境有中等潜在危害的微生物三级:主要通过呼吸道传播引起严重或致死疾病的致病微生物 HIV研究应在三级实验室进行四级:对人体具有高度危险性通过气溶胶传播或传播途径不明的致病微生物20.生物安全柜级生物安全柜:至少装置一个高效空气过滤器净化排气,空气由操作窗吸进去而不可能由操作窗逸出,工作状态时保证工作人员不受侵害但不保证实验对象不受污染级生物安全柜:工作空间为经HEPA净化的无涡流单向流气体,工作状态时既保证工作人员不受侵害,也保证实验对象不受污染级生物安全柜:工作空间为经高效空气过滤器净化的无涡流单向流空气,手套箱内对外界保持负压,确保人体与柜内物品完全隔绝,既可保证工作人员的安全,又
40、可保证实验对象不受污染,可进行挥发性放射性核素及高度危险的实验材料的操作。 22.0.5号麦氏比浊管内含细菌浓度为1.5亿/ml23.丙二酸盐利用试验深蓝色(+)淡绿色(-) 生化糖代谢1、糖的无氧酵解途径是在无氧情况下,葡萄糖分解生成乳酸的过程。它是体内糖代谢最主要的途径;2、糖氧化的主要方式是有氧氧化;3、1分子GLU通过无氧酵解生成2ATP;4、1分子GLU通过有氧氧化生成36/38ATP;5、正常空腹血糖3.896.11mmoll;6、糖异生是指由非糖物质转变为葡萄糖的过程),是体内单糖生物合成的唯一途径。肝脏是糖异生的主要器官,长期饥饿、酸中毒时肾脏的异生作用增强; 7、胰岛素是胰岛
41、细胞分泌的多肽类激素,主要作用有促进细胞摄取葡萄糖;促进糖原合成,减少糖原分解;促进糖氧化和分解,加速糖的利用;促进甘油三酯的合成和储存;阻止糖异生作用。 8、升高血糖浓度的最重要的激素是胰高血糖素。 9、调节血糖浓度的主要激素是胰岛素和胰高血糖素。 10、维持血糖恒定的关键器官是肝脏。 11、1型糖尿病主要指由胰岛细胞破坏而导致内生胰岛素或C肽绝对缺乏,临床上易出现酮症酸中毒。 12、2型糖尿病包括了以前所称NIDDM,即型或成年发病糖尿病,患者多数肥胖。此型不发生胰岛细胞的自身免疫性损伤。很少自发性发生嗣症酸中毒,但可在应激情况下,如感染而诱发。 13、诊断糖尿病1.任意GLU11.1mm
42、ol/L2.空腹GLU7mmol/L(禁食8h)3.OGTT(75g无水葡萄糖),2hGLU11.1mmol/L血糖浓度7.0mmol/l(126mg/dl)称为高血糖症;血糖浓度LD3LD4LD5;LD1主要在心肌,LD5主要在横纹肌,肝脏也有,LD3主要在肝、脾;9、ALTc-ALT(细胞质,30%)、m-ALT(线粒体,70%)1.急性病毒性肝炎:500U;2.慢性活动性肝炎/脂肪肝:ALT轻度升高,ASTALT;3.部分/轻度无黄疸性肝炎ALT升高不明显;4.慢性迁延性肝炎ALT小于参考值的3倍;5.慢活肝ALT大于参考值的3-5倍; AST/ALT(DeRitis比值),参考值:1.
43、15;DeRitis:急性肝炎1;肝硬化2;肝癌3; 9、ALPALP和年龄有关(骨骼生长),妊娠也会升高;含量:肝肾,骨骼及肝胆系统疾病;无黄疸而ALP持续性升高提示肝占位性病变;磷酸对硝基酚(底物)、2-氨基-2-甲基丙醇(缓冲液)405nm处比色; 10、GGT含量:肾前列腺,酗酒增高; 11、AMY流行性腮腺炎、急性胰腺炎升高;405nm处比色ALP、GGT、AMY、ACP;新生儿缺乏,5岁后达成人水平;血清淀粉酶:8-12h开始升高,12-24h达高峰,25d下降至正常。 尿淀粉酶:12-24h升高; 体液平衡1、细胞外液中主要的阳离子是Na+(不吃不排),对维持细胞外液的渗透压、体
44、液的分布和转移起着决定性的作用;细胞外液的主要阴离子以Cl-、HC03-为主;2、细胞内液的主要阳离子是K+(不吃也排)、Mg2+;3、体液摩尔渗透量294-296mOsm/L;4、阴离子隙(AG)是指细胞外液中所测的阳离子总数和阴离子总数之差,即正常人血清Na+、k+之和与HC03-、CI-之和的差值为AG值;AG正常参考值为816mmol/L,平均12mmol/L;5、影响肾脏排钾的主要因素是醛固酮;6、高渗性脱水以水丧失为主,电解质丢失较少,多见于饮水不足;7、低渗性脱水以电解质丢失为主,病因多见于丢失体液时,只给补充水而不补充电解质造成;8、体液酸碱平衡的改变也影响肾脏对钾的排泌,酸中
45、毒时,尿钾增多;碱中毒时,尿钾减少;9、钾钠氯测定方法中,目前所有离子检测最为简便准确的是离子选择电极法;10、低Na血症135mmol/L;高Na血症145mmol/L;11、低钾3.5mmol/L;高钾5.5mmol/L;12、AB=SB正常,代碱未代偿。ABSB,呼酸或代碱。ABSB,呼碱或代酸。 13、人体PH:7.35-7.4514、BB:缓冲总碱,包括HCO3PrHb15、BE:1L的血液滴定至7.4所需的酸或碱量,用酸滴定+号,参考值3mmol/L16、血气分析:用肝素抗凝,如30min不能检测,将标本放在4中,2h 钙、磷、镁1、钙盐和磷酸盐是人体含量最高的无机盐,约99%的钙和86%以上的磷存在于骨骼和牙齿中。 2、钙降低肌肉兴奋性,引起肌肉收缩,CaP=30-40;3、肠管的ph可明显地影响钙的吸收,偏碱时减少钙的吸收,偏酸时促进吸收4、镁主要存在于细胞内,是细胞内含量仅次于钾的阳离子。 5、长期丢失消化液(如消化道造瘘)是缺镁的主要原因。肾是镁
限制150内