高中生物竞赛微生物学全套资料.docx
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1、第一章 绪论第二章 微生物类群及形态构造第三章 微生物的纯培育和显微技术第四章 微生物的养分第五章 微生物的代谢第六章 微生物的生长繁殖及其限制第七章 病毒第八章 微生物的遗传第九章 微生物生态第十章 感染及免疫第一章 绪论一 、 微生物学定义: 探讨微生物在确定条件下的形态构造,生理生化,遗传变异以及微生物的进化,分类,生态等生命活动规律及其应用的一门科学。微生物1微生物及我们微生物无处不在,我们无时不生活在“微生物的海洋中。细菌数亿/g土壤,土壤中的细菌总重量估计为:10034 10 12 吨;每张纸币带细菌:900万个人体体表及体内存在大量的微生物:皮肤外表:平均10万个细菌/平方厘米;
2、口腔:细菌种类超过500种;肠道:微生物总量达100万亿,粪便干重的1/3是细菌,每克粪便的细菌总数为:1000亿个;每个喷嚏的飞沫含4500-150000个细菌,重感冒患者为8500万少数微生物也是人类的敌人!鼠疫;天花;艾滋病;疯牛病;埃博拉病毒;可以说,微生物及人类关系的重要性,你怎么强调都不过分,微生物是一把特别锐利的双刃剑,它们在给人类带来宏大利益的同时也带来“残忍的破坏。它给人类带来的利益不仅是享受,而且事实上涉及到人类的生存。 微生物的特点: 1体积小, 面积大:测量单位:微米或钠米 杆菌的平均长度:2 微米;1500个杆菌首尾相连= 一粒芝麻的长度;10-100亿个细菌加起来重
3、量 = 1毫克; 面积/体积比:人 = 1,大肠杆菌 = 30万; 这样大的比外表积特殊有利于它们和四周环境进展物质、能量、信息的交换。微生物的其它很多属性都和这一特点亲密相关。细小药丸豌豆60660cm26cm21031分子60,000,0006000 1021大分子6,000,000600 10180.01 m大胶粒600,00060 10150.1 m球菌60,00061012m变形虫6,0006000cm2109滑石粉粒600600cm2106近似对象比面值总外表积立方体数边长 对1cm3固体做10倍系列三维分割后的比面值变更2汲取多 ,转化快:微生物获得养分的方式多种多样,其食谱之广
4、是动植物完全无法相比的!纤维素、木质素、几丁质、角蛋白、石油、甲醇、甲烷、自然气、塑料、酚类、氰化物、各种有机物均可被微生物作为粮食一头500 kg的食用公牛,24小时消费 0.5 kg蛋白质,而同样重量的酵母菌,以质量较次的糖液如糖蜜和氨水为原料,24小时可以消费 50000 kg优质蛋白质3生长旺,繁殖快大肠杆菌一个细胞重约10 12 克,平均20分钟繁殖一代24小时后: 4722366500万亿个后代,重量到达:4722吨48小时后:2.2 10 43个后代,重量到达2.2 10 25 吨相当于4000个地球的重量!4适应强,易变异:抗热:有的细菌能在265个大气压,250 的条件下生长
5、;自然界中细菌生长的最高温度可以到达113 ;有些细菌的芽孢,需加热煮沸8小时才被杀死;抗寒:有些微生物可以在12 30的低温生长;抗酸碱:细菌能耐受并生长的pH范围:pH 0.5 13耐浸透压:蜜饯、腌制品,饱和盐水NaCl, 32%)中都有微生物生长;抗压力:有些细菌可在1400个大气压下生长个体小、构造简、且多及外界环境干脆接触繁殖快、 数量多突变率:10-5 10-10短时间内产生大量的变异后代。 5分布广,种类多:6起源早,发觉晚:38亿年前,生命在海洋中出现300多年前人们才真正发觉微生物的存在26亿年前,陆地上就可能存在微生物,虽然目前已定种的微生物只有大约10万种,远较动植物为
6、少,但一般认为目前为人类所发觉的微生物还不到自然界中微生物总数的1%级界宽7休眠长 Wittaker(1969): 五界系统Woes(1977,1990): 三原界分类系统,包括细菌,古生菌,真核生物4.内容及分科 工业微生物学农业微生物学医学微生物学药学微生物学兽医微生物学食品微生物学预防微生物学 微生物学根底微生物学 应用微生物学 按过程或功能分按与疾病的关系分按生态环境分按技术与工艺分 按应用范围分细菌学真菌学病毒学菌物学原生动物学藻类学 免疫学 医学微生物学 流行病学分析微生物学 微生物学技术学 发酵微生物学 遗传工程微生物学分类微生物生理学微生物遗传学微生物生态学 分子微生物学 细胞
7、微生物学 微生物基因组学土壤微生物学海洋微生物学环境微生物学 水微生物学 宇宙微生物学按微生物种类分二、微生物的发觉和微生物学的建立和开展一微生物的发觉:我国8000年前就开始出现了曲蘖酿酒,;制酱,醋4000年前埃及人已学会烘制面包和酿制果酒; 2500年前创建酿酱、醋,用曲治消化道疾病; 公元六世纪(北魏时期)贾思勰的巨著“齐民要术; 公元2世纪,张仲景:禁食病死兽类的肉和不清洁食物; 公元前112年-212年间,华佗:“割腐肉以防传染; 公元九世纪痘浆法、痘衣法预防天花; 1346年,克里米亚半岛上的法卡城之战(靼坦人-罗马人); 16世纪,古罗巴医生:疾病是由肉眼看不见的生物(livi
8、ng creatures)引起的;1641年,明末医生吴又可也提出“戾气学说 显微镜的创建:列文虎克荷兰:1664年,英国人虎克Robert Hooke曾用原始的显微镜对生长在皮革外表及蔷薇枯叶上的霉菌进展视察,首次看见并描绘微生物:1676年,微生物学的先驱荷兰人列文虎克Antony van leeuwenhoek首次视察到了细菌。他没有上过高校,是一个只会荷兰语的小商人,但却在1680年被选为英国皇家学会的会员。列文虎克利用业余时间制造过400多架单式显微镜和放大镜,放大率一般为50200倍。 1、开展过程史前期初创期:列文虎克 、显微镜奠基期开展期成熟期二微生物学的建立和开展 2、微生物
9、学的奠基法国人巴斯德Louis Pasteur18221895(1) 发觉并证明发酵是由微生物引起的;(2) 彻底否认了“自然发生学说;闻名的曲颈瓶试验无可辩驳地证明,空气内的确含有微生物,是它们引起有机质的腐败。(3) 免疫学预防接种首次制成狂犬疫苗(4)其他奉献巴斯德消毒法:6065作短时间加热处理,杀死有害微生物德国人柯赫Robert Koch18431910 1微生物学根本操作技术方面的奉献a细菌纯培育方法的建立土豆切面 养分明胶 养分琼脂平皿b设计了各种培育基,实现了在试验室内对各种微生物的培育c流淌蒸汽灭菌2对病原细菌的探讨作出了突出的奉献:a具体证明了炭疽杆菌是炭疽病的病原菌b发
10、觉了肺结核病的病原菌;1905年获诺贝尔奖c证明某种微生物是否为某种疾病病原体的根本原那么 闻名的柯赫原那么柯赫原那么1、 在每一一样病例中都出现这种微生物;2 、要从寄主别离出这样的微生物并在培育基中培育出来;3、用这种微生物的纯培育接种安康而敏感的寄主,同样的疾病会 重复发生;4 、从试验发病的寄主中能再度别离培育出这种微生物来。3、微生物学开展过程中的重大事务1890 Von Behring制备抗毒素治疗白喉和破伤风1892 Ivanovsky 供应烟草花叶病毒是由病毒引起的证据;1928 Griffith发觉细菌转化;对其机理的探讨导致DNA是遗传物质的确证;外源遗传物质导入各种细胞的
11、基因重组技术的建立;1929 Fleming 发觉青霉素;1944 Avery等证明转化过程中DNA是遗传信息的载体;1953 Watson和Crick提出DNA双螺旋构造;19701972 Arber、Smith和Nathans发觉并提纯了DNA限制性内切酶1977 Woese提出古生菌是不同于细菌和真核生物的特殊类群 Sanger首次对f174噬菌体DNA进展了全序列分析;19821983 Prusiner发觉朊病毒(prion);19831984 Mullis 建立PCR技术;1995 第一个独立生活的细菌(流感嗜血杆菌)全基团组序列测定完成;1996 第一个自养生活的古生菌基因组测定完
12、成 1997 第一个真核生物(啤酒酵母)基因组测序完成 4、20世纪的微生物学十九世纪末到二十世纪中期:微生物学:鉴定病原菌、探讨免疫学及其在预防疾病中的作用、找寻化学治疗药物、分析微生物的化学活性。一般生物学:细胞的构造及其在繁殖和开展中的作用、植物和动物的遗传和进化的机制。 20世纪40年头后,微生物自身的特点使其成为生物学探讨的“明星,微生物学很快及生物学主流集合,并被推到了整个生命科学开展的前沿,获得了快速的开展,在生命科学的开展中作出了宏大的奉献。微生物学及生物学开展的主流集合、穿插,获得了全面、深化的开展5、21世纪微生物学展望及其他学科实现更广泛的穿插,获得新的开展学科穿插恒久是
13、科学创新的源泉!微生物基因组的序列测定和分析;微生物的快速检定;微量热技术对生命过程的探讨计算机技术及微生物学的结合。三、 微生物学对生命科学的促进1. 多学科穿插促进微生物学的全面开展2. 促进重大理论问题的打破3. 对生命科学探讨技术的奉献4. 微生物及人类基因组方案生命科学根底理论:分子遗传学,分子生物学探讨技术:动植物细胞培育 ,组织培育基因组方案:形式生物真核生物,酵母菌四、我国微生物学界面临的机遇和挑战生物工程学遗传工程主导细胞工程微生物工程发酵工程根底酶工程生物反响器工程获得工程菌工程细胞柱医学工业农业获得产品思 考 题: 试根据微生物的特点,谈谈为什么说微生物既是人类的敌人,更
14、是人类的挚友。 为什么说巴斯德和柯赫是微生物学的真正奠基人?第二章 微生物的纯培育和显微技术微生物的根本特点:小! 在绝大多数状况下都是利用微生物的群体来探讨其属性;微生物的物种菌株一般也是以群体的形式进展繁衍、保存;培育技术在微生物学中具有重要意义!几个概念:培育物:微生物学中,在人为规定的条件下培育繁殖得到的微生物群体称为培育物。混合培育物:含有多种微生物的培育物;纯培育物:只有一种微生物的培育物;纯培育技术是进展微生物学探讨的根底微生物个体微小的特点确定了显微技术是进展微生物探讨的一项重要技术,因为绝大多数微生物的个体形态及其内部构造只能通过显微镜才能进展视察和探讨。第一节 微生物的别离
15、和纯培育从混杂的群体中别离特定的某一种微生物,是探讨和利用微生物的第一步。一、无菌技术用于别离、培育微生物的器具事先不含任何微生物;在转接、培育微生物时防止其它微生物的污染。1、微生物培育的常用器具及其灭菌常用的器具:试管、瓶子、培育皿等常用的灭菌方法:高压蒸汽灭菌 高温干热灭菌2、接种操作:无菌操作。 二、别离纯培育 培育基:液体培育基;固体培育基; 半固体培育基; 1、用固体培育基别离纯培育菌落colony:单个微生物在相宜的培育基外表或内部生长、繁殖到 确定程度可以形成肉眼可见的、有一 定形态构造的子细胞生 长群体。菌苔(lawn):当固体培育基外表众多菌落连成一片时便成为菌苔。固体培育
16、基别离方法 不同微生物在特定培育基上生长形成的菌落或菌苔一般都具有稳定的特征形态、颜色等,可以成为对该微生物进展分类、鉴定的重要根据。同一细菌在不同的培育基平板上形成不同特征的菌落。固体培育基别离方法包括:稀释倒平板涂布平板法平板划线法厌氧微生物别离-稀释摇管法菌落的培育特征2、 液体培育基别离方法-稀释法稀释法进展液体别离必需在同一个稀释度的很多平行试管中,大多数一般应超过95%表现为不生长。例如:假设同一稀释度的试管中有95%表现为不生长,那么生长的试管中仅含一个细胞的几率为:4.8%; 含二个细胞的几率为:0.12%; 含三个细胞的几率为:0.002%在有细菌生长的试管中得到纯培育的几率
17、为97.5%3、单细胞孢子别离一般采纳显微操作仪,在显微镜下进展t 操作难度及细胞或个体的大小成反比t 单细胞单孢子别离:可以实行显微别离法从混杂 群体中干脆别离单个细胞或单个个体进展培育以获得纯培育4、选择培育别离用于微生物群落中数量占少数的微生物的别离纯化:原理:抑制大多数其它微生物的生长;使待别离的微生物生长更快;使待别离的微生物在群落中的数量上升;使待别离的微生物生长“突出,干脆挑取待别离的微生物的菌落获得纯培育。 1 利用选择平板进展干脆别离:根据微生物的特点选择不同的培育条件,使待别离的微生物生长,其它微生物的生长被抑制,或使待别离的微生物的生长特征明显不同于其它微生物。t 高温下
18、培育:别离嗜热细菌;t 培育基中不含N:别离固氮菌;t 培育基加抗生素:别离抗性菌; t 牛奶平板:别离蛋白酶产生菌;t 颜色反响:别离特定的菌株;t 利用特定细菌的滑动特点进展别离纯化;2 富集培育:利用不同微生物间生命活动特点的不同,制定特定的环境条件,使 仅适应于该条件的微生物旺盛生长,待别离微生物在群落中的数量大大增加,从自然界中别离到所需的特定微生物。 富集培育过程利用该方法,可根据微生物的特殊要求,从自然界别离出特定微生物种类,别离培育在特定环境中能生长的微生物;三、二元培育物培育物中只含有二种微生物,而且是有意识地保持二者之间的特定关系的培育物称为二元培育物。如:病毒和宿主细胞;
19、纤毛虫、变形虫和粘细菌。第二节 显微镜和显微技术几个根本概念:放大:被视察物越小,放大倍数应越大,否那么难以看清! 辨别率:能区分两点之间最小间隔 的实力 反差:被视察物区分于背景的程度及显微镜的自身特点有关,但也取决于进展显微视察时对显微镜的正确运用及良好的标本制作和视察技术,这就是显微技术。一、显微镜的种类及原理1. 一般光学显微镜光学显微镜一般配置的最大放大倍数是多少?为什么?目镜:10 15 ;物镜: 100 ;总放大倍数10001500 ;如何实现光学显微镜一般配置的最大放大倍数?其原理?运用油镜,即在100 物镜和载玻片之间滴加香柏油; 辨别率最小可辨别间隔 = /n sin为物镜
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