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1、周德庆版微生物学复习资料绪 论1, 名词说明:微生物,微生物学,种,菌株, 品系, 克隆,菌落,菌苔。微生物: 微生物是形体微小, 单细胞或个体结构简洁的多细胞, 甚或无细胞结构,用肉眼看不见或看不清的低等生物的总称。微生物学: 微生物学是一门在细胞, 分子或群体水平上探讨微生物的形态构造, 生理代谢, 遗传变异, 生态分布与分类进化等生命活动基本规律,并将其应用于工业发酵, 医药卫生, 生物工程与环境爱惜等实践领域的科学,其根本任务是发掘, 利用, 改善与爱惜有益微生物,限制, 歼灭或改造有害微生物,为人类社会的进步服务。种:种是最基本的分类单位,它是一大群表型特征高度相像,亲缘关系极其相近
2、,与同属内其它种有着明显差异的菌株的总称。菌株(品系):表示任何由一个独立分别的单细胞繁殖而成的纯种群体极其一切后代;事实上是一个微生物达到遗传性纯的标记。 克隆:若菌落是由一个单细胞发展而来的,则它就是一个纯种细胞群或克隆。菌落:在适宜的培育条件下,微生物在固体培育基表面(有时为内部)生长繁殖,形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见的, 有确定形态构造的子细胞集团,这就是菌落。菌苔:假如将某一纯种的大量细胞密集地接种到固体培育基表面,结果长成的各“菌落”相互连成一片,这就是菌苔。2, 简述微生物学发展史上5个时期的特点与代表人物。史前期朦胧阶段(约8000年前-1676)特点:人们虽然没有看到微生
3、物,但已经不自觉的利用有益微生物, 防止有害微生物。中国古代:初创期-形态学时期(1676-1861)特点:这一时期微生物学的探讨工作主要是对一些微生物进行形态描述。代表人物列文虎克:微生物学的先驱者奠基期-生理学时期(1861-1897)特点:这一时期的主要工作是查找各种病原微生物,把微生物学的探讨从形态描述推动到生理学探讨的新水平,建立了系列微生物学的分支学科。代表人物:巴斯德与科赫。发展期生化水平探讨阶段特点:微生物学的探讨进入分子水平,微生物学家的探讨工作从上一时期的查找病原微生物转移到找寻各种有益微生物的代谢产物。代表人物E.Bchner生物化学奠基人成熟期分子生物学水平探讨阶段特点
4、:微生物学从一门应用学科发展为前沿基础学科,其探讨工作进入分子水平,而微生物因其不同于高等动植物的生物学特性而成为分子生物学探讨的主要对象。在应用探讨方面,向着更自觉, 更有效与可认为限制的方向发展,与遗传工程, 细胞工程与酶工程紧密结合,成为新兴生物工程的主角。 代表人物J.Watson与F.Crick:分子生物学奠基人3, 微生物共有哪五大共性?其中最基本的是哪一个?为什么? 五大共性:体积小,面积大;吸取多,转化快;生长旺,繁殖快;适应强,易变异;分布广,种类多。其中最基本的是体积小,面积大;缘由:由于微生物是一个如此突出的小体积大面积系统,从而赐予它们具有不同于一切大生物的五大共性,因
5、为一个小体积大面积系统,必定有一个巨大的养分物质吸取面, 代谢废物的排泄面与环境信息的交换面,并由此而产生其余4个共性。4, 微生物分类学有哪3项详细任务?试加以简述。3项详细任务:分类, 鉴定与命名分类的任务是解决从个别到一般或从详细到抽象的问题,亦即通过收集大量描述有关个体的文献资料,经过科学的归纳与理性的思索,整理成一个科学的分类系统鉴定的任务与分类恰恰相反,它是一个从一般到特殊或从抽象到详细的过程,亦即通过详细视察与描述一个未知纯种微生物的各种性状特征,然后查找现成的分类系统,以达到对其知类, 辨名的目的。命名的任务是为一个新发觉的微生物确定一个新学名,亦即当你详细视察与描述某一详细菌
6、种后,经过细致查找现有的权威性分类鉴定手册,发觉这是一个以往从未记载过的新种,这时,就得按微生物的国际命名法规赐予一个新学名。5, 种以上的分类单元分几级?界,门,纲,目,科,属,种七级6, 何谓三域学说?20世纪70年头末由美国伊利诺斯高校的C.R.Woese等人对大量微生物与其他生物进行16S与18S rRNA的寡聚核苷酸测序,并比较其同源性水平后,提出了一个与以往各种界级分类不同的新系统,称为三域学说。三域指细菌域, 古生菌域与真核生物域。7, 何谓(G+C)mol% 值?它在微生物分类鉴定中有何应用?表示DNA分子中鸟嘌呤(G)与胞嘧啶(C)所占的摩尔百分比值。应用: 判别种与种之间亲
7、缘关系相近程度;是建立新分类单元时的重要指标。 第一章 原核微生物的形态, 构造与功能1, 名词说明:原核生物,细菌,缼壁细菌,原生质体,芽孢,伴孢晶体,放线菌.原核生物:即广义的细菌,指一大类细胞核无核膜包袱,只存在称作核区的袒露DNA的原始单细胞生物,包括真细菌与古生菌两大类群。细菌:是一类细胞细短, 结构简洁, 胞壁坚韧, 多以二分裂方式繁殖与水生性较强的原核生物。缼壁细菌:指细胞壁缺乏或缺损的细菌。包括原生质体, 球状体, L型细菌与支原体。原生质体:人工条件下用溶菌酶除去细胞壁或用青霉素抑制细胞壁合成后,所留下的仅由一层细胞膜包袱的圆球状细胞。一般由G+形成。芽孢:某些细菌在生长发育
8、后期,可在细胞内形成一个圆形或椭圆形的抗逆性休眠体,称为芽孢(又称内生孢子)。 伴孢晶体:少数芽孢杆菌在形成芽孢的同时,会在芽孢旁形成一颗菱形, 方形或不规则形的碱溶性蛋白质晶体,称为伴孢晶体(即内毒素)。放线菌:是一类呈丝状生长, 菌落呈放射状, 以孢子繁殖的陆生性较强的革兰氏阳性菌。2, 细菌的基本有哪些?细胞壁,细胞膜 ,间体 ,核区 ,核糖体 ,细胞质与其内含物3, 图示细菌细胞构造。见书11页4, 试比较G+与G-细菌细胞壁的异同。成 分 革兰氏阳性细菌 革兰氏阴性细菌 肽聚糖磷壁酸类脂质蛋白质 含量很高(30-95)含量较高(50)一般无(2)0 含量很低(520)0含量较高(约2
9、0)含量较高 5, 简述革兰氏染色法的机制并说明此法的重要性。革兰氏染色机制结晶紫液初染与碘液媒染:在细菌的细胞膜内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。乙醇脱色: G细胞壁较厚, 肽聚糖网层次多与交联致密且不含类脂 ,把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内,使其保持紫色; G-细胞壁薄, 外膜层类脂含量高, 肽聚糖层薄与文联度差,结晶紫与碘复合物的溶出,细胞退成无色。 复染: G-细菌呈现红色,而G+细菌则仍保留最初的紫色。重要性: 革兰氏染色有着特别重要的理论与实践意义。通过这一染色,几乎可把全部的细菌分成革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌两个大类,因此它是分类鉴定菌种时的重要指标。又由于这两大类细菌在细
10、胞结构, 成分, 形态, 生理, 生化, 遗传, 免疫, 生态与药物敏感性等方面都呈现出明显的差异,因此任何细菌只要通过简洁的革兰氏染色,就可供应不少其他重要的生物学特性方面的信息。6, 渗透调整皮层膨胀学说是如何说明芽孢的耐热机制的?芽孢的耐热在于芽孢衣对多价阳离子与水分的渗透很差以与皮层的离子强度很高,这就使皮层产生了极高的渗透压去夺取芽孢核欣中的水分,其结果造成皮层的充分膨胀与核心的高度失水,正是这种失水的核心才赐予了芽孢极强的耐热性。7, 简述链霉菌形态构造特点。1, 基内菌丝:又称养分菌丝,是紧贴固体培育基表面并向培育基里面生长的菌丝。色浅, 较细,其主要功能是吸取养分物与排泄代谢产
11、物,一般没有隔膜。有的产生色素。 2, 气生菌丝:养分菌丝发育到确定阶段,伸向空间形成气生菌丝,色较深, 直径较粗,直形或弯曲状而分枝,有的产生色素。第二章 真核微生物的形态, 构造与功能1, 名词说明:真核微生物,酵母菌,生活史,霉菌,无性孢子,有性孢子,子实体, 真核微生物:是指一大类有完整细胞核, 结构精致的染色体与多种细胞器的微生物。酵母菌:非分类名词,一群能发酵糖类的单细胞微生物,属真菌类。生活史 :个体经一系列生长, 发育阶段后而产生下一代个体的全部过程,就称为该生物的生活史或生命周期。霉菌:(非分类名词)丝状真菌统称,通常指菌丝体发达而又不产生大型子实体的真菌。无性孢子:不经过两
12、性细胞结合而干脆由菌丝分化形成的繁殖性小体。有性孢子:指经过两性细胞结合,经质配, 核配, 减数分裂形成的繁殖小体。子实体:是由真菌的养分菌丝与生殖菌丝缠结而成的具有确定形态的产孢结构。2, 简述真菌的特点。 不能进行光合作用; 以产生大量孢子进行繁殖; 一般具有发达的菌丝体; 细胞壁多数含几丁质; 养分方式为异养吸取型; 陆生性较强。3, 简述酵母菌的特点。(1)生活史中,个体主要以单细胞状态存在;(2)多数营出芽繁殖,也有的裂殖;(3)能发酵糖类产能;(4)细胞壁常含甘露聚糖;(5)喜在含糖量较高, 酸度较大的水生环境中生长。4, 图示酵母菌细胞构造,并指出其细胞壁的结构特点。细胞结构:
13、见书48页细胞壁的结构特点:(1)化学组成:三明治状的“酵母纤维素”:分三层,外层为甘露糖,内层为葡聚糖,其间夹有一层蛋白质分子。芽痕四周有少许几丁质。(2)原生质体的制备:用蜗牛消化酶水解细胞壁。(注:其结构特点可能不完善)5, 简述酵母菌的繁殖方式,图示酿酒酵母的生活史 并说明各阶段的特点。繁殖方式:无性繁殖:芽殖 裂殖 产生掷孢子等无性孢子有性繁殖产生子囊与子囊孢子生活史:见书51页各阶段的特点:子囊孢子发芽产生单倍体养分细胞单倍体养分细胞出芽繁殖异性养分细胞接合,质配核配,形成二倍体细胞二倍体养分细胞不进行核分裂,出芽繁殖二倍体细胞变成子囊,减数分裂,形成4子囊孢子子囊破壁后释放出单倍
14、体子囊孢子6, 霉菌的有性与无性孢子主要有哪些?无性孢子有:厚垣孢子, 节孢子, 分生孢子, 孢囊孢子, 游动孢子, 芽孢子, 掷孢子。有性孢子有:卵孢子, 接合孢子, 子囊孢子, 担孢子。7, 细菌, 放线菌, 酵母菌, 霉菌四大类微生物的菌落有何不同?为什么?菌落 细菌 酵母菌 放线菌 霉菌 含水形态 很湿或较湿 较湿 干燥或较干燥 干燥 外观形态 小而突起或大而平坦 大而突起 小而紧密 大而疏松或大而致密 菌落透亮度 透亮或稍透亮 稍透亮 不透亮 不透亮 菌落与培育基结合程度 不结合 不结合 坚实结合 较坚实结合 菌落颜色 多样 单调,一般呈乳脂或矿烛色,少数红色或黑色 特别多样 特别多
15、样 菌落正反面颜色的差别 相同 相同 一般不同 一般不同 菌落边缘 一般看不到细胞 可见球状,卵圆状或假丝状细胞 有时可见细丝状细胞 可见粗丝状细胞 气味 一般有臭味 多带酒香味 带有泥腥味 往往有霉味 缘由:因为细菌, 放线菌, 酵母菌与霉菌的形态与生理类型不尽相同,所以在其菌落形态,构造等特征上也有各自的特点。8, 试比较细菌, 放线菌, 酵母菌与霉菌细胞壁成分的 异同,并探讨它们原生质体制备方法。细胞壁成分的异同细菌分为G+与G-,G+肽聚糖含量高,G-含量低;G+磷壁酸含量较高,而G-不含磷壁酸;G+类脂质一般无,而G-含量较高;G+不含蛋白质,G-含量较高。放线菌为G-,其细胞壁具有
16、G-所具有的特点。酵母菌与霉菌为真菌,酵母菌的细胞壁外层为甘露聚糖,内层为葡聚糖;而霉菌的细胞壁成分为几丁质, 蛋白质, 葡聚糖。原生质体制备方法:G+菌原生质体获得:青霉素, 溶菌酶 G-菌原生质体获得:EDTA鳌合剂处理,溶菌酶 放线菌 原生质体获得:青霉素, 溶菌酶霉菌原生质体获得:纤维素酶酵母菌原生质体获得:蜗牛消化酶13, 什么叫锁状联合?其生理意义如何?锁状联合: 担子菌亚门中多数担子菌的双核菌丝,在进行细胞分裂时,于菌丝的分隔处形成的一个侧生的喙状结构称锁状联合。生理意义:保证了双核菌丝在进行细胞分裂时,每节(每个细胞)都能含有两个异质(遗传型不同)的核,为进行有性生殖,通过核配
17、形成担子打下基础。锁状联合是双核菌丝的鉴定标准,凡是产生锁状联合的菌丝均可断定为双核。锁状联合也是担子菌亚门的明显特征之一。14, 霉菌的养分菌丝与气生菌丝各有何特点?它们分别可分化出哪些特化结构?1) 养分菌丝体:伸入培育基吸取养分;2) 气生菌丝体:向空中生成,形成繁殖器官。养分菌丝的特化结构:假根吸器附着枝附着胞菌核菌索匍匐菌丝菌环与菌网气生菌丝的特化结构:子实体第三章 病毒与亚病毒1, 名词说明:病毒,真病毒,亚病毒,噬菌斑,烈性噬菌体,温与噬菌体,溶原菌,溶原性。病毒:是超显微的,无细胞结构,专性活细胞内寄生,在活细胞外具一般化学大分子特征,一旦进入宿主细胞又具有生命特征。真病毒:至
18、少含有核酸与蛋白质两种组分的病毒亚病毒:凡在核酸与蛋白质两种成分中,只含其中之一的分子病原体称为亚病毒噬菌斑:当一个噬菌体感染一个敏感细胞后,隔不久即释放出一群子代噬菌体,在固体培育基中,它们通过琼脂层的扩散又侵染四周的宿主细胞,并引起它们的裂解,如此经过多次重复,就出现了一个由多数噬菌体粒子构成的群体噬菌斑,它是透亮不长菌的小圆斑,每一个噬菌斑是由一个噬菌体粒子形成的。烈性噬菌体:凡在短时间内能连续完成吸附, 侵入, 增殖, 成熟, 裂解这五个阶段而实现其繁殖的噬菌体,称为烈性噬菌体。温与性噬菌体:噬菌体侵染宿主后,并不增殖,裂解,而与宿主DNA结合,随宿主DNA复制而复制,此时细胞中找不到
19、形态上可见的噬菌体,这种噬菌体称为温与性噬菌体或溶源噬菌体。溶原菌:含有温与性噬菌体的细菌称为溶源性细菌。溶源性噬菌体附着或整合在宿主染色体上,一道复制。 2, 病毒粒有哪几种对称体制?每种对称又有几类特殊外形?螺旋对称型TMV 呈直杆状,中空二十面体对称腺病毒 外形呈典型的二十面体复合对称T偶数噬菌体 呈蝌蚪状3, 什么叫烈性噬菌体?简述其裂解性生活史。 烈性噬菌体:凡在短时间内能连续完成吸附, 侵入, 增殖, 成熟, 裂解这五个阶段而实现其繁殖的噬菌体,称为烈性噬菌体。吸附 噬菌体尾丝散开,固着于特异性受点上。侵入 尾鞘收缩,尾管推出并插入到细胞壁与膜中,头部的核酸注入到宿主细胞中,而蛋白
20、质衣壳留在细胞壁外。 增殖 增殖过程包括核酸的复制与蛋白质的生物合成。注入细胞的核酸操纵宿主细胞代谢机构,以寄主个体与细胞降解物与培育基介质为原料,大量复制噬菌体核酸,并合成蛋白质外壳。成熟(装配)寄主细胞合成噬菌体壳体(T4噬菌体包括头部, 尾部),并组装成完整的噬菌体粒子。裂解(释放)子代噬菌体成熟后,脂肪酶与溶菌酶促进宿主细胞裂解,从而释放出大量子代噬菌体。4, 什么是一步生长曲线?它可分几期?各期有何特点?一步生长曲线 : 定量描述烈性噬菌体增殖规律的试验曲线称作一步生长曲线或一级生长曲线。潜藏期 从噬菌体吸附细菌细胞至细菌细胞释放出新的噬菌体的最短时间。又可分为隐晦期与胞内累积期。裂
21、解期 从被感染的第一个细胞裂解至最终一个细胞裂解完毕所阅历的时间。平稳期 指被感染的宿主已全部裂解,溶液中噬菌体数达到最高点后的时期。 裂解量 每个被感染的细菌释放新的噬菌体的平均数第四章 微生物的养分与培育基1, 名词说明:自养微生物,异养微生物,养分,养分物,C/N,氨基酸自养型生物,氨基酸异养型生物,生长因子,大量元素,微量元素,培育基。自养微生物:以二氧化碳作为主要或唯一的碳源,以无机氮化物作为氮源,通过细菌光合作用或化能合成作用获得的能量的微生物。异养微生物:以有机物为碳源,光或有机物分解为能源的微生物。养分:指生物体从外部环境摄取其生命活动所必需的能量与物质,以满足其生长与繁殖须要
22、的一种生理功能 。 养分物:能为机体生命活动供应结构物质, 能量, 代谢调整物质与良好的生理环境的物质称为养分物。C/N比:所谓C/N是指在微生物培育基中所含的碳源中碳原子的摩尔数与氮源中氮原子的摩尔数之比。氨基酸自养型生物:不须要氨基酸作为氮源的,它们能把非氨基酸类的简洁氮源自行合成所须要的一切氨基酸。氨基酸异养型生物:须要从外界吸取现成的氨基酸作氮源。生长因子:一类对微生物正常代谢必不行少且又不能从简洁的碳, 氮源自行合成的所需极微量的有机物。大量元素:凡是生长所需浓度在10-310-4mol/L范围内的元素,可称为大量元素,包括P, S, K, Mg, Ca, Na与Fe等。微量元素:凡
23、是生长所需浓度在10-610-8mol/L范围内的元素,则称为微量元素,包括Cu, Zn, Mn, Mo, 与Co等。培育基:是一种人工配制的适合微生物生长繁殖或产生代谢产物用的混合养料,它具备微生物所需的六大养分元素,且其间比例合适。 2, 指出四大类微生物的最适生长pH范围与常用的培育基名称。细菌(PH 7476)牛肉膏蛋白胨培育基真菌(自然PH)马铃薯培育基霉菌(PH 7072)察氏培育基放线菌(PH 7476)高氏一号培育基。3, 指出微生物的六大养分要素。(一)碳源(二)氮源(三)能源(四)生长因子(五)无机盐(六)水 4, 试比较细胞膜运输养分物质的四种方式。比较项目 单纯扩散 促
24、进扩散 主动运输 基因移位 特异载体蛋白运输速度溶质运输方向平衡时内外浓度运输分子能量消耗运输前后溶质分子载体饱与效应与溶质类似物运输抑制剂运输对象举例无慢由浓至稀内外相等无特异性不须要不变 无无竞争性无H2O, CO2, O2甘油, 乙醇, 少数氨基酸, 盐类, 代谢抑制剂 有快由浓至稀内外相等特异性不须要不变有有竞争性有SO42+, PO43+, 糖(真核生物) 有快由稀至浓内部浓度高得多特异性须要不变有有竞争性有氨基酸, 乳糖等糖类, Na+, Ca2+等无机离子 无快由稀至浓内部浓度高得多特异性须要变更有有竞争性有葡萄糖, 果糖, 甘露糖, 嘌呤, 核苷, 脂肪酸等 5, 什么是鉴别性
25、培育基?试以EMB培育基为例,分析其鉴别作用的原理。鉴别性培育基:培育基中加入能于某一菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而用肉眼就能使该菌菌落与外形相像的它种菌落相区分的培育基就称鉴别性培育基。 EMB作用原理其中的伊红与美蓝两种苯胺染料可抑制革兰氏阳性细菌与一些难培育的革兰氏阴性细菌。在低酸度时,这两种染料结合形成沉淀,起着产酸指示剂的作用。因此试样中的多种肠道细菌会在EMB培育基上产生相互易区分的特征菌落,因而易于辨别。尤其是大肠杆菌,因其猛烈分解乳搪而产生大量的混合酸,菌体带H+故可染上酸性染料伊红,又因伊红与美蓝结合,所以菌落染上深紫色,从菌落表面的反射光中还可看到绿色金属闪光:
26、 6, 什么是单功能养分物, 双功能养分物, 多功能养分物?单功能养分物:一种养分物有一种养分要素功能,该养分物称为单功能养分物。双功能养分物:一种养分物有两种养分要素功能,该养分物称为双功能养分物。多功能养分物:一种养分物常有两种以上养分要素功能,该养分物称为多功能养分物。7, 试述培育基的种类。按对培育基成分的了解来分:(1)自然培育基 (2)组合培育基按培育基外观的物理状态来分(1)固体培育基 (2)半固体培育基 液体培育基 (4)脱水培育基按培育基的功能来分(1)种子培育基 (2)发酵培育基 (3)基础培育基 (4)选择性培育基第五章 微生物的新陈代谢1, 名词说明:新陈代谢,生物氧化
27、,呼吸,无氧呼吸,发酵,氧化磷酸化,光合磷酸化,底物水平磷酸化,Stickland反应。 新陈代谢:是指发生在活细胞中的各种分解代谢与合成代谢的总与。其中,分解代谢是指困难的有机物分子通过分解代谢酶系的催化,产生简洁分子, 腺苷三磷酸(ATP)形式的能量或还原力(或称还原当量,以H表示)的作用;合成代谢则与分解代谢相反,是指在合成代谢酶系的催化下,由简洁小分子, ATP形式的能量与H形式的还原力一起合成大分子的过程。 生物氧化:生物氧化是指发生在活细胞中的一系列产能性氧化反应的总称。呼吸:呼吸是指底物按常规方式脱氢后,经完整的呼吸链递氢,最终由分子氧接受氢并产生水与释放能量(ATP)的生物氧化
28、方式。呼吸必需在有氧条件下进行,因此又叫有氧呼吸。无氧呼吸:无氧呼吸又称厌氧呼吸,是一类呼吸链末端的氢受体为外源无机氧化物(少数为有机氧化物)的生物氧化。发酵:无氧条件下,底物脱氢后产生的还原力不经呼吸链而干脆传递给某一中间代谢物的低效产能反应。氧化磷酸化:又称电子传递磷酸化,是指呼吸链的递氢(或电子)与受氢过程与磷酸化反应相偶联并产生ATP的作用。光合磷酸化:由光照引起的电子传递与磷酸化作用相偶联而生成ATP的过程成为光合磷酸化。底物水平磷酸化:是指在生物氧化过程中产生一些含有高能磷酸键的化合物,并且这些高能磷酸化合物的高能磷酸键键能可以干脆偶联ATP合成。Stickland反应 :以一种氨
29、基酸作氢供体与以另一种氨基酸作氢受体而实现生物氧化产能的独特发酵类型,称为stickland反应。stickland反应的产能效率很低,每分子氨基酸仅产1个ATP。 2, 试述生物氧化的形式, 过程, 功能与类型。形式:某物质与氧结合, 脱氢或失去电子过程:一般包括三个环节:底物脱氢(或脱电子)作用(该底物称作电子供体或供氢体)氢(或电子)的传递(需中间传递体,如NAD, FAD等)最终氢受体接受氢(或电子)(最终电子受体或最终氢受体)功能:产能(ATP), 产还原力H与产小分子中间还原产物。类型:呼吸, 无氧呼吸, 发酵3, 在化能异养微生物的生物氧化中,其基质脱氢与产能的途径主要有哪几条?
30、试比较各途径的主要特点。脱氢与产能的途径:EMP, HMP, ED, TCA特点:EMP 当葡萄糖转化成1.6-二磷酸果糖后,在果糖二磷酸醛缩酶作用下,裂解为两 个3化合物,再由此转化为2分子丙酮酸。 HMP 当葡萄糖经一次磷酸化脱氢生成6-磷酸葡萄糖酸后,在6-磷酸葡萄糖酸脱酶作用下,再次脱氢降解为1分子CO2与1分子磷酸戊糖。ED 是少数EMP途径不完整的细菌所特有的利用葡萄糖的替代途径。一分子葡萄糖经ED途径可生成两个丙酮酸并净生成一个ATP, 一个NADH+H+与一个NADPH+H+。TCA (1)氧虽不干脆参与其中反应,但必需在有氧条件下运转;(2)丙酮酸在进入三羧酸循环之先要脱羧生
31、成乙酰CoA,乙酰CoA与草酰乙酸缩合成柠檬酸再进入三羧酸循环。(3)循环的结果是乙酰CoA被彻底氧化成CO2与H2O,每氧化1分子的乙酰CoA可产生12分子的ATP,草酰乙酸参与反应而本身并不消耗。(4)产能效率极高;(5)TCA位于一切分解代谢与合成代谢中的枢纽地位。4, 试述EMP途径在微生物生命活动中的重要性。供应ATP形式的能量与NADH2形式的还原力;是连接其它几个重要代谢途径的桥梁,包括TCA, HMP与ED途径等;为生物合成供应多种中间代谢物;通过逆向反应可进行多糖合成。5, 试述HMP途径在微生物生命活动中的重要性。供应合成原料;产还原力;作为固定CO2的中介;扩大碳源的利用
32、范围;连接EMP途径。6, 试述TCA循环在微生物产能与发酵生产中的重要性。TCA位于一切分解代谢与合成代谢中的枢纽地位,产能效率极高,不仅可为微生物的生物合成供应各种碳架原料,而且还与人类的发酵生产紧密相关。7, 在微生物能量代谢中ATP的产生途径有哪几条?EMP, HMP, ED, TCA, 呼吸, 无氧呼吸, 发酵8, 试比较呼吸, 无氧呼吸, 发酵的异同点。产能 呼吸 无氧呼吸 发酵 环境条件 有氧 无氧 无氧 终电子受体 来源 环境,外源性 环境,外源性 胞内, 内源性 性质 分子氧 化合物(通常为无机物) 代谢中间物 能进行代谢产能方式的微生物 专性好氧微生物, 兼性好氧微生物,
33、微嗜氧微生物 专性厌氧微生物, 兼性好氧微生物 兼性好氧微生物, 耐氧厌氧微生物, 专性厌氧微生物 9, 试比较同型与异型乳酸发酵。10, 细菌的酒精发酵途径如何?它与酵母菌的酒精发酵有何不同?细菌的酒精发酵有何优缺点?酒精发酵途径ED, 酵母菌的酒精发酵EMP 优缺点:a.优点:代谢速率高;产物转化率高;菌体生成少;代谢副产物少;发酵温度高;不必定期供氧;细菌为原核生物,易于用基因工程改造菌种;厌氧发酵,设备简洁。b.缺点:生长pH为5,较易染菌;细菌耐乙醇力较酵母菌为低(细菌7%乙醇,酵母菌耐8-10%乙醇);底物范围窄(葡萄糖, 果糖)。 11, 青霉素为何只能抑制代谢旺盛的细菌?其制菌
34、机制如何?缘由:青霉素抑制肽聚糖的合成过程,形成裂开的细胞壁,代谢旺盛的细菌才存在肽聚糖的合成,因此此时有青霉素作用时细胞易死亡。作用机制:青霉素破坏肽聚糖合成过程中肽尾与肽桥间的转肽作用。12, 如何运用代谢调控理论使微生物合成比自身需求量更多的有用代谢产物?举例说明。应用养分缺陷型菌株解除正常的反馈调整 如赖氨酸发酵, 肌苷酸的生产;应用抗反馈调整的突变株解除反馈调整 如黄色短杆菌的抗氨基羟基戊酸菌株能累积苏氨酸;限制细胞膜的渗透性 如在谷氨酸发酵生产中只要把生物素浓度限制在亚适量的状况下,才能分泌出大量的谷氨酸,第六章 微生物的生长与其限制1, 名词说明:生长产量常数(Y),最适生长温度
35、,巴氏消毒法,抗生素,抗代谢药物,选择毒力,生长限制因子,MIC。生长产量常数(Y):指菌体产量与限制性养分物消耗的比例关系。最适生长温度:某菌分裂代时最短或生长速率最高时的培育温度。 巴氏消毒法:用较低的温度处理牛乳或其他液态食品,杀死其中可能存在的无芽孢病原菌而又不损害养分与风味的消毒方法。抗生素:抗生素是生物在其生命活动中产生的一种次生代谢产物或其人工衍生物,能对他种生物的生命活动产生抑制作用或致死作用。抗代谢药物:又称代谢拮抗物, 代谢类似物,是指在结构上与生物体所必需的代谢物相像,可以与正常代谢途径中特定的酶发生竞争性反应,从而阻碍酶的功能, 干扰代谢的正常进行的物质。选择毒力:抗生
36、素对人体与动, 植物组织的毒力,一般远小于它对致病毒的毒力,这称为抗生素的选择毒力。生长限制因子:凡是处于较低浓度范围内,可影响生长速率与菌体产量的养分物,就称生长限制因子。 MIC:最小抑菌浓度,表示某药物对某菌的最小抑菌浓度,常以g/ml或/ml来表示。2, 什么是典型生长曲线?它可分几期?划分的依据是什么?各期特点如何?典型生长曲线 :将少量纯种单细胞微生物接种到恒容积的液体培育基中培育。在适宜条件下,其群体就会有规律地生长,定时取样测定细胞含量,以细胞数目的对数值作纵坐标,以培育时间作横坐标,就可以画出一条有规律的曲线,这就是微生物的典型生长曲线。划分的依据:单细胞微生物。(1)延滞期
37、(停滞期, 调整期) 特点:a.生长速率常数为零;b.细胞形态变大或增大;c.细胞内RNA尤其是rRNA含量增高,原生质呈嗜碱性。d.合成代谢活跃;e.对外界不良条件的反应敏感。(2) 对数期 特点:此时菌体细胞生长的速率常数R最大,分裂快,代时短,细胞进行平衡生长,菌体内酶系活跃,代谢旺盛,菌体数目以几何级数增加,群体的形态与生理特征最一样,抗不良环境的实力强。稳定期 特点:a.生长速率常数为零;b.菌体产量达到最高;c.活菌数相对稳定;d.细胞起先贮存贮藏物;e.芽孢在这个时期形成;f.有些微生物在此时形成次生代谢产物。 衰亡期 特点:a.细胞形态多样;b.出现细胞自溶现象;c.有次生代谢
38、产物的形成;d.芽孢在此时释放。 3, 延滞期有何特点?如何缩短延滞期?特点:a.生长速率常数为零;b.细胞形态变大或增大;c.细胞内RNA尤其是rRNA含量增高,原生质呈嗜碱性。d.合成代谢活跃;e.对外界不良条件的反应敏感。消退:a. 以对数期的菌体作种子菌 ;b. 适当增大接种量 :一般接受3%8%的接种量,依据生产上的详细状况而定,最高不超过1/10。c. 培育基的成分:种子培育基尽量接近发酵培育基 。 4, 指数期有何特点?处于该期的微生物有何应用?特点:此时菌体细胞生长的速率常数R最大,分裂快,代时短,细胞进行平衡生长,菌体内酶系活跃,代谢旺盛,菌体数目以几何级数增加,群体的形态与
39、生理特征最一样,抗不良环境的实力强。应用:指数期的微生物是探讨生理, 代谢等的良好材料;是增殖噬菌体的最适菌龄;是发酵生产中用做种子的最佳种龄,通过补加养分物质延长指数期。5, 稳定期为何会到来?有何特点?形成缘由:a.养分物尤其是生长限制因子的耗尽;b.养分物的比例失调;c.有害代谢产物的积累;d.物化条件的变更。特点:a.生长速率常数为零;b.菌体产量达到最高;c.活菌数相对稳定;d.细胞起先贮存贮藏物;e.芽孢在这个时期形成;f.有些微生物在此时形成次生代谢产物。 6, 什么叫连续培育?有何优点?为何连续时间是有限的?连续培育:指微生物接种到培育基里以后的整个生长期间,微生物能持续地以比
40、较恒定的生长速率常数进行生长,从而导致微生物的生长过程能“不断”地进行下去的一种培育方法。优点:高效, 低耗, 利于自控, 产品质量稳定。菌种易于退化;简洁污染;养分物的利用率低于分批培育。 因此连续时间是有限的。7, 微生物培育过程中pH变更的规律如何?如何调整?微生物的生命活动过程中会自动地变更外界环境的pH,其中发生pH变更有变酸与变碱两种过程,在一般微生物的培育中往往以变酸占优势,因此,随着培育时间延长,培育基的pH会慢慢下降。的变更还与培育基的组分尤其是碳氮比有很大关系,碳氮比高的培育基经培育后pH会明显下降;相反,碳氮比低的培育基经培育后,其pH常会明显上升。措施:分为“治标”与“
41、治本”两大类,前者指依据表面现象而进行干脆, 与时, 快速但不许久的表面化调整,后者指依据内在机制而接受的间接, 缓效但可发挥许久作用的调整。8, 比较灭菌, 消毒, 防腐与化疗的异同,并举例。比较项目 灭菌 消毒 防腐 化疗 处理因素处理对象微生物类型对微生物作用实 例强理, 化因素任何物体内外一切微生物彻底杀灭加压蒸气灭菌,辐射灭菌,化学杀菌剂 理, 化因素生物体表,酒, 乳等有关病原菌杀死或抑制70酒精消毒,巴氏消毒法 理, 化因素有机质物体内外一切微生物抑制或杀死冷藏,干燥,糖渍,盐腌,缺氧,化学防腐剂 化学治疗剂宿主体内有关病原菌抑制或杀死抗生素,磺胺药,生物药物素 9, 试述微生物
42、生长繁殖的测定方法。一, 测生长量(一)干脆法1, 测体积2, 测干重(二)间接法1, 比浊法2, 生理指标法二, 计繁殖数1, 干脆计数法(全数)血球计数板法 2, 间接计数法(活菌数)稀释平板菌落计数法10, 试述高温灭菌的方法。1, 干热灭菌法(1)原理:干热可使破坏细胞膜破坏, 蛋白质变性与原生质干燥,并可使各种细胞成分发生氧化变质。(2)应用范围:1)烘箱内热空气灭菌法(150170,12hr):金属器械, 洗净的玻璃器皿。2)火焰灼烧法:接种环, 接种针等。2, 湿热灭菌: 即以100以上的加压蒸气进行灭菌。(1)相同温度与相同作用时间下,湿热灭菌法比干热灭菌法更有效:湿热空气穿透
43、力强,能破坏维持蛋白质空间结构与稳定性的氢键,能加速其变性。(2)种类:1)常压法a.巴氏消毒法: 用较低的温度处理牛乳或其他液态食品,杀死其中可能存在的无芽孢病原菌而又不损害养分与风味的消毒方法。a)低温维持法(LTH):要求62.8保持30min;b)高温瞬时法(HTST):要求71.7维持至少15s;b.煮沸消毒法:a)适用范围:一般用于饮用水的消毒。b)条件:100下数分钟。c.间隙灭菌法:又称丁达尔灭菌法或分段灭菌法。a) 适用范围:适用于不耐热培育基的灭菌。b) 条件:80一100下蒸煮1560分钟,三天。2)加压法:a.常规加压法a) 适用范围:适合于一切微生物学试验室, 医疗保
44、健机构或发酵工厂中对培育基与多种器材, 物料的灭菌。b) 条件:121(压力为lkgcm2),时间维持1520分钟,也可接受在较低的温度(115,即0.7kgcm2下维持35分钟的方法。b.连续加压灭菌法:在发酵行业里也称“连消法”。a) 适用范围:在大规模的发酵工厂中作。培育基灭菌用。主要操作是将培育基在发酵罐外连绵起伏地进行加热, 维持与冷却,然后才进入发酵罐。b) 条件:在135140下处理5一l 5秒钟11, 请说明养分物质浓度变更对微生物生长速度与最终菌体产量的影响。微生物生长所须要的养分物质,只有在浓度适当的条件下才能表现出良好的作用。浓度太低,不能满足微生物生长的须要;浓度太高反
45、而会抑制微生物的生长,最终导致菌体产量。12, 试比较恒浊器与恒化器。装置 限制对象 培育基 培育基流速 生长速率 产物 应用范围 恒浊器 菌体密度(内限制) 无限制生长因子 不恒定 最高 大量菌体与与菌体相平行的代谢产物 生产为主 恒化器 培育基流速(外限制) 有限制生长因子 恒定 低于最高 不同生长速率的菌体 试验室为主 13, 依据微生物与氧气的关系可分为哪些类型?依据氧与微生物生长的关系可将微生物分为好氧, 微好氧, 耐氧型, 兼性厌氧与专性厌氧五种类型 14, 为什么缺乏SOD的微生物只能进行专性厌氧生活?好氧生物因有了SOD,故巨毒的O2-。就被歧化成毒性稍低的H2O2,在过氧化氢酶的作用下,H2O2又进一步变成无毒的H2O。厌氧菌因不能合成SOD,所以根本无法使O2-。歧化成H2O2,因此当有氧存在时,细胞内形成的O2-。就使自身受到毒害。15, 抗代谢药物的作用。抗代谢药物的三种作用a.竞争酶的活性中心b.假冒正常代谢物c.代谢途径终产物结构类似物的反馈调整16, 什么是菌种衰退?菌种衰退的缘由是什么?菌种衰退:生产菌株生产性状的劣化或遗传探讨菌株遗传标记的丢失称为菌种衰退。缘由: 1, 自发突变2, 通过诱变获得的高产菌株本身不纯3, 培育, 保藏条件 1,
限制150内