高中生物选修3现代生物科技专题知识梳理.docx
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1、 选修3现代生物科技专题学问梳理 专题1 基因工程1.1 基因工程的诞生一、基因工程的诞生1、20世纪中叶,根底理论获得了重大打破 DNA是遗传物质的证明:1944艾弗里等人 DNA双螺旋构造和中心法则确实立:1953年沃森和克里克建立了DNA双螺旋构造模型。1958年,梅塞尔松和斯塔尔用试验证明了DNA的半保存复制,随后不久确立了中心法则。 遗传密码的破译:1963年,尼伦贝格等破译了遗传密码。2、技术的独创使基因工程的施行成为可能 基因转移载体的发觉 工具酶的独创 DNA合成和测序技术的独创 DNA体外重组的实现 重组DNA表达试验的胜利:1973年,博耶和科恩将两种不同来源的DNA 分子
2、进展体外重组,并首次实现了在大肠杆菌中的表达,至此,基因工程正式问世。 第一例转基因动物问世:1980年,科学家首次通过显微注射法,培育出世界上第一个转基因动物。这一试验被认为是基因工程开展史上的一个里程碑。 PCR技术的独创:1985年,科学家莫里斯独创。二、基因工程的概念是指在体外通过人工“剪切”和“拼接”等方法,对生物的基因进展改造和重新组合,然后导入受体细胞并使重组基因在受体细胞中表达,产生人类须要的基因产物的技术。又称重组DNA技术。思索:(1)基因工程的物质根底是:全部生物的DNA均由四种脱氧核苷酸组成。(2)基因工程的构造根底是:全部生物的DNA均为双螺旋构造。(3)一种生物的D
3、NA上的基因之所以能在其他生物体内得以进展一样的表达,是因为它们共用一套遗传密码子。1.2 基因工程的原理及技术一、基因工程的工具酶与载体1、分子手术刀:限制性核酸内切酶(简称限制酶)。(1)来源:主要从原核生物中分别和纯化。(2)特点:每种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的位点上切割DNA分子。 (切割的化学键:磷酸二酯键)(2)切割方式错位切:产生黏性末端。平切: 产生平口末端。2、分子针线:DNA连接酶。(1)类型:EcoliDNA连接酶、T4DNA连接酶等。(2)作用:可以将两个DNA 片段之间的2各缺口通过磷酸二酯键同时连接起来。3、运载工具:载体。(1)种类:质粒(常用
4、)、噬菌体、可起载体作用的动植物病毒。(2)质粒:来源:是细菌细胞质中一种很小的环状、双链DNA分子。条件:具有一个至多个限制酶切割位点。能在受体细胞中自我复制,或整合到染色体DNA上,随染色体DNA进展同步复制。具有某些标记基因。(供重组DNA的 鉴定和选择)能“友好”地“借居”在受体细胞内;二、基因工程的一般过程与技术苏教版人教版1、获得目的基因1、目的基因的获得2、制备重组DNA分子2、基因表达载体的构建3、转化受体细胞3、将目的基因导入受体细胞4、挑选出获得目的基因的受体细胞4、目的基因的检测与鉴定5、培育受体细胞并诱导目的基因的表达1、目的基因的获得从基因文库中获得目的基因利用PCR
5、技术扩增目的基因逆转录(1)目的基因:主要是指编码蛋白质的构造基因。(2)获得方法从自然界已有物种中分别人工合成补充:聚合酶链式反响技术(PCR技术)(1)PCR:即聚合酶链式反响(2)PCR技术:在体外通过酶促反响有选择地大量扩增目的基因或序列的技术。(3)方法:2、基因表达载体的构建(核心)(1)目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时,使目的基因可以可以表达和发挥作用。(2)组成:目的基因 + 启动子 + 终止子 + 标记基因RNA聚合酶识别和结合部位,位于基因的首端。 终止信号,位于基因的尾端。鉴别受体细胞中是否含有目的基因。(3)构建步骤:用同一种限制酶切割目
6、的基因和载体,从而产生一样的黏性末端,再用DNA连接酶连接。(形成的分子称:重组DNA分子或重组质粒。)【特殊提示】 插入的目的基因只是目的基因局部,其表达须要调控序列,因此用作载体的质粒前需有启动子,后需有终止子。3、将目的基因导入受体细胞(转化)(1)受体种类不同,导入方法不同导入植物细胞:农杆菌转化法(常用)、基因枪法、花粉管通道法。导入动物细胞:显微注射法。导入微生物细胞:Ca2+处理法。(2)受体细胞的种类植物:可以是受精卵、体细胞(可经组织培育成完好个体)动物:受精卵(因为动物细胞的全能性受到抑制)(3)转化本质:目的基因整合到受体细胞的染色体DNA上。4、目的基因的检测与鉴定(1
7、)分子检测检测转基因生物的染色体DNA是否插入了目的基因(DNA分子杂交法)检测目的基因是否转录出了mRNA(分子杂交法)检测目的基因是否翻译出了蛋白质(抗原抗体杂交法)(2)个体生物学程度鉴定检测转基因生物是否具有了我们所须要的遗传特性。三、基因工程育种1、方法:提取目的基因装入载体导入受体细胞基因表达挑选出符合要求的新品种2、原理:基因重组。3、优点:目的性强,可以根据人们的意愿定向改造生物;育种周期短。4、缺点:技术困难,存在平安性问题。5、实例:抗软化番茄的培育。1.3 基因工程的应用一、转基因生物是指利用基因工程技术导入外源基因培育出的、可以将新性状稳定地遗传给后代的基因工程生物。二
8、、基因工程的应用1、植物基因工程 抗虫转基因植物减轻农药对环境的污染 抗病转基因植物 抗逆转基因植物 利用转基因改进植物的品质2、动物基因工程 进步动物的生长速度 改善畜产品的品质 用转基因动物消费药物(乳腺生物反响器) 用转基因动物作器官移植的供体3、基因工程药物的消费如用转基因工程菌消费细胞因子、抗体、疫苗、激素等。4、基因诊断和基因治疗(1)方法l 基因诊断:采纳基因检测的方法(DNA分子杂交技术)来推断患者是否出现了基因异样(如遗传病患者的基因缺陷)或是否携带病原体(如乙型肝炎病毒)等。l 基因治疗:是指利用正常基因置换或弥补缺陷基因的的治疗方法。途径 体外基因治疗:先从病人体内获得某
9、种细胞,进展培育,然后在体外完成基因转移,再挑选胜利转移的细胞扩增培育,最终重新输入患者体内。 体内基因治疗:用基因工程的方法,干脆向人体组织细胞中转移基因的方法。(2)实例:ADA基因缺陷症基因治疗机理1.4 蛋白质工程一、蛋白质工程崛起的缘由基因工程原则上只能消费自然界已存在的蛋白质,这些自然蛋白质是生物在长期进化过程中形成的,它们的构造和功能符合物种生存的须要,却不确定完全符合人类消费和生活的须要。二、蛋白质工程的概念指以蛋白质分子的构造规律及其与生物功能的关系作为根底,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进展改造或制造一种新的蛋白质,以满意人类的消费和生活需求。基因工程是其中的关键技术
10、,因此,蛋白质工程又被称为第二代基因工程。三、蛋白质工程的原理1、自然蛋白质合成:基因表达(转录和翻译)形成氨基酸序列的多肽链形成具有高级构造的蛋白质行使生物功能。(中心法则)2、蛋白质工程:从预期的蛋白质功能动身设计预期的蛋白质构造推想应有的氨基酸序列找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)四、蛋白质工程的类型1、类型(1)大改:是指根据氨基酸的性质和特点,设计并制造出自然界中不存在的全新蛋白质,使之具有特定的氨基酸序列、空间构造和预期的功能。(2)中改:是指在蛋白质分子中替代某一肽段或一个特定的构造域。(3)小改:是指通过基因工程中的定点诱变技术,有目的地改造蛋白质分子中某活性部位的1个或几个氨
11、基酸残基,以改善蛋白质的性质和功能。2、定点诱变技术(见右图)五、蛋白质工程的应用1、通过改造酶的构造,有目的地进步酶的热稳定性。2、在生物工程制药领域,蛋白质工程也有广泛的应用。专题2 克隆技术2.1 细胞工程概述一、细胞工程的概念是指以细胞为根本单位,在体外无菌条件下,进展培育、繁殖或利用细胞交融、核移植等技术,使细胞某些生物学特性根据人们的意愿发生变更,从而改进生物品种、创建新品种和加速繁育生物个体,以及获得某些有用的细胞代谢产物的技术。二、细胞工程的类型1、按探讨对象可分为:植物细胞工程、动物细胞工程、微生物细胞工程2、按所用技术可分为:l 植物组织培育、植物体细胞杂交l 动物细胞培育
12、、动物细胞交融和单克隆抗体制备、细胞核移植技术和动物体细胞克隆2.2 植物的组织培育一、植物细胞的全能性1、概念:生物体内几乎每一个细胞内都含有该物种的全套遗传物质,具有发育成为完好个体所必需的全部基因,因此,这些细胞都具有发育成为一个新的生物个体的潜能。细胞的这种特性称为细胞全能性。2、理论根据:生物体内几乎每一个细胞内都含有该物种的全套遗传物质,具有发育成为完好个体所必需的全部基因。3、全能性大小的推断(1)受精卵配子体细胞(2)植物细胞动物细胞(3)分化程度低的细胞分化程度高的细胞4、实现全能性的条件(1)离体状态。(2)环境条件条件相宜(如养分物质、激素、温度等)。5、体细胞未表现出全
13、能性的缘由 基因的表达具有选择性。即未离体细胞只能在机体的调控下定向分化,不能表达其全能性。6、植物细胞的全能性是植物细胞工程的根底。【特殊提示】目前的试验证明,离体的植物体细胞的全能性得到了充分的表达(如植物组织培育),而离体的动物体细胞,其全能性受到限制,但其细胞核仍旧保持全能性(如克隆技术培育动物个体),然而须要卵细胞质才能表达出来。二、植物细胞工程(一)植物组织培育1、概念:是指根据细胞全能性的原理,在无菌条件下,分别植物的器官、组织、细胞或原生质体(称为外植体),并在培育基上培育,在相宜的条件下使其长成局部或完好植株的技术。2、理论根底:植物细胞的全能性。3、过程:愈伤组织胚状体试管
14、苗植物体再分化(分化培育基)离体的器官、组织、细胞脱分化附:相关概念l 愈伤组织:是一团没有特定构造和功能并处于旺盛分裂状态的薄壁细胞。l 脱分化:由已分化的植物细胞形成愈伤组织的过程。l 再分化:愈伤组织生长一段时间后再移植到新的培育基(人教版:分化培育基)上接着培 养,重新诱导分化形成根、芽等器官的过程。4、条件:首先用消毒剂除去外植体外表的微生物,在无菌条件下将其放到相宜的培育基上。培育基一般有五类成分:(1)水(2)无机养分:包括大量元素和微量元素。(3)有机养分:主要有糖、维生素、氨基酸。(4)生长物质:指植物激素,常用的有生长素和细胞分裂素,离体培育物的根芽分化取决于激素间的比例。
15、此外,赤霉素对刺激细胞的伸长也有确定的作用。(5)自然附加物:如椰子乳、酵母提取物等。5、应用(1)微型繁殖:不仅可以保持优良品种的遗传特性,还可以高效快速地实现种苗的大量繁殖。(2)作物脱毒:植物分生区旁边,如茎尖、根尖,很少被病毒感染,甚至无病毒,因此被用来培育无病毒植株。(3)制备人工种子概念:是指在植物组织培育中得到的体细胞胚状体,包埋在含有养分物质和爱护物质的包被中,在相宜条件下可以发芽出苗的颗粒体。优点: l 不受环境因素的制约,一年四季都可以进展工厂化消费;l 繁殖速度快,可在短时间内供应大量种苗;l 有利于保存该种系的优良性状。(4)转基因植物的培育(5)消费药物、杀虫剂等。6
16、、细胞工程育种之一植物组织培育育种方法:离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织根、芽等器官植物体 原理:植物细胞的全能性 优点:快速繁殖、培育无病毒植株等 缺点:技术要求高、培育条件严格 实例:制备人工种子(二)植物体细胞杂交1、概念:就是将不同种的植物体细胞,在确定条件下交融成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。 2、理论根底:植物细胞的全能性。3、过程附:(1)原生质体:是指去除植物细胞壁后获得的袒露的植物细胞构造等。(2)诱导植物细胞交融的方法:物理法:离心、振动、电激等。化学法:一般用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂。4、意义:克制远源杂交不亲和的障碍。5、细胞工程育种之二植物体细胞
17、杂交育种方法:去掉细胞壁诱导原生质体交融组织培育 植物体 原理:植物细胞的全能性 (变异原理:染色体变异;交融原理:细胞膜具有确定的流淌性)优点:克制远源杂交不亲和的障碍,培育出作物新品种。缺点:技术困难,不能按人们的须要表现出亲代的优良性状。实例:番茄马铃薯的培育2.3 动物细胞的培育与体细胞克隆一、动物细胞培育1、概念:就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在相宜的培育基中,让这些细胞生长和增殖。这项技术是动物细胞工程的根底。用于培育的动物细胞和组织大多取自动物胚胎或诞生不久的幼龄动物的器官或组织。2、过程:见下图相关概念l 细胞贴壁:培育时悬液中分散的细胞很快就会贴
18、附在瓶壁上,称为细胞贴壁。l 接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到外表相互相互接触时,细胞就会停顿分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。l 原代培育:是指从供体获得组织或细胞后的初次培育。l 传代培育:将原代培育的细胞分别稀释后转入新的培育瓶中接着培育。(一般状况下,传代培育10-50次后,细胞增殖会明显放缓,甚至完全停顿,但有少局部细胞克制细胞寿命的自然极限,获得不死性,这些细胞已经发生了突变,正在朝着等同于癌细胞的方向开展。)3、条件:(1)无菌、无毒的环境 培育液和培育用具进展无菌处理 培育液中添加确定量的抗生素 定期更换培育液(2)养分 葡萄糖、氨基酸、维生素、无机盐、微量元素、促生长因子等
19、。 合成培育基中还需参加动物血清、血浆等(3)温度和PH 温度:细胞体外培育的温度一般与动物的体温相近,哺乳动物多以36.50.5为宜。 PH:多数细胞最适PH为7.2-7.4。(4)气体环境 细胞培育所需气体主要是O2和CO2,O2 是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培育液的PH。 进展细胞培育时,通常采纳培育皿或松盖培育瓶,将其置于95%空气加5% CO2的混合气体的培育箱 中进展培育。附:培育基的的种类(按来源分)自然培育基:主要取自动物血清、动物组织提取液和鸡胚汁等,具有养分价值高、成分困难的特点。合成培育基:是人工配制的,具有成清楚确、便于限制试验条件的特点。4、应用:(1)
20、很多有重要价值的生物制品,如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等,都可以借助动物细胞的大规模培育来消费。(2)作为基因工程的受体细胞。(3)用于检测有毒物质,推断某种物质的毒性。(4)用于医学探讨二、细胞核移植和动物体细胞克隆(一)细胞核移植:是一种利用显微操作技术将某种动物细胞的细胞核移入同种或异种动物的去除细胞核的成熟卵细胞内的技术。(二)动物体细胞克隆1、概念:将供体体细胞的细胞核与受体去核卵细胞的细胞质进展人工组合,借助于卵细胞的发育实力,经过培育发育成胚胎,进而形成个体的技术。(关键:细胞核移植)(克隆:是指遗传上完全一样的分子、细胞或来自同一祖先的生物个体的无性繁殖群体。)2、过程:(克
21、隆羊“多利”的产生过程)3、应用前景(1)在畜牧消费中,可以加速家畜遗传改进进程,促进优良畜群繁育;(2)在爱护濒危物种方面,可以增加这些动物的存活数量;(3)在医疗卫生领域:n 转基因克隆动物可以作为生物反响器,消费很多宝贵的医用蛋白;n 在治疗人类疾病时,转基因克隆动物细胞、组织和器官可以作为异体移植的供体;n 人的核移植胚胎干细胞经过诱导分化,形成相应的组织、器官后可以用于组织、器官的移植。(4)探讨克隆动物和克隆细胞可使人类更深化地理解胚胎发育及苍老过程;(5)用克隆动物做疾病模型,能使人们更好的追中踪探讨疾病的开展过程和治疗疾病。4、细胞工程育种之三动物细胞核移植育种方法:细胞核移植
22、重组细胞培育成早期胚胎胚胎移植 原理:动物细胞核的全能性 优点:快速繁殖优良品种,保存濒危物种,有选择地繁殖某性别的动物。 缺点:导致生物品系削减,个体生存实力下降。 实例:“多利”羊等克隆动物的培育 附:现代生物技术育种小结 类型 比拟 基因工程育种细胞工程育种植物组织培育育种植物体细胞杂交育种动物细胞核移植育种原理基因重组植物细胞的全能性植物细胞的全能性(变异原理:染色体变异;交融原理:细胞膜具有确定的流淌性)动物细胞核的全能性方法提取目的基因装入载体导入受体细胞基因表达挑选出符合要求的新品种离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织根、芽植物体去掉细胞壁诱导原生质体交融组织培育细胞核移植重组细胞
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