人教版生物选修三基因工程知识点及习题.docx
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1、专题1 基因工程基因工程的概念基因工程是指依据人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组与转基因技术,给予生物以新的遗传特性,创建出更符合人们须要的新的生物类型与生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计与施工的,又叫做DNA重组技术。(一)基因工程的基本工具1.“分子手术刀”限制性核酸内切酶(限制酶)(1)来源:主要是从原核生物中分别纯化出来的。(2)功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。(3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端与平末端。2.“分子缝合针”DNA连接酶(
2、1)两种DNA连接酶(EcoliDNA连接酶与T4-DNA连接酶)的比较:相同点:都缝合磷酸二酯键。区 别:EcoliDNA连接酶来源于大肠杆菌,只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来; 而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体,能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低。(2) 与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。 DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键。3.“分子运输车”载体(1)载体具备的条件:能在受体细胞中复制并稳定保存。具有一至多个限制酶切点,供外源DNA片段插入。具有标记基因,供重组DNA
3、的鉴定与选择。(2)最常用的载体是质粒,它是一种袒露的, 结构简洁的, 独立于细菌染色体之外,并具有自我复制实力的双链环状DNA分子。(3)其它载体: 入噬菌体的衍生物, 动植物病毒(二)基因工程的基本操作程序第一步:目的基因的获得1.目的基因是指: 编码蛋白质的结构基因 。2.原核基因实行干脆分别获得,真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法_与化学合成法_。3.PCR技术扩增目的基因(1)原理:DNA双链复制(2)过程:第一步:加热至9095DNA解链;第二步:冷却到5560,引物结合到互补DNA链;第三步:加热至7075,热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步:
4、基因表达载体的构建1.目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达与发挥作用。2.组成:目的基因启动子终止子标记基因(1)启动子:是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶识别与结合的部位,能驱动基因转录出mRNA,最终获得所需的蛋白质。(2)终止子:也是一段有特殊结构的DNA片段 ,位于基因的尾端。(3)标记基因的作用:是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。第三步:将目的基因导入受体细胞_1.转化的概念:是目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定与表达的过程。2.常用的转
5、化方法:将目的基因导入植物细胞:采纳最多的方法是 农杆菌转化法,其次还有 基因枪法与 花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是 显微注射技术。此方法的受体细胞多是 受精卵。将目的基因导入微生物细胞:原核生物作为受体细胞的缘由是 繁殖快, 多为单细胞, 遗传物质相对较少 ,最常用的原核细胞是 大肠杆菌 ,其转化方法是:先用 Ca2+ 处理细胞,使其成为 感受态细胞 ,再将 重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在肯定的温度下促进感受态细胞汲取DNA分子,完成转化过程。3.重组细胞导入受体细胞后,筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。第四步:目的基因的检
6、测与表达1.首先要检测 转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因,方法是采纳 DNA分子杂交技术。2.其次还要检测 目的基因是否转录出了mRNA,方法是采纳 用标记的目的基因作探针与 mRNA杂交。3.最终检测 目的基因是否翻译成蛋白质,方法是从转基因生物中提取 蛋白质,用相应的 抗体进行抗原抗体杂交。4.有时还需进行 个体生物学水平的鉴定。如 转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。(三)基因工程的应用1.植物基因工程:抗虫, 抗病, 抗逆转基因植物,利用转基因改良植物的品质。2.动物基因工程:提高动物生长速度, 改善畜产品品质, 用转基因动物生产药物。3.基因治疗:把正常的外源基因导入病人体内
7、,使该基因表达产物发挥作用。(四)蛋白质工程的概念蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满意人类的生产与生活的需求。(基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质)转录 翻译 中学生物选修3第一章基因工程习题一单选题:每小题只有一个选项最符合题意。1下列有关基因工程的叙述,正确的是:( )ADNA连接酶的作用是将两个黏性末端的碱基连接起来B目的基因导入受体细胞后,受体细胞即发生基因重组C目的基因与载体结合的过程发生在细胞外D常运用的运载体有大肠杆菌, 噬菌体与动植物病毒等2下列关于基因工程的叙述,正
8、确的是:( )A基因工程常常以抗菌素抗性基因为目的基因B细菌质粒是基因工程常用的载体C通常用一种限制性内切酶处理含目的基因的DNA,用另一种处理运载体DNAD为育成抗除草剂的作物新品种,导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体细胞3与“限制性核酸内切酶”作用部位完全相同的酶是:( )A反转录酶 BRNA聚合酶 CDNA连接酶 D解旋酶4限制酶的作用事实上就是把DNA中某些化学键打断,一种能专一识别GAATTC的限制酶,断裂的化学键是:( )AG与A之间的氢键 BG与C之间的氢键CA与T之间的氢键 D鸟嘌呤脱氧核苷酸与腺嘌呤脱氧核苷酸之间的键5下面图中a, b, c, d代表的结构不正确的是:( )
9、Aa质粒DNABb限制性内切酶 CcDNA聚合酶Dd目的基因6下列哪一项不是基因工程运载体必需具备的条件( )A能在宿主细胞中复制并保存 B具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接C具有标记基因,便于进行筛选 D是环状形态的DNA分子7目的基因与运载体结合所需的条件是:( )被同一种限制酶切割 运载体具有标记基因 用RNA聚合酶连接 用DNA连接酶连接 用四种脱氧核苷酸作原料 ATP供应能量A B C D8苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞是否已表达,其检测方法是:( )A是否有抗生素抗性 B是否能检测到标记基因C是否有相应的性状 D是否能分别到目的基因11下列不行作为基因工程中的标记基因的是
10、:( )A抗性基因 B发光基因 C有色基因 D贮藏蛋白的基因12下表关于基因工程中有关基因操作的名词及对应的内容,正确的组合是:( )供体剪刀针线运载体受体A质粒限制性内切酶DNA连接酶供应目的基因的生物大肠杆菌等B供应目的基因的生物的生物DNA连接酶限制性内切酶质粒大肠杆菌等C供应目的基因的生物限制性内切酶DNA连接酶质粒大肠杆菌等D大肠杆菌等DNA连接酶限制性内切酶供应目的基因的生物 质粒131987年,美国科学家将萤火虫的萤光素基因转入烟草植物细胞,获得高水平的表达。长成的植物通体光亮,堪称自然界的奇迹。这一探讨成果表:( )萤火虫与烟草植物的DNA结构基本相同 萤火虫与烟草植物共用一套
11、遗传密码烟草植物体内合成了萤光素 萤火虫与烟草植物合成蛋白质的方式基本相同A与 B与 C与D14人们常用DNA进行亲子鉴定。其原理是:从被测试者的血滴或口腔上皮提取DNA,用限制性内切酶将DNA样本切成特定的小片段,放进凝胶内,用电泳推动DNA小片段分别,再运用特殊的DNA“探针”去找寻特定的目的基因。DNA“探针”与相应的基因凝合在一起,然后,利用特殊的染料在X光下,便会显示由DNA探针凝合于一起的黑色条码。被测试者这种肉眼可见的条码很特殊,一半与母亲的吻合,一半与父亲的吻合。反复几次过程,每一种探针用于找寻DNA的不同部位形成独特的条码,用几组不同的探针,可得到超过99.9%的父系辨别率。
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