蜜环菌浓缩液生产工艺.docx

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1、蜜环菌浓缩液生产工艺1、菌种培育1.1、 母种（试管种）培育取蜜环菌 Armillaria mellea(Vahl. ex Fr. )QueL 保藏菌株,用PDA培育基（马铃薯200g煮熟过滤，蔗糖20g,硫酸镁0.75g,磷 酸二氢钾0.75g,琼脂20g,配置1000ml）培育。灭菌条件：11（TC,O.1MP,灭菌30分钟。培育温度26-28C,培育周期7-10天。1.2、 摇床扩大培育（液体菌种培育）取培育好的母种（试管种），转接于三角瓶液体摇床培育，培育基为PDA培育基不加琼脂，500 ml三角瓶装量250-300inl。接种（母种）后于摇床上110n/m振荡培育。灭菌条件：11（T

2、C,O.1MP,灭菌30分钟。培育温度26-28C,培育周期3-4天。1.3、 种子罐培育培育好的三角瓶液体菌种转接于种子罐进行发酵培育，培育基同 液体菌种培育基。灭菌条件:110,0. IMP, 2小时。培育温度26-28C,培育周期4-6天。1.4、 发酵培育基：麦秋200 g,玉米粉10 g,蔗糖20 g,酵母粉10 g,水1000 go将60%体积的培育基置发酵罐中，灭菌，将种子罐菌种转接于发 酵罐内进行发酵培育，待发酵液变为紫褐色，由稠变稀，局部菌丝开 头自溶，菌丝颗粒变碎，pH值降至5. 25.6,罐内亮度开头减弱， 即可出罐。灭菌条件：121,0. IMP, 2小时。培育温度26

3、-28C,培育周期6-7天。2、 滤过培育好的发酵液，板框压滤。3、 浓缩将上述滤液置真空减压浓缩罐内，减压浓缩至相对密度1. 18（20）o4、 检验。4.1 性状 本品为棕褐色粘稠液体，味微酸、苦、微甜。（无发酵 变质、长霉等现象）4.2 鉴别取本品2. 0ml,加甲醇10ml,密塞，时时振摇，浸渍1小时， 滤过，照薄层色谱法（中国药典2022年版一部附录W B）试验，吸 取上述溶液5 口1,点样于以竣甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层 板上，以正丁醇一乙酸乙酯（4： 2）为绽开剂，绽开，取出，晾干, 喷以10%磷铝酸乙醇溶液，在11（TC烘约10分钟，马上检视，应有蓝 色斑点。4. 2.2取本品约1.0ml,加水10ml,在水浴中加热溶解，过滤, 取滤液2ml,加5%a-蔡酚乙醇液数滴，摇匀，沿壁加入浓硫酸1ml, 在两液面交界处即显紫红色环。4.3检查 相对密度 本品的相对密度(中国药典2022年版一部附 录W A)应不低于1. 15 (20)o干净塑料桶包装，规格：25kg/桶。密环菌浓缩液工艺流程培育基的配置一灭菌一接种一发酵培育一发酵菌丝体一浸泡一过滤一真空浓缩一浓缩液排渣