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1、专题限时集训(十五)(限时:40分钟)1(2015全国卷)HIV属于逆转录病毒,是艾滋病病原体。回答下列问题:(1)用基因工程方法制备HIV某蛋白(目蛋白)时,可先提取HIV中_,以其作为模板,在_作用下合成_,获取该目蛋白基因,构建重组表达载体,随后导入受体细胞。(2)从受体细胞中分离纯化出目蛋白,该蛋白作为抗原注入机体后,刺激机体产生可与此蛋白结合相应分泌蛋白是_,该分泌蛋白可用于检测受试者血清中HIV,检测原理是_。(3)已知某种菌导致肺炎在健康人群中罕见,但是在艾滋病患者中却多发。引起这种现象根本原因是HIV主要感染和破坏了患者部分_细胞,降低了患者免疫系统防卫功能。(4)人免疫系统有
2、_癌细胞功能。艾滋病患者由于免疫功能缺陷,易发生恶性肿瘤。【解析】(1)HIV遗传物质是RNA,所以要想获得相应目基因,应以HIVRNA为模板,在逆转录酶作用下合成cDNA(或DNA)。(2)目蛋白注入机体后相当于抗原。在抗原刺激下,机体进行体液免疫,由浆细胞产生相应抗体(分泌蛋白),由于该抗体能与目蛋白(抗原)发生特异性结合,所以可通过抗体检测出有无目蛋白,从而确定体内有无HIV。(3)HIV主要攻击人体T(或T淋巴)细胞,从而降低机体免疫系统防卫功能。(4)癌细胞在机体中属于抗原,人体免疫系统能够监控和清除癌细胞。【答案】(1)RNA逆转录酶cDNA(或DNA)(2)抗体抗原抗体特异性结合
3、(3)T(或T淋巴)(4)监控和清除2(2014全国卷)植物甲具有极强耐旱性,其耐旱性与某个基因有关。若从该植物中获得该耐旱基因,并将其转移到耐旱性低植物乙中,有可能提高后者耐旱性。回答下列问题: 【导学号:15482076】(1)理论上,基因组文库含有生物_基因;而cDNA文库中含有生物_基因。(2)若要从植物甲中获得耐旱基因,可首先建立该植物基因组文库,再从中_出所需耐旱基因。(3)将耐旱基因导入农杆菌,并通过农杆菌转化法将其导入植物_体细胞中,经过一系列过程得到再生植株。要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达,应检测此再生植株中该基因_,如果检测结果呈阳性,再在田间试验中检测植株_是否
4、得到提高。(4)假如用得到二倍体转基因耐旱植株自交,子代中耐旱与不耐旱植株数量比为31时,则可推测该耐旱基因整合到了_(填“同源染色体一条上”或“同源染色体两条上”)。【解析】(1)基因组文库含有生物全部基因,而cDNA文库中含有生物部分基因。(2)植物甲具有极强耐旱性,其耐旱性与某个基因有关,若要从植物甲中获得耐旱基因,可首先建立该植物基因组文库,包含该生物所有基因,然后再从中筛选出所需耐旱基因。(3)若从植物甲中获得该耐旱基因,并将其转移到耐旱性低植物乙中,通常采用方法是农杆菌转化法。将耐旱基因导入植物乙体细胞后,经过植物组织培养得到再生植株。要确认该耐旱基因是否在再生植株中正确表达,应检
5、测该耐旱基因是否合成了相应蛋白质,即检测此再生植株中该基因表达产物,如果检测结果呈阳性,说明已经合成了相应蛋白质,这时再进行个体生物学检测,即在田间试验中检测植株耐旱性是否得到提高。(4)假如用得到二倍体转基因耐旱植株自交,子代中耐旱和不耐旱植株数量比为31,符合基因分离定律,说明得到二倍体转基因耐旱植株为杂合子,因此可推测该耐旱基因只整合到了同源染色体一条上。【答案】(1)全部部分(2)筛选(3)乙表达产物耐旱性(4)同源染色体一条上3(2014海南高考)下图是将某细菌基因A导入大肠杆菌内,制备“工程菌”示意图。据图回答:(1)获得A有两条途径:一是以AmRNA为模板,在_酶催化作用下,合成
6、互补单链DNA,然后在_作用下合成双链DNA,从而获得所需基因;二是根据目标蛋白质_序列,推测出相应mRNA序列,然后按照碱基互补配对原则,推测其DNA_序列,再通过化学方法合成所需基因。(2)利用PCR技术扩增DNA时,需要在反应体系中添加有机物质有_、_、4种脱氧核糖核苷三磷酸和耐热性DNA聚合酶,扩增过程可以在PCR扩增仪中完成。(3)由A和载体B拼接形成C通常称为_。(4)在基因工程中,常用Ca2处理D,其目是_。【解析】(1)利用逆转录法合成目基因过程是:以mRNA为模板,在逆转录酶催化作用下合成单链DNA,然后在DNA聚合酶作用下,合成双链DNA分子;根据蛋白质工程合成目基因过程是
7、:根据目标蛋白质氨基酸序列,推测相应mRNA序列,然后按照碱基互补配对原则,推测DNA中脱氧核苷酸排列顺序,通过化学方法合成。(2)PCR过程中需要酶、底物、模板、引物和能量等条件。(3)目基因和运载体结合,形成重组DNA(基因表达载体)。(4)在利用大肠杆菌做受体细胞时,需要先用Ca2处理,使之成为感受态细胞,有利于其吸收重组DNA分子。【答案】(1)逆转录DNA聚合酶氨基酸脱氧核苷酸(2)引物模板DNA(3)重组DNA(4)提高受体细胞转化率4(2012课标卷)根据基因工程有关知识,回答下列问题:(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生片段,其末端类型有_和_。(2)质粒运载体用EcoR切割
8、后产生片段如下:AATTCGGCTTAA为使运载体与目基因相连,含有目基因DNA除可用EcoR切割外,还可用另一种限制性内切酶切割,该酶必须具有特点是_。(3)按其来源不同,基因工程中所使用DNA连接酶有两类,即_DNA连接酶和_DNA连接酶。(4)反转录作用模板是_,产物是_。若要在体外获得大量反转录产物,常采用_技术。(5)基因工程中除质粒外,_和_也可作为运载体。(6)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理大肠杆菌作为受体细胞,原因是_。【解析】限制性内切酶切割DNA分子形成末端通常有两种,即黏性末端和平末端。为使运载体和目基因连接,二者必须具有相同黏性末端,因而当使用除
9、EcoR之外其他酶进行切割时,应该产生相同黏性末端。DNA连接酶来源有两个:一是大肠杆菌,二是T4噬菌体。反转录是由RNA形成DNA过程,获得大量反转录产物时常用PCR扩增技术。基因工程常用运载体是质粒,除此以外,噬菌体和动植物病毒也可作为运载体。如果用大肠杆菌作受体细胞,必须用钙离子处理,使其处于感受态(此状态吸收外源DNA能力增强)。【答案】(1)黏性末端平末端(2)切割产生DNA片段末端与EcoR切割产生相同(3)大肠杆菌T4(4)mRNA(或RNA)cDNA(或DNA)PCR(5)噬菌体动植物病毒(6)未处理大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)能力极弱5(2014全国卷)某研究者用抗原(A)
10、分别免疫3只同种小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体效价(能检测出抗原抗体反应血清最大稀释倍数),结果如下图所示。若要制备杂交瘤细胞,需取免疫后小鼠B淋巴细胞(染色体数目40条),并将该细胞与体外培养小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目60条)按一定比例加入试管中,再加入聚乙二醇诱导细胞融合,经筛选培养及抗体检测,得到不断分泌抗A抗体杂交瘤细胞。回答下列问题:(1)制备融合所需B淋巴细胞时,所用免疫小鼠血清抗体效价需达到16 000以上,则小鼠最少需要经过_次免疫后才能有符合要求。达到要求后X、Y、Z这3只免疫小鼠中,最适合用于制备B淋巴细胞是_小鼠,理由是_。(2)细
11、胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合细胞和杂交瘤细胞外,可能还有_,体系中出现多种类型细胞原因是_。(3)杂交瘤细胞中有_个细胞核,染色体数目最多是_条。(4)未融合B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活,原因是_。【解析】(1)据图分析可知,第四次注射后X、Y、Z小鼠血清抗体效价几乎都达到16 000以上,小鼠Y血清抗体效价最高,最适合用于制备单克隆抗体。(2)融合体系中除了未融合细胞和杂交瘤细胞之外,还有骨髓瘤细胞自身融合细胞和B淋巴细胞自身融合细胞。细胞融合是随机,并且不可能所有细胞都融合,故体系中会出现多种类型细胞。(3)动物细胞融合后形成是具有原来两个或多个细胞遗传信息单核细胞。杂
12、交瘤细胞细胞核中染色体数目为4060100条。(4)正常细胞分裂次数是有限,且经过免疫B淋巴细胞高度分化,不能无限增殖,而是经多次传代培养后逐渐衰老死亡。【答案】(1)4YY小鼠血清抗体效价最高(2)B淋巴细胞相互融合形成细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成细胞细胞融合是随机,且融合率达不到100%(3)1100(4)不能无限增殖6下图是利用现代生物技术改良草莓品系过程:(1)将野生绿色草莓叶片离体组织培养成四倍体试管苗过程,体现了植物细胞_性,此过程中秋水仙素作用机理是_。(2)过程中欲获得抗虫草莓,可从蛋白酶抑制剂基因、生长素诱导基因中选择_作为目基因,通常用_方法导入受体细胞,基因表达载体除包括
13、目基因外,还必须有_及标记基因等。(3)过程可以先用花药离体培养分别获得抗虫草莓和凤梨草莓单倍体,再利用_技术获得同时具凤梨风味和抗虫特性六倍体草莓,该技术常用酶有_,常用化学诱导剂是_。【解析】(1)将野生绿色草莓叶片离体组织培养成四倍体试管苗过程,属于植物组织培养,体现了植物细胞全能性,此过程中秋水仙素作用机理是抑制纺锤体形成。(2)蛋白酶抑制基因表达蛋白酶抑制剂能阻断或降低蛋白酶活性,使昆虫不能正常消化食物中蛋白质,还会引起害虫厌食反应,而生长素诱导基因表达产物对害虫无作用,所以要获得抗虫草莓可选择蛋白酶抑制剂基因作为目基因。通常用农杆菌转化方法将此目基因导入受体细胞,基因表达载体除包括
14、目基因外,还必须有启动子、终止子及标记基因等。(3)欲利用抗虫草莓(4N)和凤梨草莓(8N)单倍体来获得具凤梨风味和抗虫特性六倍体草莓,可利用植物体细胞杂交技术,该技术常用酶有纤维素酶和果胶酶,常用化学诱导剂是聚乙二醇。【答案】(1)全能抑制纺锤体形成(从而引起细胞内染色体数目加倍)(2)蛋白质抑制剂基因农杆菌转化法启动子、终止子(3)植物体细胞杂交纤维素酶和果胶酶聚乙二醇7(2016银川市一模)现有两种同科不同属农作物,甲作物高产不耐盐,乙作物低产但耐盐。欲培育出既高产又耐盐植株,以适应于盐碱地栽培。请回答下面问题:(1)采用_(填“杂交”、“嫁接”或“转基因”)方法可以达到上述目,这种育种
15、方法优点是_。(2)采用细胞工程育种方法如下:杂种细胞愈伤组织胚状体目植株甲、乙原生质体经诱导融合完成标志是_。以胚状体为材料,经过人工薄膜包装得到人工种子,在适宜条件下同样能够萌发成幼苗,与天然种子相比,人工种子具有哪些显著优点?_(请举出1条)。动物细胞工程应用较广泛是单克隆抗体制备,单克隆抗体最主要优点是_。单克隆抗体应用主要有两个方面,一个是作为_试剂,能准确地识别各种抗原物质细微差别,并跟一定抗原发生_。另一方面可以用于_和运载药物。【解析】(1)由于不同种生物之间存在生殖隔离,因此不能采用杂交法;由于嫁接属于无性繁殖,该方法只能保留嫁接上去接穗优良性状,因此不能采用嫁接法;所以,培
16、养出既高产又耐盐植株,需要用转基因方法,这种方法能定向改变生物性状。(2)甲、乙原生质体经诱导融合完成标志是形成新细胞壁。与天然种子相比,人工种子具有优点有:生产不受季节限制、不会出现性状分离、能保持优良品种遗传特性、方便贮存和运输等。单克隆抗体最主要优点是特异性强,灵敏度高,并可大量制备。单克隆抗体应用主要有两个方面,一个是作为诊断试剂,能准确地识别各种抗原物质细微差别,并跟一定抗原发生特异性反应,另一方面,可以用于治疗、预防疾病和运载药物。【答案】(1)转基因能定向改变生物性状(2)形成新细胞壁生产不受季节限制、不会出现性状分离、能保持优良品种遗传特性、方便贮存和运输(写出任一合理答案均得
17、分)特异性强,灵敏度高,并可大量制备诊断特异性反应治疗、预防疾病8(2016大庆一中三模)下面是利用奶山羊乳腺生物反应器制备药用白蛋白流程图,请回答下列问题:(1)若要大量获得目基因,可使用_扩增白蛋白基因,通过构建重组表达载体包括目基因、启动子、终止子和_、复制原点等部分。该重组表达载体导入受精卵性染色体组成应为_。(2)如果需要通过采集到更多卵子,常用激素是_;通过采集精子需_后才能进行受精作用。(3)在体外培养受精卵时,除了给予一定量O2以维持细胞呼吸外,还需要提供_(气体)以维持_。(4)为使能成功进行,需要对奶山羊C进行_处理,使之与供体生理状况保持相同。【解析】(1)若已知目基因碱基序列,一般采用PCR扩增获取目基因。基因表达载体包括目基因、乳腺蛋白基因启动子、终止子、标记基因等部分。只有母羊才能产奶,因此该重组表达载体导入受精卵性染色体组成应为XX。(2)对供体母畜注射促性腺激素可促使其超数排卵。采集精子需要经过获能处理才能参与受精。(3)在体外培养受精卵时,除了给予一定量O2以维持细胞呼吸外,还需要提供CO2以维持培养液pH。(4)为了使胚胎移植能成功,需要对代孕奶山羊C进行同期发情处理,使之与供体生理状况保持相同。【答案】(1)PCR技术标记基因XX(2)促性腺激素获能(3)CO2培养液pH (4)同期发情
限制150内