高中生物211植物细胞工程的基本技术学案新人教版选修3.docx

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1、专题2 细胞工程2.11植物细胞工程基本技术学案 一、学习目标1、简述植物组织培养和植物体细胞杂交技术。2、尝试进行植物组织培养。学习重点1、植物组织培养原理和过程2、植物体细胞杂交原则学习难点植物组织培养实验二、学习过程(一)、细胞工程1概念：应用 和 原理和方法，通过 或 上操作，按照人意愿来改变细胞内 或获得 一门综合科学技术。2分类：根据操作对象不同，可分为 、 。（二）、植物细胞全能性1、植物细胞基本结构包括 、 、 、 。2、植物细胞主要增殖方式是 ，细胞分化是指 ，_原因是 _ 。3、全能性是指 ，表现为全能性原因是 。4在理论上，生物任何一个细胞都 ，但在生物生长发育过程中，细

2、胞并不表现 ，-而是分化成各种 。5特定时间和空间条件下，细胞中基因会有 地表达出各种 ，分化形成不同细胞，从而构成生物体不同 。（三）、植物组织培养技术1原理：植物细胞具有 ，具有某种生物全部遗传信息任何一个细胞，都具有发育成 潜能。2过程离体植物 _ 组织幼根和芽或胚状体 完整植株。3细胞脱分化：已 细胞经过诱导后，失去其特有 而转变成未分化细胞过程。4植物组织培养：在 和 条件下，将 植物器官、组织、细胞，培养在人工配制培养基上，给予适宜培养条件，诱导其产生 、丛芽，最终形成完整植株。（四）、胡萝卜组织培养1、实验原理 生物体细胞一般都是由受精卵经过有丝分裂形成，因而都含有该生物全套遗传

3、信息，都具有发育成完整个体潜能。因此，植物体根、茎、叶细胞都具有 ，在一定营养和激素条件下，可以脱分化形成 。将愈伤组织转接到含有不同激素成分培养基上，就可以诱导其再分化生成胚状体或丛芽，进而发育成 。2、实验步骤将 用自来水充分洗净，削去外皮，并切成段。用酒精棉球擦手 。在超净工作台(或接种箱)上将胡萝卜段用酒精溶液消毒30s后，立即用 清洗23次，再用 处理30min后，立即用无菌水清洗23 ( ) 次。用 滤纸吸去胡萝卜段表面水分。然后，在 瓷砖上，用无菌解剖刀将胡萝卜段切成1 cm厚横切片，再选取有 部位，切取1 cm。左右小块。将 接种到培养基上，用锡箔纸封盖瓶口，并用橡皮筋扎紧。然

4、后，在培养瓶上贴上标签，写明材料名称、接种日期和小组号。 将接种后胡萝卜组织块，放在 恒温避光条件下培养。4d后，检查培养材料污染情况；14d后，观察愈伤组织生长状况。然后，在恒温箱中继续避光培养。在培养过程中，注意定期观察和记录愈伤组织生长情况。培养一段时间后，将生长良好 转接到分化培养基上，培养一段时间后，胡萝卜愈伤组织就可以诱导出 。然后将试管苗移栽到大田，培养成 。3、注意事项外植体选择与制备 选择外植体时，由于外植体脱分化难易因植物种类、器官来源及生理状况不同而有很大差异，因此，选择哪些作为外植体应该注意。一般来讲，烟草、胡萝卜，植物花和幼嫩组织脱分化相对较易，而植物茎、叶和成熟老组

5、织则较难。 制备外植体首先要消毒，其次要选取有形成层部分，因形成层细胞易脱分化。 植物组织培养注意要点 培养基包括所有操作工具都应进行消毒和灭菌，谨防杂菌污染。 需在无菌条件下操作。 接种，继代培养转移都应在接种箱内进行。对于植物组织培养来说，光照条件非常重要，包括光照强度、时间和波长。但在由高度分化组织形成愈伤组织诱导阶段往往要暗培养，而在分化形成试管苗再生过程中一定要有光照。诱导形成愈伤组织阶段暗培养有利于细胞脱分化产生愈伤组织，如果在光照条件下容易分化产生维管等组织，不利于产生大量愈伤组织。由愈伤组织经细胞有丝分裂和分化形成试管苗过程中需要光照，原因是叶中叶绿素合成需要光照条件。（五）、

6、植物体细胞杂交技术1概念：不同种植物 ，在一定条件下融合成 ，并把杂种细胞培育成新 技术。2过程 离体细胞不同细胞原生质体原生质体融合 杂种细胞杂种植株。3植物体细胞杂交步骤： (1)去掉细胞壁，分离出有活力原生质体，目前最常用去细胞壁方法是酶解法，也就是在温和条件下用纤维素酶、果胶酶去除植物细胞细胞壁。 (2)不同植物体细胞原生质体融合，必须通过物理法和化学法来诱导融合。物理方法有：离心、振动、电激等促使原生质体融合。化学法是用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂来诱导融合。融合后再生出细胞壁。 (3)用植物组织培养方法进行培育，可得到杂种植株。如图 在此过程中需要注意问题有：植物体细胞杂交过程中，

7、植物细胞融合所依据生物学原理是细胞膜流动性；植物组织培养理论基础是细胞全能性。体细胞融合成功以后，既有AB型杂种细胞，还能形成AA型和BB型两种融合细胞，但只有AB型细胞是植物体细胞杂交所形成杂种细胞，因此在杂种细胞形成后还应有一个筛选过程。目前常用去除细胞壁方法是酶解法，保证了原生质体活性。植物体细胞杂交完成标志是新细胞壁形成。植物体细胞杂交过程仍以植物组织培养为前提，通过植物组织培养完成杂种植株培育过程。植物体细胞杂交最大突破是克服远缘杂交不亲和障碍，但是目前仍有许多理论和技术问题没有解决，离推广应用仍有一定距离。三、反思总结.本节学习了植物组织培养和植物体细胞杂交技术并尝试进行植物组织培

8、养。本节课课堂上师生主要解决植物组织培养、植物体细胞杂交技术过程、特点、以及学生学习过程中易忘、易混点等，最后进行当堂检测，课后进行延伸拓展，以达到提高课堂效率目。四、当堂检测l、有关全能性叙述，不正确是 A受精卵在自然条件下能使后代细胞形成完整个体，因此全能性最高 B生物体内细胞由于分化，全能性不能表达 C卵细胞与受精卵一样，细胞未分化，全能性很高 D植物细胞离体培养在一定条件下能表现出全能性2、在生物体内，细胞没有表现出全能性，而是分化为不同组织、器官，是因为 ( )A基因表达有选择性 B不同细胞内基因不完全相同C细胞丧失了全能性 D在个体发育不同时期，细胞内基因发生了变化3、植物体细胞融合完成标志是 ( ) A产生新细胞壁 B细胞膜发生融合 C细胞质发生融合 D细胞核发生融合4、用不同种植物两个体细胞融合成一个杂种细胞过程。该过程是指 ( ) A不同植物精子和卵细胞融合 B不同植物原生质体融合 C完整两个体细胞融合 D植物花粉细胞两两融合