体液免疫球蛋白测定 (2).ppt

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1、关于体液免疫球蛋白测定 (2)现在学习的是第1页，共28页 第一节 血清IgG、IgA、IgM 测定 一、血清IgG、IgA、IgM测定 二、血清IgG、IgA、IgM测定的临床意义 第二节 血清IgD和IgE测定 一、IgD测定及临床意义 二、IgE测定及临床意义 第三节 尿液及脑脊液Ig测定 一、尿液Ig测定及临床意义 二、脑脊液Ig测定及临床意义现在学习的是第2页，共28页 第四节 血清IgG亚类测定及临床意义 第五节 M蛋白测定及临床意义 第六节 轻链测定及临床意义 第七节 冷球蛋白的检测 思考题小结现在学习的是第3页，共28页v免疫球蛋白（免疫球蛋白（Ig）：抗体活性、化学结构与抗体

2、相似）：抗体活性、化学结构与抗体相似v重 链 性 质 ，重 链 性 质 ，I g分分5类 ：类 ：I g G ( )、I g A ( ) 、 I g M ( ) 、 IgD()、IgE()v轻链性质，轻链性质，Ig分分2型：型：、vIg占血浆蛋白总量：占血浆蛋白总量：20%v检测意义：反应机体的免疫功能、诊断疾病检测意义：反应机体的免疫功能、诊断疾病vIg含量：血清含量：血清 IgG、IgA、IgM：g/L、 IgD、IgE：mg/L 体液体液 IgG、IgA、IgM：mg/L 现在学习的是第4页，共28页第一节 血清IgG、IgA、IgM 测定 IgG是血清中含量最高的免疫球蛋白，是血液和细

3、胞外液中的主要抗体，也是机体再次免疫的主要抗体。 IgA分为血清型和分泌型，是参与黏膜局部免疫的主要抗体，主要存在于胃肠道和支气管分泌液、初乳、唾液和泪液中。 IgM是分子量最大的免疫球蛋白，是个体发育过程中最早合成和分泌的抗体，也是抗原刺激诱导的体液免疫应答中最早出现的抗体。现在学习的是第5页，共28页一、血清IgG、IgA、IgM测定测定方法 单向环状免疫扩散法 免疫浊度法现在学习的是第6页，共28页n原理原理n误差主要原因误差主要原因n评价评价 单向环状免疫扩散法示意图单向环状免疫扩散法示意图 原理 误差主要原因 评价 单向环状免疫扩散法现在学习的是第7页，共28页免疫浊度法 直接透射比

4、浊法 速率散射比浊法 注意点 评价现在学习的是第8页，共28页二、血清IgG、IgA、IgM测定的临床意义低Ig血症:先天性低Ig血症（免疫缺陷病）； 获得性低Ig血症(蛋白丢失). 高Ig血症:多克隆Ig增高（感染）； 单克隆Ig增高（免疫增殖病）.现在学习的是第9页，共28页第二节 血清IgD、IgE测定 正常人血清中IgD含量很低，膜结合型IgD(mIgD)构成BCR，是B细胞分化发育成熟的标志。 IgE是正常人血清中含量最少的免疫球蛋白，主要由黏膜下淋巴组织中的浆细胞分泌，为亲细胞抗体，引起I型超敏反应；与机体抗寄生虫免疫也可能有关。现在学习的是第10页，共28页一、 血清IgD测定及

5、临床意义 测定方法： 放射免疫分析法 化学发光免疫分析法 免疫比浊法 酶联免疫吸附法现在学习的是第11页，共28页 IgD：生物功能不详 增高：类风湿性关节炎、变态反应性疾病、 败血症、新生儿溶血病 降低：意义不大现在学习的是第12页，共28页二、 血清IgE测定及临床意义测定方法总IgE测定：放射免疫分析法 化学发光免疫分析法 免疫比浊法 酶联免疫吸附法特异性IgE测定：免疫斑点法 酶联免疫吸附法现在学习的是第13页，共28页IgE临床意义： 增高：变态反应性疾病、寄生虫感染、病毒感染、自身免疫性疾病。 降低：意义不大现在学习的是第14页，共28页第三节 尿液及脑脊液Ig测定 正常人尿液中的

6、Ig含量甚微，当机体的免疫功能异常或炎症反应引起肾脏疾病时，可导致肾小球滤过膜分子屏障破坏或电荷屏障受损，从而引起球蛋白及其他大分子蛋白质漏出增多。 生理情况下，Ig根据其分子量大小，通过血脑屏障的难易度不同，IgG、IgA、IgM在脑脊液中的浓度递减。病理状态时，脑脊液组分发生改变。现在学习的是第15页，共28页一、尿液Ig测定及临床意义尿液： 肾小球滤膜受损程度：选择性蛋白尿指数 增高有临床意义：肾病、免疫增殖病 可根据尿内Ig增高的类型帮助鉴别诊 断肾小球疾病的种类现在学习的是第16页，共28页二、脑脊液Ig测定及临床意义脑脊液： 血脑屏障受损程度：白蛋白商值、CSF-IgG指数 增高有

7、临床意义：多发性硬化症、中枢神经系 统感染现在学习的是第17页，共28页第四节 血清IgG亚类测定及临床意义Ig亚类：IgG1、IgG2、IgG3、IgG4，其含量依次下降测定方法： 单向免疫扩散法 免疫比浊法（常用） 放射免疫分析法 酶联免疫吸附法临床意义：IgG亚类的含量随年龄的不同而变化 免疫缺陷病降低明显 现在学习的是第18页，共28页第五节 M蛋白测定及临床意义 M蛋白： B淋巴细胞或浆细胞单克隆异常增殖产生的异常单克隆免疫球蛋白 临床上多见于多发性骨髓瘤、高丙种球蛋白血症、恶性淋巴瘤、重链病、轻链病等 现在学习的是第19页，共28页M蛋白测定蛋白区带电泳：经典方法 计算蛋白含量和百

8、分比免疫比浊法： 免疫球蛋白定量 准确性高、快速免疫电泳： M蛋白分型免疫固定电泳： M蛋白分型及鉴定，分辨 率高现在学习的是第20页，共28页GAMIgG-型M蛋白Marker 免疫固定电泳模式图现在学习的是第21页，共28页第六节 轻链测定及临床意义本周蛋白的检测 样本：尿液 方法：免疫电泳、加热沉淀（简便易行）Ig和-Ig定量检测 样本：尿液、血液 方法：单向免疫扩散法、免疫比浊法（常用，准确、快速）应用：M蛋白血症的分型及鉴定现在学习的是第22页，共28页第七节 冷球蛋白的检测冷球蛋白： 在低温下发生沉淀，加温后又复溶的免疫球蛋白 在低温时产生冷沉淀的机制尚不十分明确 多数冷球蛋白为免

9、疫复合物，其抗原可以是外源 性的，也可以是内源性的现在学习的是第23页，共28页冷球蛋白的类型及临床意义 I型：为单克隆冷球蛋白型，占25%40%;多见于免疫增生性疾病 型：单克隆和多克隆混合型冷球蛋白，占15%25%;多见于自身免疫性疾病 型：多克隆混合型冷球蛋白，约占50% ;多见于自身免疫性疾病以及感染性疾病 现在学习的是第24页，共28页1.1.免疫应答主要分为哪几个阶段？免疫应答主要分为哪几个阶段？2.2.什么是免疫球蛋白什么是免疫球蛋白? ?其分子基本结构其分子基本结构? ?3.3.免疫球蛋白分类及亚类免疫球蛋白分类及亚类? ?4.4.血清免疫球蛋白测定方法有哪些血清免疫球蛋白测定

10、方法有哪些? ?5.5.比较单向免疫扩散法和速率散射比浊法优缺点。比较单向免疫扩散法和速率散射比浊法优缺点。6.6.免疫球蛋白免疫球蛋白IgGIgG、IgAIgA、IgMIgM测定有何临床意义？测定有何临床意义？思考题现在学习的是第25页，共28页7.7.免疫球蛋白免疫球蛋白IgGIgG亚类测定有何临床意义？亚类测定有何临床意义？8.8.单向免疫扩散测定中有哪些主要影响因素？单向免疫扩散测定中有哪些主要影响因素？9.9.如何保证速率散射比浊法测定结果准确？如何保证速率散射比浊法测定结果准确？10.10.如何评估肾小球滤过膜破坏程度？如何评估肾小球滤过膜破坏程度？11.11.如何判定血脑屏障受损

11、程度？如何判定血脑屏障受损程度？12.12.如何正确选择测定如何正确选择测定M M蛋白的实验项目蛋白的实验项目? ?现在学习的是第26页，共28页 n免疫球蛋白是由浆细胞所产生能与相应抗原特异性免疫球蛋白是由浆细胞所产生能与相应抗原特异性结合的球蛋白结合的球蛋白n分为分为IgG IgG 、IgAIgA、IgMIgM、IgEIgE和和IgDIgD五类，其相应重链分五类，其相应重链分别称为别称为链、链、链、链、链、链、链和链和链链n轻链分为轻链分为型和型和型，两型轻链无功能差异型，两型轻链无功能差异n免疫球蛋白定量测定方法：免疫球蛋白定量测定方法： 单向环状免疫扩散法、火箭免疫电泳法、单向环状免疫扩散法、火箭免疫电泳法、 ELISAELISA、免疫比浊法、放射免疫分析法、免疫比浊法、放射免疫分析法小结现在学习的是第27页，共28页感谢大家观看现在学习的是第28页，共28页