免疫组化技术 (2).ppt

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1、关于免疫组化技术 (2)课件现在学习的是第1页，共33页 组织化学：组织化学：现在学习的是第2页，共33页现在学习的是第3页，共33页现在学习的是第4页，共33页现在学习的是第5页，共33页现在学习的是第6页，共33页现在学习的是第7页，共33页现在学习的是第8页，共33页现在学习的是第9页，共33页现在学习的是第10页，共33页现在学习的是第11页，共33页现在学习的是第12页，共33页 现在学习的是第13页，共33页加过氧化物酶标定的链菌素亲生物素，加过氧化物酶标定的链菌素亲生物素，37370 0C C，30min30min；以上每步后均用以上每步后均用PBSPBS液洗液洗3 33min3

2、min；用过氧化物酶基质液（用过氧化物酶基质液（DABDAB基质液）显色基质液）显色5 515min15min。在光。在光镜下观察。镜下观察。自来水冲洗，苏木素浅染，自来水冲洗还蓝，自来水冲洗，苏木素浅染，自来水冲洗还蓝， 梯度梯度酒精脱水，干燥，二甲苯透明，中性树胶封固。酒精脱水，干燥，二甲苯透明，中性树胶封固。现在学习的是第14页，共33页现在学习的是第15页，共33页多聚多聚-L-L-赖氨酸；赖氨酸；硫酸铬钾明胶液。硫酸铬钾明胶液。现在学习的是第16页，共33页现在学习的是第17页，共33页 过高，过低均会导致阴性结果。过高，过低均会导致阴性结果。 即用型抗体；即用型抗体； 浓缩型。浓缩

3、型。现在学习的是第18页，共33页 非特异性染色：非特异性染色： 原因：原因： 方法：方法：现在学习的是第19页，共33页对照：对照： 阳性对照：阳性对照：用一直抗原阳性的切片与待测标用一直抗原阳性的切片与待测标本同时进行免疫细胞化学染色，阳性对照应呈阳性结本同时进行免疫细胞化学染色，阳性对照应呈阳性结果，即为阳性对照。果，即为阳性对照。 阴性对照：阴性对照：用不含一直抗原的标本作对照，用不含一直抗原的标本作对照，实验结果为阴性，即为阴性对照。阴性对照中还实验结果为阴性，即为阴性对照。阴性对照中还包括空白对照、替代对照、吸收和抑制对照等，包括空白对照、替代对照、吸收和抑制对照等，用以排除假阳性

4、结果。用以排除假阳性结果。 现在学习的是第20页，共33页现在学习的是第21页，共33页 现在学习的是第22页，共33页淋巴细胞标记物淋巴细胞标记物：白细胞共同抗原（白细胞共同抗原（LCA, CD45LCA, CD45）：主要分布于）：主要分布于T, BT, B细胞，细胞， 单核细胞，粒细胞表面。单核细胞，粒细胞表面。CD20CD20： B B细胞标记物。细胞标记物。CD45ROCD45RO、CD3CD3：T T细胞标记物。细胞标记物。CD57CD57：为自然杀伤细胞的标记物。：为自然杀伤细胞的标记物。CD38CD38：为浆细胞的标记物。：为浆细胞的标记物。CD68CD68：主要标记各种组织中

5、的巨噬细胞。：主要标记各种组织中的巨噬细胞。现在学习的是第23页，共33页神经内分泌标记物：神经内分泌标记物：嗜铬素嗜铬素A A（Chromogranin, CgAChromogranin, CgA）：）： 存在于神经元，神经内分泌细胞及其肿瘤中。存在于神经元，神经内分泌细胞及其肿瘤中。突触素（突触素（Synaptophysin, SySynaptophysin, Sy）：）： 存在于神经元突触前囊泡膜上，肾上腺髓质细胞，存在于神经元突触前囊泡膜上，肾上腺髓质细胞， 神经内分泌细胞中。神经内分泌细胞中。髓磷脂硷性蛋白（髓磷脂硷性蛋白（Myelin basic protein, MBPMyeli

6、n basic protein, MBP）：）： 现在学习的是第24页，共33页激素及激素受体类标记：激素及激素受体类标记：雄激素受体（雄激素受体（Androgen receptor, ARAndrogen receptor, AR）：）：雌激素受体（雌激素受体（Estrogen receptor, EREstrogen receptor, ER）孕激素受体（孕激素受体（Progesterone receptor, PRProgesterone receptor, PR）：）：垂体激素：垂体激素： ACTH, GH, PRL, LH, TSHACTH, GH, PRL, LH, TSH 主要用

7、于垂体腺瘤的功能分类。主要用于垂体腺瘤的功能分类。降钙素（降钙素（Calcitotin, CTCalcitotin, CT）：）： 甲状腺旁细胞（甲状腺旁细胞（C C细胞）分泌。细胞）分泌。 现在学习的是第25页，共33页以上抗体及标记物主要用于疾病的病理诊断和鉴别诊断以上抗体及标记物主要用于疾病的病理诊断和鉴别诊断 其联合应用的作用和意义：其联合应用的作用和意义：Keratin Vimentin 上皮性肿瘤 Keratin 滑膜肿瘤 Vimentin 间皮肿瘤 上皮样肉瘤 癌肉瘤 现在学习的是第26页，共33页 Desor Actin 肌源性肿瘤肌源性肿瘤 CD34or F 血管性肿瘤血管性

8、肿瘤 Keratin S-100or MBP 神经鞘膜瘤神经鞘膜瘤Vimentin LCA 淋巴细胞淋巴细胞 AACT 骨肿瘤、纤维组织细胞肿瘤骨肿瘤、纤维组织细胞肿瘤 GFAP 胶质细胞肿瘤胶质细胞肿瘤 Keratin NSEor Sy Vimentin NF 节细胞神经母细胞瘤节细胞神经母细胞瘤现在学习的是第27页，共33页免疫组化用于病理诊断及鉴别诊断原则：免疫组化用于病理诊断及鉴别诊断原则：免疫组化用于病理诊断及鉴别诊断，必须以免疫组化用于病理诊断及鉴别诊断，必须以HEHE染色的染色的 形态学为基础，免疫组化只能作为辅助手段。不能把形态学为基础，免疫组化只能作为辅助手段。不能把 免疫组

9、化染色作为诊断的免疫组化染色作为诊断的“金标准金标准”。免疫组化对良、恶性的判断仅供参考。免疫组化对良、恶性的判断仅供参考。 免疫组化用于判断组织起源，分型，预后的估计。免疫组化用于判断组织起源，分型，预后的估计。 免疫组化染色不好或出现相互矛盾的结果时，以形态学为免疫组化染色不好或出现相互矛盾的结果时，以形态学为准。准。现在学习的是第28页，共33页电子显微镜技术：透射电镜电子显微镜技术：透射电镜现在学习的是第29页，共33页透射电镜透射电镜扫描电镜扫描电镜电子显微镜技术电子显微镜技术现在学习的是第30页，共33页透射电镜透射电镜扫描电镜扫描电镜现在学习的是第31页，共33页 现在学习的是第32页，共33页感谢大家观看8/21/2022现在学习的是第33页，共33页