动物细胞表达制备药用蛋白.ppt
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1、关于动物细胞表达制备药用蛋白现在学习的是第1页,共25页思考要制备出我们想要的蛋白,需要了解些什么,做些什么?现在学习的是第2页,共25页现在学习的是第3页,共25页NO.1现在学习的是第4页,共25页现在学习的是第5页,共25页现在学习的是第6页,共25页NO.2现在学习的是第7页,共25页现在学习的是第8页,共25页现在学习的是第9页,共25页现在学习的是第10页,共25页NO.3现在学习的是第11页,共25页现在学习的是第12页,共25页现在学习的是第13页,共25页基因载体的导入和高效表达基因载体的导入和高效表达工程细胞株的筛选工程细胞株的筛选现在学习的是第14页,共25页1) 基因载
2、体的导入基因载体的导入基因载体导入动物细胞基因载体导入动物细胞现在学习的是第15页,共25页现在学习的是第16页,共25页现在学习的是第17页,共25页真核生物细胞生产药用蛋白优点:真核生物细胞生产药用蛋白优点: 具有准确的转录后修饰功能,表达的糖基化药物蛋白在分子结构具有准确的转录后修饰功能,表达的糖基化药物蛋白在分子结构,理化特性最接近于天然蛋白分子;理化特性最接近于天然蛋白分子;具有产物胞外具有产物胞外分泌分泌功能,便于下游产物分离纯化;功能,便于下游产物分离纯化;具有重组基因的高效扩增和表达能力;具有重组基因的高效扩增和表达能力;具有贴壁生长特性,且有较高的耐受剪切力和渗透压能力,可以
3、进行悬浮培养,表达具有贴壁生长特性,且有较高的耐受剪切力和渗透压能力,可以进行悬浮培养,表达水水平较高;平较高;CHO(注射用重组人促红素(注射用重组人促红素)细胞属于成纤维细胞,很少分泌自身的内源蛋白,利于外源)细胞属于成纤维细胞,很少分泌自身的内源蛋白,利于外源蛋白的分离。蛋白的分离。因此,可以针对性的筛选细胞株因此,可以针对性的筛选细胞株现在学习的是第18页,共25页DHFR系统和系统和GS 系统系统2 2)高效表达工程细胞株的筛选)高效表达工程细胞株的筛选现在学习的是第19页,共25页现在学习的是第20页,共25页现在学习的是第21页,共25页每个双微体带有2-4 DHFR基因,双微体可以复制,但它们没有着丝粒,结果它们不能附着在有丝分裂的纺锤丝上,因此不能均等分离进入子细胞,是染色体外的微小染色体。现在学习的是第22页,共25页 谷氨酰胺合成酶(谷氨酰胺合成酶(GS)系统)系统现在学习的是第23页,共25页现在学习的是第24页,共25页感谢大家观看8/23/2022现在学习的是第25页,共25页
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