各种浓度各种PH的PBSTrisHCl缓冲液配制.docx
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1、一、PBS缓冲液1.1 母液的配制:0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水1.2不同PH值PBS配制各种PH值的 0.2M PBS(100ml)配方 : pH 0.2M NaH2PO4(ml) 0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.5 6.55.8 92 8 5.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 3
2、7.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 0.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.7以配制100ml 0.2M PBS为例,先配制母液,按照配方表分别取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4与81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4,混合即可。1.3 不同浓度PBS的配制只需将0.2M PBS按相应比例适当稀释 即可,如:0.1M PBS(PH=7.4) :取 500ml 0.2
3、M PBS,加水稀释至 1000ml 即可。0.01M PBS(PH=7.4):取50ml 0.2M PBS,加水稀释至 1000ml 即可。0.02M PBS(PH=7.4):取100ml 0.2 M PBS,加水稀释至 1000ml 即可。 若需要 NaCl的话,加入 NaCl 至0.9%(g/100ml)即可。二、Tris-HCl缓冲液 某一特定pH值的0.05mol/L Tris缓冲液的配制:将50ml 0.1mol/L Tris碱溶液与配方表中所示相应体积(单位:ml)的0.1mol/L HCl混合,加水将体积调至100ml 即可。(至于配制0.1M HCl 就是8.58ml浓盐酸用蒸馏水定容到1000ml啦)各种ph值的tris缓冲液的配制所需ph值(25)0.1mol/l HCl的体积/ml714577244773434744207540376385773667834579320802928.126.28.222.98.319.98.417.28.514.78.612.48.710.38.88.58.97.0第 4 页
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