一轮复习 浙科版 动物细胞工程 学案浙江专用.docx

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1、第35讲 动物细胞工程课标要求4.2.动物细胞工程包括细胞培养、核移植、细胞融合和干细胞 的应用等技术。考点一细胞培养是动物细胞工程的基础1.动物细胞培养概念：从动物体获得相关组织，分散成单个细胞后,在适宜环境下让细 胞生长和增殖的过程。(2)培养条件温度、pH 和湿度温度、pH 和湿度温度:细胞生K的最适宜温度是37 0.5 PH：大多数细胞适宜的pH为7.27.4气体2：细胞代谢所必需的95%空气和条件培养条件8：维持培养液中的pH短徵1混/0 I rt无菌、无 毒的条件对培养液和所有培养用具进行 无菌处理-在培养基中加入抗生素-在无菌环境下进行操作定期更换培养液,以便清除代 谢物营养营养

2、基本成分：水、无机盐、氨基酸、维生 素、糖类、生长因子等-培养基：天然培养基、合成培养基提醒1动物细胞培养一般用液体培养基，植物组织培养一般用固体培养基。2.原代培养原代培养原代培养细胞或组织离开有机体后的苴次培养鬻取材一解离细胞一培养电区贴附生长、接触抑制提醒解离细胞所用的酶是胰蛋白酶或胶原蛋白酶等。3.传代培养aA.假设a细胞和b细胞是植物细胞，需先去分化再诱导融合B. a细胞和b细胞之间的融合需要促融处理后才能实现C. c细胞的形成与a、b细胞膜的选择透过性有关D. c细胞将同时表达a细胞和b细胞中的所有基因解析：选B。假设a细胞和b细胞是植物细胞，需要用酶解法去掉细胞壁后再 诱导融合，

3、融合完成后的细胞再经脱分化和再分化培养，A错误；a细胞和b细 胞之间的融合需要一些特殊的诱导因素，B正确；c细胞的形成要经过细胞膜的 融合，与a、b细胞膜的流动性有关，C错误；c细胞内有a、b两细胞的遗传物 质，但不能同时表达a、b细胞中的所有基因，D错误。突破2单克隆抗体的制备及应用核心素养生命观念、社会责任3. （2022浙江选考预测）以下关于利用细胞融合技术生产单克隆抗体的表达, 错误的选项是（）A.注射特定的抗原后，从小鼠的脾脏中获取B淋巴细胞B. B淋巴细胞和骨髓瘤细胞能够融合依赖于细胞膜具有流动性C.使用聚乙二醇促进细胞融合时，聚乙二醇的浓度及处理时间会影响融合效果D.利用特定的选

4、择培养基可以筛选出能产生专一抗体的杂交瘤细胞解析：选D。制备单克隆抗体时，首先对小鼠注射特定的抗原，获得免疫小 鼠，然后从免疫小鼠的脾脏中获得B淋巴细胞，A正确；单克隆抗体的制备过 程中，B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合依赖于细胞膜的流动性，B正确；促融剂 的浓度和处理时间会影响细胞的融合效果，C正确；特定的选择培养基可以筛选 出杂交瘤细胞，但想要筛选出能产生专一抗体的杂交瘤细胞，还需要进行专一抗 体检脸，D错误。4. （2022丽水模拟）如图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程，有关叙述错误的选项是（）述错误的选项是（）甲班小鼠耳劈骨健瘤一乙尸细胞培养胃克体 抗单抗A.图中实验小鼠注射的甲是能与

5、抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原B.利用PEG、仙台病毒诱导和电脉冲诱导等方法可诱导细胞融合获得乙C.用特定的选择培养基对乙进行筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长D.丙需进行克隆化培养和抗体检测，经屡次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁解析：选C。用特定的选择培养基对乙进行筛选，融合的具有同种核的细胞和未融合的细胞均不能生长，只有杂交瘤细胞能生长，C错误。创设情原因分析类1.动物体细胞进行体外培养时,（填“需要”或“不需要”）脱分化过程，原因是答案：不需要高度分化的动物细胞分化的潜能变窄，失去发育成完整个体 的能力2 .哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，胚胎细胞 核

6、移植获得克隆动物的难度（填“大于”或“小于”）体细胞核移植，其 原因是 0答案：小于 胚胎细胞分化程度低，恢复全能性相对容易3 .假设经核移植获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的 角度分析其原因是。答案：卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响4 . B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的 细胞和杂交瘤细胞外，可能还有，体系中出现多种类型细胞的原因是答案：B淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞细胞融合是随机的，且融合率达不到1()0%5 .未融合的B淋巴细胞经屡次传代培养后都不能存活，原因是答案：其不能无限增殖开放思维类

7、6. 2020全国I , T38节选为研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠 甲为实验材料设计了以下实验流程。制备单细胞悬液写出以小鼠甲的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤:(2)为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。图中筛选1所采用的培养基属于,使用该培养基进行细胞培养的结果是 o图中筛选2含屡次筛选，筛选所依据的基本原理是(3)假设要使能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖，可采用的 方法有(答出2点即可)。答案：(1)取小鼠甲的脾脏用胰蛋白醵处理使其分散成单个细胞，加入培养 液制成单细胞悬液(2)选择培养基只有杂交瘤细胞能够生存抗原与抗体的反响具有特异

8、性(3)将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖；将杂交瘤细胞在体外培养色鱼将原培养瓶内的细胞别离开稀释后转到多个培养瓶中，在新的培养基中进行传代培养产泛指可传代的细胞细胞系 .箧连续培养下去的细胞系湍氤丕鹤连续培养下去的细胞系通过一定的选择或纯化方法，从原 里匕代培养物或细胞系中获得的县包传代培养细胞株殊性质的细胞特点一般具有恒定的染色体组型、病毒敏感性或抗性及我他生化特性整焉可连续屡次传代的细胞株类用细胞株益急可传代次数仃限的细胞株?WnciW4.细胞克隆些笆把一个单细胞从群体中别离出来单独培养,使之繁衍成一个新的细胞群体的技术些笆把一个单细胞从群体中别离出来单独培养,使之繁衍成一个新的细胞群体的

9、技术细胞克隆讪At木必须保证别离出来的细胞是一个而不是多2台个，即必须肯定所建成的克隆来源于单个经过克隆培养后的细胞群，由于来源于一 幽个共同的祖细胞，基因致一致.遗传性状 一均一，是研究遗传规律和生理特性的重要材料（1）制备肝细胞悬液时先用剪刀剪碎肝组织，再用胃蛋白酶处理.。（）肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO?刺激细胞呼吸。（） 动物细胞培养要定期更换培养液，其目的是防止细胞代谢产生的有毒物质危害细胞。（）（4）培养保存接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞。（）（5）动物细胞培养技术的原理是动物细胞的全能性。（）答案：X (2)X J (4)X (5)X1. （2022哈尔

10、滨离三模拟）以下图为动物细胞培养的基本过程示意图，相关表达错误的选项是（）A.容器A中放置的一般是幼龄动物的器官或组织，需要用胰蛋白酶将组织分散成单个细胞B.在D瓶中极少数细胞存活，是因为存活的细胞获得不死性，其遗传物质 未发生改变C.为保证培养条件无菌，除进行灭菌外，所有操作都需在无菌条件下完成 D.细胞培养时，需通入5%CO2,其主要作用是维持培养液的pH 答案：B2.培育肉是利用动物体内别离的成肌细胞或全能干细胞，采用动物细胞培 养技术培养出类似动物肌肉的肉丝，同时添加了人体所需的元素如铁、钙等，使 其营养更加丰富。以下相关表达不正确的选项是（）A.用胰蛋白酶处理肌肉组织，可以获得分裂能

11、力强的肌肉母细胞B.生物反响器内应控制温度适宜，并充入一定量的CCh保证细胞呼吸C.培养液中的支架为细胞提供了更多的附着面积，有利于细胞贴壁生长D. “人造牛肉”的培养有利于工业化生产，产品是真肉解析：选B。生物反响器内应控制温度适宜，并充入一定量的CCh以保证培 养液的pH, B错误。国同信胸BESES植物组织培养和动物细胞培养的比拟工程植物组织培养动物细胞培养原理细胞全能性、细胞增殖细胞增殖取材植物的细胞、组织或器官胚胎或出生不久的幼龄动物器官 或组织培养基成 分水、无机盐、有机营养成分、琼脂、植物激素等水、无机盐、氨基酸、维生素、 糖类、生长因子、抗生素、血清 等结果植株或大量细胞只能获

12、得大量细胞，不能得到生考点二通过细胞核移植克隆动物物个体相同点都需人工条件下的无菌操作；都需适宜的温度、pH等条件自主梳理1 .动物细胞核移植将体细胞核移入一个去核的卵母细胞中,并使其发育成动物仝住的过程。2 .克隆动物利用动物细胞核移植技术培育II；的动物。3 .开展历程(1)蛙肠上皮细胞和胚胎细胞核移植实验胚胎细胞核的移植成功率远直土成体细胞。(2)小鼠核移植实验低等动物细胞的全能性一般比高等动物组易住现。(3)克隆羊“多莉”高度分化的细胞经过一定技术处理，也可回复到类似受精卵时期的功能, 表现出令能性。在胚胎和个体发育中，细胞质具有调控细胞核发育的作用。4 .体细胞核移植过程图一细胞培养

13、一供体细胞、体细胞 I 、细胞重组注/衍细胞卵巢卵4核_去核卵/母细胞 生外一母细胞 草工.吐胚胎移植 代孕.生出与供体遗传物胫麻*母体一质基本相同的个体提醒核移植时应选MH中期的卵母细胞的原因(1)此类细胞体积大，易于操作；(2)卵黄多，营养物质丰富；(3)卵母细胞的 细胞质中存在激发细胞核全能性表达的物质。回 E3 回 03 (1)与“多莉”羊等克隆哺乳动物相关的技术有胚胎移植、细胞培养和核移 植。()(2)克隆植物和克隆动物都只具备一个亲本的遗传特性。()动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。()(4)选择MH中期的卵母细胞作为核移植的受体细胞的主要原因是该细胞大，显微操作方便。

14、()(5)通过核移植技术克隆动物还存在着成功率低、某些克隆动物早衰等问题。()(6)重组细胞具有发育成完整个体的能力。()(7)动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是梯度离心法。()答案：(1” (2)X (3)V (4)X (5)V (6) VXX1 .科学家培育克隆羊时，使用了三种供体细胞的细胞核，分别将这些细胞 核移入去核卵母细胞中，形成重组细胞，发育成重组胚胎，这些重组胚胎的发育 情况如下。供体细胞类型妊娠数/受体母羊数乳腺上皮细胞1/13胚胎成纤维细胞4/10早期胚胎细胞14/27以下相关分析不正确的选项是()A.早期胚胎细胞作为供体细胞时，妊娠成功率最高B.克隆羊的遗传信息与供体

15、细胞完全相同C.体细胞核移植难度高于胚胎细胞核移植D.重组细胞的发育与去核卵母细胞的细胞质有关答案：B2 . (2022南通高三模拟)为研究治疗性克隆技术能否用于帕金森病的治疗,科研人员利用人帕金森病模型鼠进行以下图实验，相关表达错误的选项是(鼠皮肤细胞 早期胚 胎培养一、诱导分化移植oz去核卵母细胞获取胚胎干细胞神经元A.过程中选择MH中期的卵母细胞有利于细胞核全能性恢复B.过程重组细胞培养依次经历了卵裂、桑意胚、原肠胚和囊胚等过程C.过程的关键是利用特定条件诱导胚胎干细胞相关基因表达D.过程对受体小鼠无需注射免疫抑制剂以抑制其细胞免疫功能解析：选B。过程重组细胞培养依次经历了卵裂、桑甚胚、

16、囊胚和原肠胚 等过程，B错误。3.胚胎干细胞也称为ES细胞，以下图是来自小鼠囊胚的ES细胞形成组织细胞的示意图。相关表达错误的选项是()内细胞团的细胞一脂肪细胞神经元4巨噬细胞一平滑肌细胞神经胶质细胞A.脂肪细胞、神经元等的形成是ES细胞分化的结果B.培养ES细胞的培养基中加入胰岛素等激素以提高形成率C. ES细胞不具有发育的全能性D.神经元和神经胶质细胞构成鼠的神经系统解析：选C。ES细胞具有发育的全能性，C错误。嗣扃唱磨。幅囱(1)克隆动物的重组细胞的细胞质基因来源于受体细胞，细胞核基因来源于 提供细胞核的亲本，其遗传物质来自2个亲本。(2)克隆动物绝大局部性状与供体动物相同，少数性状与提

17、供卵母细胞的动物相同，与代孕动物的性状无遗传关系。(3)动物体细胞核移植技术(克隆)从生殖方式的角度看属于无性生殖，重组细 胞相当于受精卵，需要动物细胞培养和胚胎工程技术的支持。考点三通过细胞融合可产生具有新特性的细胞1.细胞融合1.细胞融合细胞融合梃念在一些融合因子的作用下,将两个或两个以 一上的细胞合并成二个细胞的技术方法聚乙二静处理、电流刺激或病毒诱导等直义成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤等的一重要手段幽培育单克隆抗体2.单克隆抗体(1)概念：由一个B淋巴细胞增殖形成的细胞群所产生的单一型抗体分子。制备原理B淋巴细胞的特点：每一种B淋巴细胞只产生种特异的抗体。骨髓瘤细胞的特点：具有无限繁

18、殖能力。寿命有限的B淋巴细胞与具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合,经筛选 后就可以获得既能产生特异性抗体，又能在正常培养条件下进行无限增殖的杂交 瘤细胞。(3)制备过程单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体(4)优点：纯度高,可大量制备，在应用时具有拄异性强、灵敏度高的特点。(5)应用将其作为特异性的探针,研究相应抗原蛋白的结构、细胞学分布及功能。用单克隆抗体可以快捷、准确地诊断和治疗一些疾病。将抗癌药物连接到专门识别某种肿瘤细胞的单克隆抗体上，单克隆抗体就 会像“生物导弹” 一样携带抗癌药物准确地聚集到肿瘤细胞，专一地杀死肿瘤细 胞，这样就防止了抗癌药物在消灭肿瘤细胞的同时对人体正常细胞的损

19、伤。(1)植物原生质体融合与动物细胞融合的原理是相同的。()(2)动物细胞融合过程中既有细胞膜融合也有核的融合。()(3)跟植物原生质体融合相比，动物细胞融合特有的诱导因素有聚乙二醇、 病毒。()(4)动物细胞融合后的杂交细胞仍然是二倍体细胞。()(5)单克隆抗体的制备首先要从小鼠体内提取B淋巴细胞。()(6)单克隆抗体制备过程中需要经过筛选才能获得所需的杂交瘤细胞。()(7)杂交瘤细胞进行体内培养，更容易控制培养条件。()答案：(1)J (2)7 (3)X (4)X (5)X (6) VJ1.植物体细胞杂交和动物细胞融合的比拟2.血清抗体与单克隆抗体的比拟比拟工程植物体细胞杂交动物细胞融合原

20、理细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性、细胞增殖融合前处理除去细胞壁使细胞分散开相关酶纤维素酶和果胶酶胰蛋白酶或胶原蛋白酶诱导方法电刺激、离心振荡、聚乙二醇等PEG融合法、电脉冲诱导、激 光融合、病毒诱导等结果杂种植株杂交细胞应用培育植物新品种等主要用于制备单克隆抗体意义突破远缘杂交不亲和的障碍，打破了生殖隔离，扩展了杂交的亲 本组合名称产生特点血清抗体由浆细胞分泌一般从血清中别离，产量低、纯度低、特异 性差单克隆 抗体由杂交瘤细胞分泌特异性强，灵敏度高，能大量制备，纯度高3.单克隆抗体制备过程中两次筛选的方法及目的工程第一次筛选第二次筛选筛选原因诱导融合后会得到多种杂交细 胞，另外还有

21、未融合的细胞由于小鼠在生活中还受到其他 抗原的刺激，所以经选择培养获 得的杂交瘤细胞中有能产生其 他抗体的细胞筛选方法用特定的选择培养基筛选：在该 培养基上，未融合的细胞和同种 细胞融合后形成的细胞（“BB”细胞、“瘤一瘤”细 胞）都会死亡，只有融合的杂交瘤 细胞（“B瘤”细胞）才能生长用多孔培养皿培养，在每个孔只 有一个杂交瘤细胞的情况下开 始克隆化培养和抗体检测，经多 次筛选得到能产生特异性抗体 的细胞群筛选目的得到杂交瘤细胞得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞突破1动物细胞融合技术核心素养生命观念1 .将患者肿瘤细胞与B淋巴细胞“杂交”制成的新型肿瘤疫苗，能使人体 免疫系统识别并杀伤肿瘤细胞，有效控制肿瘤的转移和复发，为癌症治疗增添了 新手段。以下说法错误的选项是（）A.细胞融合前，可以用胰蛋白酶处理肿瘤组织B.该技术突破了有性杂交方法的局限性，使细胞远缘杂交成为可能C.该技术可采用灭活病毒作为动物细胞融合的诱导剂D.两种细胞诱导融合完成后，可直接将融合细胞进行大规模培养解析：选D。两种细胞诱导融合完成后，还需进行筛选，不可直接将融合细 胞进行大规模培养，D错误。2 .以下图为细胞融合的示意图，以下表达正确的选项是（）