医学微生物学重点知识.doc

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1、医学微生物学绪论1 微生物：存在于自然界的一大群体形微小、结构简单、肉眼直接看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数千倍。甚至数万倍才能观察到的微小生物。2 微生物的分类： 种类细胞结构核酸特点代表非细胞型微物无典型细胞结构构DNA或RNA，两者不同时存在无产生能量的酶系统，只能在活细胞内生长增值病毒原核细胞型微生物无核膜、核仁，仅有核糖体DNA和RNA古生菌、细菌（细菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体和放线菌）真核细胞型微生物细胞核分化程度很高，有核膜核仁，细胞器完整DNA和RNA真菌3、病原微生物：少数具有致病性，能引起人类、植物病害的微生物。 机会致病性微生物：在正常情况下

2、不致病，只有在特定情况下导致疾病的微生物。4，郭霍法则：特殊的病原菌应在同一种疾病中查见，在健康人中不存在；该特殊病原菌能被分离培养得纯种；该纯培养物接种至易感动物，能产生同样病症；自人工感染的实验动物体内能重新分离得到该病原菌纯培养。5、汤飞凡6.诺贝尔奖第一篇 细菌学第一章 细菌的形态与结构第一节 细菌的大小与形态1、观察细菌常采用光学显微镜，一般以微米为单位。2、按细菌外形可分为：球菌（双球菌、链球菌、葡萄球菌、四联球菌、八叠球菌） 杆菌（链杆菌、棒状杆菌、球杆菌、分枝杆菌、双歧杆菌）螺形菌（弧菌、螺菌、螺杆菌）第二节 细菌的结构1、基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质 特殊结构：荚膜

3、、鞭毛、菌毛、芽胞2、 革兰染色法将细菌分为：革兰阳性菌（G+）：显紫色；革兰阴性菌（G-）：显红色。两类细菌细胞壁共有组分为肽聚糖，为原核生物所特有。聚糖骨架由N-乙酰葡糖胺和N-乙酰胞壁酸交替排列，经-1,4糖苷键联结而成。3、 革兰阳性菌细胞壁特有组分为磷壁酸（膜磷壁酸和壁磷壁酸） 磷壁酸的功能：维持菌体内离子平衡，稳定细胞壁 抗原性强，是阳性菌表面特有抗原 与细菌的粘附作用有关4、G-菌特有组分外膜 脂蛋白、脂多糖（LPS）【脂质A，核心多糖，特异多糖】、脂质双层、脂多糖（LPS）：即G-菌的内毒素。脂质A：内毒素的毒性和生物学活性的主要成分，无种属特异性，不同细菌的脂质A骨架基本一致

4、，故不同细菌产生的内毒素的毒性作用均相似。核心多糖：有属特异性，位于脂质A的外层。特意多糖：即G-菌的菌体抗原（O抗原），是脂多糖的最外层。 在G-菌的细胞膜与外膜的脂质双层之间有一空隙称为周浆间隙5.细胞壁结构革兰阳性菌 G+革兰阴性菌 G-肽聚糖组成由聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥构成坚韧三维立体结构由聚糖骨架、四肽侧链构成疏松二维平面网络结构肽聚糖厚度2080nm1015nm肽聚糖层数可达50层仅12层肽聚糖含量占胞壁干重5080%仅占胞壁干重520%磷壁酸有无外膜无有6、细胞壁的功能：维持菌体固有的形态 保护细菌抵抗低渗环境 参与菌体内外的物质交换 有多种抗原决定簇，决定了菌体的抗原性

5、7、细菌细胞壁缺陷型（细菌L型）：细菌细胞壁的肽聚糖结构受到理化或生物因素的直接破坏或合成被抑制，这种细菌壁受损的细菌在高渗环境下仍可存活者称为细菌细胞壁缺陷型。 原生质体：G+菌细胞壁缺失后，原生质层仅被一层细胞膜包住。不易成为细菌L型 原生质球：G-菌肽聚糖层受损后尚有外膜保护。易成为细菌L型 细菌L型的形态：高度多样性，大小不一，有球形、杆状和丝状等 无论其为G菌或G菌，形成细菌L型大多染成革兰阴性 具有可滤过性，能通过滤菌器 培养特性：营养要求基本与原菌相似，但需在高渗低琼脂含血清的培养基中生长 生长繁殖较原菌缓慢，一般培养27天形成荷包蛋样细小菌落诱发：细菌L型在体内或体外、人工诱导

6、或自然因素下均可形成（溶霉菌能裂解-1,4糖苷键，青霉素抑制四肽侧链和五肽交联桥联结），去除诱发因素后，有些L型可恢复为原菌临床特征：某些L型仍有一定的致病力，通常引起慢性感染，对细胞壁的抗生素有抵抗力8、细胞质：核糖体：沉降系数为70S，由50S和30S两个亚基组成。链霉素（与细菌核糖体的30S亚基结合）和红霉素（与细菌核糖体的50S亚基结合）均能干扰其蛋白质合成，从而杀死细菌，但对人体核糖体无害。质粒：染色体外的遗传物质，为闭合环状的双链DNA，带有遗传信息，控制细菌某些特定的遗传性状 特点：能独立自行复制，随细菌分裂转移到子代细胞中质粒不是细菌生长所必不可少的，失去质粒的细菌仍能正常存活

7、可从一个细菌转移到另一个细菌胞质颗粒：贮藏有营养物质。异染颗粒（主要成分为RNA和多偏磷酸盐，嗜碱性强，用甲基蓝染色时着色较深呈紫色）常见于白喉棒状杆菌。9、核质：或拟核，是细菌的遗传物质。无核膜，单一密闭环状DNA，不形成核小体10、细菌的特殊结构荚膜：包绕在细胞壁外的一层粘液性物质，为多糖或蛋白质的多聚体，用理化方法去除后并不影响菌细胞的生命活动。 厚度0.2微米边界明显的称为荚膜或大荚膜；厚度0、2微米的为微荚膜。 荚膜对一般碱性染料亲和力低，不易着色。用负染法染色观察荚膜的功能：抗吞噬作用；粘附作用；抗有害物质的损伤作用抗原特异性高：荚膜肿胀试验。鞭毛：包括：单毛菌、双毛菌、丛毛菌、周

8、毛菌 鞭毛的功能：细菌的运动器官，细菌的运动有化学趋向性，常向营养物质处前进，而逃离有害物质；与致病性有关；有很强的抗原性（H抗原）。菌毛：必须用电子显微镜观察普通菌毛：数量多，每菌可达数百根，与细菌粘附有关，与细菌的致病性密切相关。性菌毛：仅见于少数G-菌。数量少，每菌只有14根，中空呈管状。性菌毛由一种称致育因子（F）的质粒编码，又称F菌毛。带有性菌毛的细菌为F菌（雄），无性菌毛者称为F菌（雌）。芽胞：细菌的休眠形式。产生芽胞的细菌都是G+菌。芽胞的形成与发芽：芽胞具有完整的核质、酶系统和合成菌体组分的结构，能保存细菌的全部生命必须物质，芽胞形成后细菌即失去繁殖能力。细菌的芽胞并不直接引起

9、疾病，仅当发芽成为繁殖体后，才能迅速大量繁殖而致病。芽胞的功能：细菌的芽胞含水量少，芽胞具有多层致密的厚膜，对热力、干燥、辐射、化学消毒剂等理化因素均有强大的抵抗力；一个细菌只形成一个芽胞，一个芽胞也只能生成一个菌体，细菌数量未增加，因而芽胞不是细菌的繁殖方式。与芽胞相比，未形成芽胞而具有繁殖能力的菌体称为繁殖体；芽胞的大小、形状、位置等随菌种而异，有重要的鉴别价值11、革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：标本固定后，先用碱性染料结晶紫染初染，再加碘液媒染，此时不同细菌均被染成深紫色。然后再用乙醇（95%）脱色，有些细菌能脱色，有些不能。最后用稀释复红或者沙黄

10、复染。革兰氏阳性菌仍呈紫色，革兰氏阴性菌则呈现红色。 意义：将细菌分为G+和G-两大类，在鉴别细菌、选择抗菌药物、研究细菌致病性等方面都有重要意义。第二章 细菌的生理第一节 细菌的理化性质1、细菌的化学组成：水、无机盐、蛋白质、糖类、脂肪、核酸。水占总重量的75902、细菌的物理性状：光学性质，半透明，悬液呈混浊状态，使用比浊法或分光光度计可粗略估计细菌数量；表面积；细菌的相对表面积大，有利于同外界进行物质交换；带电现象；半透性渗透压第二节 细菌的营养和生长繁殖一、细菌的营养类型1、自养菌：以简单无机物为营养物质2、异养菌：以有机化合物为营养物质，分为腐生菌、寄生菌所有的病原菌都是异养菌，大部

11、分属寄生菌。二、细菌的营养物质1、水2、碳源3、氮源：4、无机盐5、生长因子：生长因子是指，某些细菌细菌生长所必须的但自身又不能合成，必须由外界供给的物质。四、影响细菌生长的环境因素（简答）1、营养物质：水、碳源、氮源、无机盐及生长因子为细菌的代谢及生长繁殖提供必需的原料和充足的能量2、酸碱度(pH)：多数病原菌最适pH为7.2-7.63、温度：嗜冷菌生长范围-530，最适生长1020；嗜热菌生长范围2595，最适生长5060；嗜温菌生长范围1045，最适2040， 病原菌均为嗜温菌，最适温度为37。4、气体：O2：根据细菌代谢时对氧气的需要与否分四类：专性需氧菌：具有完善的呼吸酶系统，仅能在

12、有氧环境下生长。微需氧菌：在低氧压（5%-6%）生长最好，无氧和高氧压时生长不良。兼性厌氧菌：在有氧、无氧环境中均能生长，但以有氧时 生长较好。大多数病原菌属于此。专性厌氧菌：缺乏完善的呼吸酶系统，必须在无氧环境中生长。有氧存在时受到毒害CO2：对细菌生长也很重要5、渗透压：一般培养基的低盐浓度和低渗透压对大多数细菌安全。嗜盐菌在高浓度的NaCl环境中才能生长良好五、细菌的生长繁殖1、细菌个体的生长繁殖：繁殖方式-细菌以简单的二分裂方式进行无性繁殖。繁殖速度-细菌分裂数量倍增所需要的时间称为代时，多数细菌约20-30min。但少数细菌代时较长，如结核分枝杆菌代时为18小时。2、细菌群体的生长繁

13、殖： 繁殖规律-生长曲线 ：培养时间为横坐标，培养物中活细菌的对数为纵坐标 迟缓期：体积增大，代谢活跃，但不分裂，菌数不增加。主要是适应新环境，同时为分裂繁殖作物质准备，含有丰富的酶和中间代谢产物。一般为14小时。对数期：细菌分裂繁殖最快的时期，菌数以几何级数增长。此期细菌的形态、大小、染色性、生理活性等都是典型。研究细菌的生物学活性（形态染色、生化反应、药物敏感试验等）的最佳时期。818小时稳定期：由于营养物质的消耗，有害代谢产物的堆积，繁殖数与死亡数几乎相等。活菌数保持稳定。一些细菌的芽胞、外毒素和 抗生素等代谢产物大多在稳定期产生。衰退期：死菌数超过活菌数。第三节 细菌的新陈代谢和能量转

14、换一、细菌的新陈代谢是指菌细胞内分解代谢与合成代谢的总和，其显著特点是代谢旺盛和代谢类型的多样化。二、细菌的代谢产物分解代谢产物和细菌的生化反应各种细菌所具有的酶不完全相同，对营养物质的分解能力亦不一致，因而其代谢产物有别。根据此特点，利用生物化学方法来鉴别不同细菌称为细菌的生化反应试验。合成代谢产物及其医学上的意义1、热原质（致热源）：是细菌代谢过程中合成的一种物质，用极微量注入人体或动物体内能引起发热反应的物质。产生热致源的细菌大都为革兰阴性菌，热致源即其细胞壁的脂多糖。 2、毒素及侵袭性酶：外毒素：多数G+菌和少数G-菌在生长繁殖过程中释放菌体外的蛋白质； 内毒素：G-菌细胞壁的脂多糖；

15、外毒素毒性强于内毒素。 侵袭性酶：某些细菌产生的，能损伤机体组织，促使菌体的侵袭和扩散，是细菌重要的致病物质。3、色素：水溶性，能弥散到培养基或周围组织；脂溶性，不溶于水，只存在于菌体，使菌落显色而营养基颜色不变。4、抗生素：某些微生物代谢过程中产生的一类能抑制或杀死某些其他微生物或肿瘤细胞的物质。抗生素大多由放线菌和真菌产生。5、细菌素：某些菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质。细菌素作用范围窄，仅对与产生菌有亲缘关系的细菌有杀伤作用。6、维生素：细菌能合成某些维生素除供自身需要外，还能分泌至周围环境中。第四节 细菌的人工培养一、培养基1、基础培养基：含有多种细菌生长繁殖所需的基本营养成分。2

16、、增菌培养基：基础培养基的基础上加入某种营养成分。3、选择培养基：在培养基中加入某种化学物质，使之抑制某些细菌生长，而有利于另一些细菌生长，从而将后者从混乱的标本中分离出来。4、鉴别培养基：用于培养和区分不同细菌种类的培养基。5、厌氧培养基二、细菌在培养基中的生长情况 液体培养基：均匀混浊状态；生成沉淀；形成菌膜。纯种细菌的增值或生化反应。 固体培养基：用于细菌的分离和纯化菌落：将细菌划线接种在固体平板培养基表面，经培养后单个细菌分裂繁殖成肉眼可见的细菌基团。1、光滑型（S型）菌落2、粗糙型（R型）菌落3、粘液型（M型）菌落 半固体培养基：观察细菌动力和菌种短期保存。三、 培养方法：普通培养法

17、；CO2培养法；厌氧培养法四、 细菌的分类：界、门、纲、目、科、属、种种是细菌分类的基本单位。同一菌种的各个细菌差异大的叫亚种，差异小的叫型。对来源不同的同一菌种的细菌称为该菌的不同菌株。五、细菌的命名法：双名法：前一字为属名，用名词，大写；后一字为种名，用形容词，人名或地名均小写。中文译名则种名在前，属名在后，如Escherichia coli，大肠埃希菌；属名亦可不将全文写出，只用第一个字母表示，如S. typhi；有时泛指某一属细菌，不特指其中某个菌种，则在属名后加sp.(单数)或spp.（复数）;有些常见菌有习惯通用的俗名,如tubercle bacillus，结核杆菌。第三章 消毒灭

18、菌与病原微生物实验室生物安全第一节 消毒灭菌的常用术语1、灭菌：杀灭生物体上所有微生物的方法，包括杀死细菌芽胞、病毒和霉菌在内的全部病原微生物和非病原微生物。2、消毒：杀死物体上或环境中的病原 微生物，并不一定能杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法。消毒剂3、防腐：防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法。防腐剂4、清洁：指除去尘埃和一切污秽来减少微生物数量的过程。5、无菌：无菌即不存在活菌，多是灭菌的结果。无菌操作：防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。第二节 消毒灭菌的方法一、物理消毒灭菌法：热力、辐射、滤过、干燥和低温等。热力灭菌法：繁殖体经5560作用3060分钟死亡，100立即死亡；芽胞煮沸

19、35小时死亡。分为干热灭菌和湿热灭菌1、干热灭菌法：一般细菌繁殖体在干燥状态下，80-100经1小时可被杀死，芽胞则需要更高温度才能被杀死。 焚烧：焚烧炉内焚烧或直接点燃，用于废弃物、尸体灼烧：用火苗灭菌，用于接种环、试管口干烤：150180加热24h灭菌，适用于耐高温物品红外线：110m波长的电磁波，用于医疗器械灭菌2、湿热灭菌法：最常用，在相同温度下湿热灭菌法比干热灭菌法效果更好，因为：湿热中细菌菌体蛋白较易凝固变性；湿热的穿透力比干热大；湿热的蒸汽有潜热效应存在。巴氏消毒法：用较低的温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物，以保持物品中所需的不耐热成分不被破坏的消毒方法（61.1-62.8 3

20、0min 或71.715-30s，主要用于牛乳消毒和酒类）。煮沸消毒法：100 ，一般细菌繁殖体5min能被杀死。食具、注射器等消毒流动蒸汽消毒法：100 细菌繁殖体1530分钟可被杀灭，不能消灭全部细菌芽胞间歇蒸汽灭菌法：100 5-30min，杀死其中繁殖体，取出放进37 孵箱过夜，芽胞发育成繁殖体，次日再蒸一次，重复3次。高压蒸汽灭菌法：*密闭耐高压蒸锅中，压力103.4KPa，温度121.3 ，时间15-20min，杀灭包括芽孢在内所有微生物。是一种灭菌效果最好的方法，适用于所有耐高温、高压、耐湿的物品。辐射杀菌法：紫外线：波长240300nm的紫外线具有杀菌作用，机理是干扰细菌DNA

21、合成。手术室空气消毒或用于耐热物品表面消毒。 特点：空气穿透能力强；固体穿透能力弱；对机体组织有损伤。电离辐射：高速电子、X射线、射线微波：可穿透玻璃、陶瓷、薄膜等，不能穿透金属表面。滤过杀菌法：用物理阻留的方法除去微生物以达到无菌目的。 液体除菌用滤菌器，用于不耐高温的血清、毒素、抗生素的除菌。 空气除菌用空气过滤器二、化学消毒灭菌法原理（填空）：破坏菌体蛋白；干扰细菌的酶系统和代谢；改变细胞膜的通透性。化学消毒剂分为高效、中效、低效消毒剂3种。第四节 影响消毒灭菌效果的因素微生物对消毒灭菌的敏感性高低排序大致如下：真菌、细菌繁殖体、有包膜病毒、无包膜病毒、分枝杆菌、细菌芽胞。D值指在一定条

22、件下灭活90最初的微生物群体所需的时间。第五节 病原微生物实验室生物安全一、病原微生物的分类第一类：能够引起人类或动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或已经宣布消灭的微生物。第二类：能够引起人类或动物严重疾病，比较容易直接或间接在人与人、动物与动物、动物与人间传播的微生物。第三类：能够引起人类或动物疾病，但一般情况下对人、动物或环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病并且具备有效治疗和预防措施的微生物。第四类：通常情况下不会引起人类或动物疾病的微生物。第一、二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。二、病原微生物实验室的分级：根据生物安全防护水平（BSL）及实验室生物

23、安全国家标准一级：二级：三级：对人体、植物、动物或环境具有高度危险性，主要通过气溶胶使人类传染上严重的甚至是致命的疾病，或对动物植物或环境具有高度危险的致病因子。通常有预防治疗措施。四级：对人体、植物、动物或环境具有高度危险性，主要通过气溶胶途径传播或传播途径不明或未知的危险的致病因子。没有预防治疗措施。第四章 噬菌体噬菌体是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的病毒；具有病毒的基本特性：个体微小，可以通过细菌滤器；无细胞结构，主要由衣壳（蛋白质）和核酸组成；只能在活的微生物细胞内复制增殖，是一种专性胞内寄生的微生物。噬菌体分布极广。第一节 噬菌体的生物学性状1、形态与结构：噬菌体很小，在光

24、镜下看不见，需用电镜观察。不同的噬菌体在电镜下有三种形态：蝌蚪形、微球形和丝形。大多数噬菌体呈蝌蚪形，由头部和尾部两部分组成。2、结构及化学组成：噬菌体头部尾部：蛋白质 与细菌（受体）接触的部位核心：核酸（DNA或RNA），多位DNA线状双链蛋白衣壳：蛋白质呈20面体3、抗原性：噬菌体具有抗原性，能刺激机体产生特异性抗体。4、抵抗力：噬菌体对理化因素及多数化学消毒剂的抵抗力比一般细菌的繁殖体强，75 30min灭活。噬菌体能耐受低温和冰冻，但对紫外线和X射线敏感。第二节 毒性噬菌体1、噬菌体感染细菌有两种结果：毒性噬菌体（virulent phage）：能在宿主细胞内复制增殖，产生许多子代噬菌

25、体，并最终裂解细菌，建立溶菌周期。温和噬菌体（temperate phage）：噬菌体基因与宿主染色体整合，成为前噬菌体，细菌变成溶原性菌，不产生子代噬菌体，但噬菌体DNA能随细菌DNA复制，并随细菌的分裂而传代，建立溶原状态。 2、毒性噬菌体毒性噬菌体在宿主菌内以复制方式进行增殖，增殖过程包括：吸附、穿入、生物合成、成熟和释放。液体培养基噬菌现象可使浑浊菌液变得澄清。固体培养基若用适量的噬菌体和宿主菌液混合后接种培养，培养基表面可有透亮的溶菌空斑出现。一个空斑系由一个噬菌体复制增殖并裂解细菌后形成，称为噬斑（plaque），不同噬菌体噬斑的形态与大小不尽相同。若将噬菌体按一定倍数稀释，通过噬

26、斑计数，可测定一定体积内的噬斑形成单位（plaque forming units，pfu）数目，即噬菌体的数目。第三节 温和噬菌体前噬菌体（prophage）温和噬菌体的基因组能与宿主菌基因组整合，并随细菌分裂传至子代细菌的基因组中，不引起细菌裂解。整合在细菌基因组中的噬菌体基因组称为前噬菌体（prophage）。带有前噬菌体基因组的细菌称为溶原性细菌。溶原性转换（lysogenic conversion）：某些前噬菌体可导致细菌基因型和性状发生改变。例如白喉棒状杆菌产生白喉毒素的机理 。第五章 细菌的遗传与变异遗传（heredity）：使微生物的性状保持相对稳定，子代与亲代生物学的性状基本相

27、同，且代代相传。变异（variation）：在一定条件下，子代与亲代之间以及子代与子代之间的生物学性状出现的差异，有利于物种的进化。基因型（genotype）：细菌的遗传物质。表型（phenotype）：基因表现出的各种性状。遗传性变异：是细菌的基因结构发生了改变，故又称基因型变异。常发生于个别的细菌，不受环境因素的影响，变异发生后是不可逆的，产生的新性状可稳定地遗传给后代。非遗传性变异：细菌在一定的环境条件影响下产生的变异，其基因结构未改变，称为表型变异。易受到环境因素的影响，凡在此环境因素作用下的所有细菌都出现变异，而且当环境中的影响因素去除后，变异的性状又可复原，表型变异不能遗传。第一节

28、 细菌的遗传物质DNA的结构与功能：结构两条互相平行而方向相反的多核苷酸链功能储存、复制和传递遗传信息复制半保留复制特点复制中易发生错误基因突变蛋白合成分子生物学中心法则（DNA-RNA-蛋白质）基因与基因的转录结构基因编码结构蛋白质基因结构非结构基因编码功能蛋白质基因转录遗传信息的翻译第二节 细菌的遗传与变异一 、染色体（chromosome）一条环状双螺旋DNA长链，按一定构型反复回旋形成松散的网状结构；缺乏组蛋白，无核膜包裹；约含有5000个基因；二、质粒是细菌染色体以外的遗传物质，是闭合环状的双链DNA。1、质粒的特征：质粒具有自我复制的能力。质粒DNA所编码的基因产物赋予细菌某些性状

29、特征。质粒可自行丢失与消除。质粒的转移性。质粒可分为相容性与不相容性两种。2、质粒的分类（1）根据质粒能否通过细菌的接合作用进行传递接合性质粒非接合性质粒（2）根据质粒在细菌内拷贝数多少严紧型质粒松弛型质粒（3）根据相容性相容性几种质粒同时共存于同一菌体内不相容性不能同时共存*可借此对质粒进行分组、分群。（4）根据所编码的生物学性状质粒基因可编码多种重要的生物学性状：致育质粒（fertility plasmid、F质粒）编码性菌毛，介导细菌之间的接合传递；耐药性质粒（resistance plasmid、R质粒）编码细菌对抗菌药物或重金属盐类的耐药性。分两类，一是接合性耐药质粒（R质粒），另一

30、是非接合耐药性质粒（r质粒）；毒力质粒（Vi质粒） 编码与该菌致病性有关的毒力因子；细菌素质粒：编码细菌产生细菌素；代谢质粒：编码产生相关的代谢酶。 三、转位因子转位因子（transposable element）：是一类在细菌染色体、质粒或噬菌体之间可自行移动的一段特异的具有转位特性的核苷酸序列片段，又称移动基因。转座子有二类：插入序列（insertion sequence，IS）：最小，不超过2kb，只携带与转座功能有关的基因。转座子（transposon，Tn）：长度一般超过2kb，除携带与转位有关的基因外还携带其他基因（如耐药性、毒素基因等）。四、整合子定位：细菌染色体、质粒或转座子上

31、。基本结构：两端为保守末端（attI，59-be），中间为可变区（orf 1），含一个或多个基因盒。功能元件：重组位点（attI，59-be）；整合酶基因（intI）；启动子（Pc）。功能：通过转座子或接合性质粒，使多种耐药基因在细菌中进行水平传播。第三节 基因的转移与重组基因转移（gene transfer）：外源性的遗传物质由供体菌进入某受体菌细胞内的过程。基因重组（recombination）：转移的基因与受体菌DNA整合在一起，使受体菌获得供体菌某些特性。细菌的基因转移和重组方式：转化、转导、接合、溶原性转换、原生质体融合。1、转化（transformation）：受体菌直接摄取供体菌

32、游离的DNA片段获得新的遗传性状的过程称为转化。2、接合（conjugation）：是细菌通过性菌毛相互连接沟通，将遗传物质（主要是质粒DNA）从供体菌转移给受体菌。能通过结合方式转移的质粒称为接合性质粒，不能通过性菌毛在细菌间转移的质粒为非接合性质粒。F质粒的接合F+ 即F质粒，编码性菌毛，称雄性菌HfrF质粒整合到细菌染色体上，使细菌能高效地转移染色体上的基因，故称高频重组菌FHfr菌中的F质粒可从染色体上脱离下来，并带染色体上几个邻近的基因，故称F三者均有性菌毛，均可发生接合R质粒的接合细菌的耐药性与耐药性的基因突变及R质粒的接合转移等有关。R质粒有耐药传递因子和耐药决定因子两部分组成。

33、耐药传递因子的功能与F质粒相似，可编码性菌毛的产生和通过接合转移；R决定子能编码对抗菌药物的耐药性。3、转导（transduction）：是以温和噬菌体为载体，将供体菌的一段DNA转移到受体菌内，使受体菌获得新的性状。根据转导基因片段的范围，可将转导分为两类：普遍性转导（转导的DNA可是供菌染色体上的任何部分）、局限性转导（转导的DNA只限供菌染色体上的特定基因）。4、溶原性转换（lysogenic conversion）：溶原性细菌因染色体上整合有前噬菌体而获得新的遗传性状称为溶原性转换。5、原生质体融合（protoplast fusion）：G +菌形成原生质体后，在聚乙二醇（PEG）作用

34、下，可使两种不同的细菌细胞发生融合的过程。融合后形成双倍体细胞，可短期生存，染色体重组，获得多种不同表型的重组融合体。人为实验基因转移与重组。第四节 基因突变一、基因突变规律：1、自发突变与诱发突变突变可以自然发生为：自发突变，具自发性，随机性。彷徨试验（fluctuation test，波动试验）：随机的、非定向的突变是在接触噬菌体之前就已发生，噬菌体对突变仅起筛选而不是诱导作用。人工诱导产生的突变为诱发突变，可提高突变率。2、突变率：是指细菌生长时发生突变的频率。3、突变与选择影印试验（replica plating）：耐药突变株在接触药物之前出现，药物的作用是选择耐药株，淘汰敏感株。4、

35、回复突变与抑制突变野生型（wild type）：未发生突变的菌株。突变型（mutant type）：相对于野生型，某一性状发生改变的菌株。回复突变（reverse mutation）：有时突变株经过又一次突变可恢复为野生型的性状。第五节 细菌遗传变异在医学上的实际意义1、 影响细菌学诊断2、 预防耐药菌株的扩散3、 制备疫苗4、 检测致癌物5、 基因工程方面的应用第七章 细菌的感染与免疫第一节 正常菌落与机会致病菌1、正常菌群：当人体免疫功能正常时，对宿主无害的，某些还对人有利，是为正常微生物群。正常菌群对宿主的生理学作用：（问答）生物拮抗，其作用机制为：受体竞争；产生有害代谢产物；营养竞争；

36、合成细菌素。营养作用：参与宿主的物质代谢、营养物质转化和合成。免疫作用抗衰老作用抗肿瘤作用：降解致癌物质；激活巨噬细胞抑制肿瘤细胞。2、机会致病菌（致病条件）-填空正常菌群的寄生部位改变宿主免疫功能低下菌群失调：在应用抗生素治疗感染性疾病的过程中，宿主某部位正常菌群中各菌种间的比例发生较大幅度的变化而产生的疾病。常可引起二重感染或重叠感染，即在抗菌药物治疗感染性疾病的过程中，发生了另一种新致病菌引起的感染。第二节 细菌的致病作用（问答）1、毒力：表示细菌致病性的强弱。半数致死量：在一定条件下能引起50%的实验动物死亡的细菌数量或毒素剂量。半数感染量：在一定条件下能引起50%的组织培养细胞的细菌

37、数量或毒素剂量。2、细菌的致病作用取决于：细菌的毒力、细菌侵入的数量、细菌侵入的途径一、细菌的毒力侵袭力：致病菌能突破宿主皮肤、粘膜生理屏障，进入机体并在体内定植、繁殖扩散的能力。1、黏附素2、荚膜3、侵袭性物质：侵袭素、侵袭性酶4、细菌生物被膜毒素外毒素和内毒素的主要区别（简述）外毒素内毒素来源G+菌和部分G-菌G-菌存在部分从活菌分泌出，少数菌崩解后释出细胞壁组分，菌裂解后释出化学成分蛋白质脂多糖稳定性6080，30分钟160，24小时毒性作用强，对组织器官有选择性毒害效应，引起特殊临床表现较弱，各菌的毒性作用大致相同，引起发热、白细胞增多、微循环障碍、休克、DIC等全身反应抗原性强，刺激

38、机体产生抗毒素；甲醛液处理脱毒形成类毒素弱，刺激机体产生的中和抗体作用弱；甲醛液处理不产生类毒素特点1、大多数的化学本质是蛋白质2、毒性作用强，对组织器官有高度选择性3、绝大多数不耐热4、抗原性强5、可用人工化学方法脱去毒性（A亚基活性），保留其抗原性（B亚基结构）1、产生于G-菌细胞壁2、化学性质是LPS3、对理化因素稳定4、毒素作用相对较弱5、不能用甲醛液脱毒而成为类毒素分类1、神经毒素：破伤风梭菌、肉毒梭菌2、细胞毒素：能直接损失宿主细胞（成孔毒素、磷脂酶类）3、肠毒素：霍乱弧菌主要生物学作用1、 发热反应2、 白细胞反应3、 内毒素血症和内毒素休克第三节 宿主的免疫防御机制非特异性免疫

39、（天然免疫）屏障结构吞噬细胞体液因素皮肤与粘膜血脑屏障胎盘屏障补体溶菌酶防御素 特异性免疫（获得性免疫）体液免疫细胞免疫一、非特异性免疫机制（一）屏障结构*皮肤与黏膜屏障 ：机械阻挡、纤毛运动；分泌杀菌物质；菌群拮抗作用*血脑屏障：软脑膜+脉络膜+脑毛细血管+星状胶质细胞*胎盘屏障：母体子宫内膜的基蜕膜+胎儿绒毛膜（二）吞噬作用吞噬细胞分为：大吞噬细胞：血液中单核细胞和组织中巨噬细胞小吞噬细胞：血液中中性粒细胞1、吞噬杀伤过程：趋化接触吞入杀灭与消化残渣排除2、杀伤机制：依氧杀菌机制呼吸爆发（需分子氧参加）分子氧被还原为多种活性氧中介物（ROI）：H2O2、O2-、OH-、O2等活性氮中介物（

40、RNI）：NO、NO2-、NO3-等 对细菌均有直接毒性作用（破坏细菌的DNA、蛋白质和膜脂类）髓过氧化物酶（MPO）：存在于溶酶体中，与H2O2及氯化物的共同参与，对细菌、真菌等具有强大杀伤活性。非依氧杀菌机制酸性作用：糖分解产酸而导致pH下降，抑制细菌生长而杀菌。溶酶体酶及杀菌蛋白：溶酶体、乳铁蛋白、蛋白水解酶、核酸酶、酯酶等，对细菌有杀伤、消化、分解作用。3、吞噬作用的后果完全吞噬：病原体在吞噬溶酶体内被杀灭、消化、排除残渣的过程。（5-10分钟死亡，30-60分钟破坏）不完全吞噬：只被吞噬，却不被杀死。组织损伤：吞噬过程中，溶酶体酶（水解酶）也能破坏邻近的正常组织，造成组织损伤和炎症反

41、应。（三）体液因素 补体：调理，溶菌。溶菌酶：存在于血清，唾液，泪液，乳汁，主要作用于G+菌。防御素：多肽，破坏胞外菌细胞膜。二、特异性免疫（一）体液免疫抗体的作用1、抑制病原体黏附2、调理吞噬作用3、中和细菌外毒素4、溶菌作用5、抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用（ADCC）（二）细胞免疫细胞毒T细胞（CTL）直接杀伤靶细胞效应T细胞（Th1）产生细胞因子发挥作用（三）黏膜免疫（mucosal immune system，MIS）三、抗细菌感染免疫的特点（一）抗胞外菌感染的免疫胞外菌：指寄生在宿主细胞外的组织间隙和血液、淋巴液和组织液中的细胞。如葡萄球菌。靠非特异免疫；但主要是体液免疫发挥作用吞

42、噬作用（非特异）抗体和补体的作用：阻止细菌定植（黏附）；调理吞噬；激活补体溶菌；中和细菌外毒素。细胞免疫（Th2）：辅助B细胞产生抗体；产生细胞因子，促进吞噬。（二）抗胞内菌感染的免疫胞内菌：寄生在细胞内的细菌，分专性胞内菌（立克次体，衣原体）、兼性胞内菌（结核分枝杆菌，麻风分枝杆菌，伤寒沙门菌，布氏杆菌，肺炎军团菌，李斯特菌）。特点：胞内寄生、毒性低、呈慢性感染、免疫病理损伤，主要靠细胞免疫功能。吞噬作用：起一定作用细胞免疫（CTL）：主要作用局部黏膜免疫：细菌未进细胞前由sIgA阻止其黏附，使其不能侵入细胞内。第四节 感染的发生与发展一感染的来源与传播内源性感染：来自宿主自身的细菌感染，主

43、要指曾经感染过而潜伏下来的微生物重新感染。比如结核分支杆菌。也常见于机体免疫力下降时。外源性感染：引起感染的细菌来源于宿主体外，主要有病人及带菌者、患病及带菌动外源性感染内源性感染传染源病人、带菌者、病畜及带菌动物致病菌主要来自体内正常菌群，少数是以潜伏状态存在于体内的致病菌传播途径呼吸道、消化道、皮肤创伤、经节肢动物媒介、性传播二感染的类型（一）隐性感染：当机体抗感染免疫力较强或入侵的细菌数量不多、毒力较弱，感染后损害较轻，使机体不出现或出现不明显的临床症状者。一般在一次传染病流行中，大多数人为隐性感染，如结核。（二）显性感染：当病原菌毒力强，数量多且宿主机体抗感染免疫力相对较弱，机体受到严

44、重损害，出现明显临床症状者。按病情缓急不同分：1、急性感染：发作突然，病情突然，一般为数日至数周。病愈后，致病菌消失。2、慢性感染：病程缓慢，一般为数月至数年。胞内菌往往引起慢性感染。按感染部位不同分：1、局部感染2、全身感染：毒血症：致病菌侵入体内后，只在机体局部生长繁殖，病菌不进入血循环，但其产生的外毒素入血。（白喉）内毒素血症：G-菌侵入血液，并在其中大量繁殖、崩解后释放大量内毒素；也可由病灶内G-菌死亡释放内毒素入血。菌血症：致病菌由局部侵入血流，但未在血流中生长繁殖，只是短暂的一过性通过血循环到达体内适宜部位后再进行繁殖而致病。（伤寒早期）败血症：致病菌侵入血后在其中大量繁殖并产生毒性物质，引起全身性中毒症状。（高热、皮肤和粘膜瘀斑、肝脾肿大）脓毒血症：化脓性菌侵入血后在其中大量繁殖，并通过血流扩散至宿主体内的其他组织或器官，产生新的化脓性病灶。（三）带菌状态：致病菌在显性或隐性感染后并未消失，在体内继续留存一段时间，与机体免疫力处于相对平衡状态。第五节 医院感染一、医院感染（hospital acquired infectio