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1、-影响家兔动脉血压的因素目的 本实验采用直接测量和记录动脉血压的急性实验方法,观察神经和体液因素对动脉血压的调节作用及急性失血后的代偿反应。材料 家兔,兔手术台,哺乳类动物手术器械一套(包括手术刀、粗剪、组织剪、眼科剪、止血钳),动脉夹,动脉插管,血压换能器,水银检压计,双凹夹,铁支架,保护电极,玻璃分针,有色丝线,注射器(50ml、20ml、2ml、1ml各一副),小烧杯,干燥小试管,放血瓶,血红蛋白比色计全套,生理盐水,20%氨基甲酸乙酯或1戊巴比妥钠,肝素(1000u/ml),1:10000去甲肾上腺素,1:10万乙酰胆碱,PcLab生物信号采集处理系统。方法和步骤1手术准备(1)家兔称
2、重后,按1g/kg体重剂量于耳缘静脉注射20%氨基甲酸乙酯(或按30mg/kg体重的剂量于耳缘静脉注射戊巴比妥钠)麻醉。注意麻醉剂不能过量,注射速度不宜过快。(2)动物背位(仰卧)固定缚于手术台上,用棉绳钩住兔门齿,将绳拉紧并缚于兔台铁柱上,后固定四肢。注意前肢须交叉固定。(3)暴露颈部气管、颈总动脉、颈静脉、迷走神经和减压神经。用玻璃分针仔细分离右侧上述神经,各穿以不同颜色的细丝线以供识别。分离两侧颈总动脉和两侧颈静脉,各穿一线备用。(4)给动物静脉注射肝素,剂量为1000u/kg体重。等1分钟后再进行下一步骤,以使肝素在体内血液中混合均匀。(5)左颈总动脉插动脉套管:颈总动脉远心端结扎,近
3、心端用动脉夹夹住,并在动脉下面预先穿一丝线备用。用眼科剪在靠近结扎处动脉壁剪一字形切口,将动脉套管向心方向插入颈总动脉内,扎紧固定。2装置仪器颈动脉血压测量记录及放血装置见图11-22-1。(1)将血压换能器固定于铁支柱上,其位置应与心脏在同一平面,并将换能器的输出端与PcLab生物信号采集处理系统的一个输入通道连接。(2)安装好放血装置使动脉插管的侧管与放血瓶相连(瓶内预先盛60ml生理盐水),将螺旋夹松开使放血系统与测压系统排出空气充满生理盐水,然后关上测压系统的弹簧夹,再关上放血系统中的螺旋夹。放血瓶内放入肝素0.5ml,记下瓶内流体量,调节放血瓶高度,使瓶内液平面距离颈总动脉水平约65
4、cm处可使血压维持在6.67kPa(50mmHg)左右。3PcLab参数设置记录方式:连续记录;存盘方式:连续存盘;输入:DC;放大倍数:100200采样速率:1ms刺激波宽:0.15ms可调;刺激强度:0.55V手动可调;刺激方式:主周期连续;脉冲数:30可调;波间隔:33.3ms可调。4.血压传感器定标为定量记录血压及血压变化的幅度,需在记录之前定标。定标方法:打开弹簧夹,使与大气相通,PcLab开始采样并将通道基线调至与零线重合。然后接上预先充以生理盐水的50ml注射器,缓慢注水,同时注意水银检压计上升刻度,每上升2.67kPa(20mmHg),保持采样一段时间,直标到24.0kPa(1
5、80mmHg)。然后关上弹簧夹,并取下注射器。定标后放大器的放大倍数不能再变动(定标工作由实验室完成,一般无须再定标)。图11-22-1 兔颈动脉血压测量记录及放血装置5观察项目(1)从颈静脉内取血0.5ml测定Hb浓度(方法见附录)。(2)观察正常血压波动曲线。除去动脉夹,可见血液由动脉冲入动脉插管,PcLab开始采样记录血压曲线。(3)用动脉夹夹闭右侧颈总动脉510秒,观察血压变化。(4)用两细线在减压神经中部两处结扎。在两结扎间切断神经,以510V电压,1015Hz频率,波宽2ms的电脉冲分别刺激切断后的神经中枢端和外周端,观察血压变化。(5)将右侧迷走神经穿线结扎,在结扎上端切断该神经
6、,刺激其外周端,观察血压变化。(6)静脉注射1:10000去甲肾上腺素0.3ml,观察血压变化。(7)静脉注射1:10万乙酰胆碱0.1ml/kg,观察血压变化。(8)静脉注射1:1000阿托品0.3ml/kg。(9)重复观察项目(3)(7)操作,观察血压变化。(10)待血压稳定后,打开放血装置上的螺旋夹,使动脉血放入放血瓶,调节放血瓶高度使血压维持在6.67kPa(50mmHg)左右,持续失血3分钟后关紧螺旋夹,终止失血。连续观察放血过程中血压动态变化,于失血停止后10、20、30分别从颈静脉采血0.5ml,测定Hb浓度。结果1将实验结果曲线剪贴在报告本上,每一实验组必须有一份。2测量各项处理
7、前后动脉血压的收缩压,舒张压,平均动脉压,dP/dtmax,心率,列表统计处理,并讨论结果机制。思考题1正常血压的波动情况如何?何以会有各种波动?每心搏一次是否血压应波动一次?能否从所描曲线上看出来?若看不出,请说明原因。2未插管一侧的颈总动脉短时夹闭对全身血压有何影响?为什么?假使夹闭部位是在颈动脉窦以上,影响是否相同?3刺激减压神经中枢端与外周端对血压的影响有何不同?为什么?4注射去甲肾上腺素后,血压上升,此时心率会有何变化?为什么? 5去甲肾上腺素为何能升高血压?6为什么要持续失血3,这对失血代偿的机制分析上有何意义?7失血停止后,血压为何能缓慢上升?注意点1室温低时打开手术台下电灯给动物保温,防止麻醉后体温下降。2每一项观察须有对照,并须待其基本恢复后再进行下一步骤。附录 血红蛋白测定法在血红蛋白测定管内,用滴管滴入0.1mol/L盐酸至刻度2处(约5滴)。用血红蛋白吸血管吸血液0.02ml,用干棉球擦净吸血管外的血液,迅速浸入测定管的盐酸溶液内,将血液徐徐吹入盐酸液之底层,并利用上层盐酸将吸血管洗涤23次,然后摇匀使血液与盐酸混合,显现均匀之褐色,待10分钟后,用滴管徐徐滴加蒸馏水,边滴加边振荡,稀释至其色泽深浅与血红蛋白计的标准管色泽相同为止。从测定管刻度读出每100ml血液内所含的血红蛋白克数。吸血管依次用蒸馏水、酒精、乙醚各洗3次,干后供下次测用。-第 3 页-
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