植物组织培养的一般流程(6页).doc

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1、-植物组织培养的一般流程一个完整的植物组织培养过程一般包括以下几个步骤：（1）准备阶段查阅相关文献，根据已成功培养的相近植物资料，结合实际制订出切实可行的培养方案。然后根据实验方案配制适当的化学消毒剂以及不同培养阶段所需的培养基，并经高压灭菌或过滤除菌后备用。（2）外植体选择与消毒选择合适的部位作为外植体，采回后经过适当的预处理，然后进行消毒处理。将消毒后的外植体在无菌条件下切割成一定大小的小块，或剥离出茎尖，挑出花药，接种到初代培养基上。（3）初代培养接种后的材料置于培养室或光照培养箱中培养，促使外植体中已分化的细胞脱分化形成愈伤组织，或顶芽、腋芽直接萌发形成芽。然后将愈伤组织转移到分化培养

2、基分化成不同的器官原基或形成胚状体，最后发育形成再生植株。（4）继代培养分化形成的芽、原球茎数量有限，采用适当的继代培养基经多次切割转接。当芽苗繁殖到一定数量后，再将一部分用于壮苗生根，另一部分保存或继续扩繁。进行脱毒苗培养的需提前进行病毒检测。（5）生根培养刚形成的芽苗往往比较弱小，多数无根，此时可降低细胞分裂素浓度或不加，提高生长素浓度，促进小苗生根，提高其健壮度。（6）炼苗移栽 选择生长健壮的生根苗进行室外炼苗，待苗适应外部环境后，再移栽到疏松透气的基质中，注意保温、保湿、遮荫，防止病虫危害。当组培苗完全成活并生长一定大小后，即可移向大田用于生产。二、单项选择题 1. 在衡量杂种优势（

3、H ）时，超中优势的计算方法为（ P 1 、 P 2 分别表示两亲本的性状平均值， F 1 为杂种一代的性状平均值）： A. H F 1 -(P 1 +P 2 )/2/(P 1 -P 2 )/2 B. H (F 1 -P 1 )/P 1 C. H F 1 -(P 1 +P 2 )/2/(P 1 +P 2 )/2 D. H (F 1 -P 2 )/P 2 2. 根据 植物 梢端组织发生层学说，如果 L II 层细胞发生突变，则下列器官或组织会发生变异的是： A 表皮 B. 种子 C. 不定根 D. 中柱 3. 对于孢子体型自交不亲和而言，下列基因型的杂交组合能产生后代的是： A S 1 S 2

4、S 1 S 2 B S 1 S 2 S 1 S 3 C S 1 S 2 S 2 S 3 D S 1 S 2 S 3 S 4 4. 原始群体性状差异较大的异花授粉园林植物，实生选种时一般采用： A 一次单株选择 B 一次混合选择 C 混合单株选择 D 单株混合选择 5. 现有 两种 菊属植物，其染色体组类型分别为 AABB 和 CC ，则将它们进行体细胞杂交获得的谐和细胞杂种染色体组类型应该为： A. AABB B. ABC C. AABBCC D. CC 6. 下列射线中，哪一种属于可以引起物质电离的电磁波？ A X 射线 B 射线 C 紫外线 D 激光 7. 园林植物的多倍体与二倍体相比，一

5、般会表现为： A 气孔增多 B 花大色艳 C 适应性减弱 D 结实率增加 8. 常用的化学诱变剂 EMS （甲基磺酸乙酯）是一种： A 碱基类似物 B 烷化剂 C 抗生素 D 生长调节物质 9. 在下列有性杂交方式中，被称为双交的是： A (A B) (C D) B (A B) B B C A B D (A B) C D 10. 对于繁殖系数较高的草花而言，有时为了加速其选种进程，下列哪个程序或圃地可以省略？ A 株系圃 B 品种比较预备试验圃 C 品种比较试验圃 D 区域试验 三、填空题 （每空 0.5 分，共 15 分） 1. 园林植物品种应具备的三个基本特征是：_ 、_ 和 _。 2.

6、芽变选种一般按二级选种程序，包括初选、_ 和_ 三个阶段。 3. 与其他作物相比，园林植物基因工程育种具有更为广阔的应用前景，目前常用的园林植物转基因方法主要有_ 、_ 、_ 等。 4. 菊花、月季、香石竹等切花材料的品种繁多，花色丰富，但人们通过长期的杂交育种未能培育出蓝色花品种，其主要原因是因为这些花卉的细胞内缺少一种被称为_ 的花色素，控制这一色素合成的关键基因为_ 。 5. 芽变开始发生时多以嵌合体的形式出现，根据组织发生层内和层间的细胞遗传物质差异可将芽变嵌合体分为_ 和_ 两种类型；对嵌合体形式的芽变，可采用_ 、_ 、_ 、_ 等方法使其转化，最终获得同质的纯化突变体。 6. 植

7、物种类或品种对在进化过程中经常发生的环境变化，通常具有较高的适应性，这种现象称为_ ；而对进化过程中很少发生的环境变化适应能力较差，在这种条件下所产生的反应称为_ 。 7. 在园林植物引种过程中，必须进行引种试验，其内容具体包括_ 试验、_ 试验 和_ 试验，然后确定推广应用。 8. 根据遗传特性的不同，植物雄性不育性可分为_ 、_ 和_ 3 种类型；在利用雄性不育系进行 F 1 种子的生产时，雄性不育系亲本一般通过与_ 系杂交的方法进行繁殖。 9. 园林植物新品种的登录是一项非常有意义的工作，迄今我国已获得两种园林植物的新品种国际登陆权威（ IRA ），它们分别是_ 和_ 。 10 园林植物

8、花粉生活力测定的常用方法主要有_ 、_ 、_ 等。 四、简答题 1. 简述园林植物种质资源保存的主要方法以及各自的特点。2. 引种时南树北移在栽培上应采取哪些措施？3. 简述菊花育种的主要目标以及实现这些目标的技术途径。4. 简述人工创造园林植物多倍体和单倍体的方法。5. 简述园林植物一代杂种（ F 1 品种）选育的一般程序。6. 简述远缘杂交不亲和性的表现及其克服办法。（ 7 分） 五、论述题 （第 1 小题 10 分，第 2 小题 15 分，共 25 分） 1. 结合实例谈谈植物基因工程在园林植物遗传改良中的应用前景。（ 10 分） 2. 试述杂交育种中如何进行亲本的选择和选配，以一种无性

9、繁殖的园林植物为例，制定其有性杂交育种的技术路线和实施方案。（ 15 分）一、名词解释 （每小题 3 分，共 15 分） 1. 种质资源：指携带能从亲代传递给子代的遗传物质的载体，可以是植物群体、个体、部分器官、组织、细胞、个别染色体乃至 DNA 片断。 2. 单株选择法：按照选择标准从原始群体中选出一些优良单株，分别编号，分别留种，下一代单独种植一个小区形成株系（一个单株的后代），然后根据各株系的表现，鉴定各入选单株基因型好坏的方法。 3. 简单引种：引种地与原分布区的自然条件差异较小或引种植物本身适应范围较广，只需采用简单的栽培措施就能使引种植物适应新环境并能正常生长发育。 4. 一般配合

10、力：又称普通配合力，指一个亲本品种或品系与其他品种（系）杂交所得的一系列杂交组合后代某一性状的平均表现。 5. 自交不亲和：指能产生具有正常功能且同期成熟的雌雄配子的雌雄同体植物，在自花授粉或相同基因型异花授粉时不能完成受精的现象。 二、单项选择题 （每个 1 分，共 10 分） 1.C 2.B 3.D 4.C 5.C 6.A 7.B 8.B 9.A 10.B 三、填空题 （每空 0.5 分，共 15 分） 1. 特异性 一致性 稳定性 2. 复选 决选 3 农杆菌介导法 基因枪法 花粉管通道法 4. 花翠素（翠雀素） F35H 5 扇形嵌合体 周缘嵌合体 修剪 嫁接 扦插 组织培养 6 饰变

11、 形变 7. 种源 品种比较 区域 8. 细胞质雄性不育 细胞核雄性不育 核质互作雄性不育 恢复系 9 梅花 桂花 10. 直接测定法 培养基法 化学染色法 四、简答题 （共 35 分） 1 园林植物种质资源的保存方法主要有就地保存、异地种植保存、种子保存、离体试管保存（包括缓慢生长离体保存和超低温保存）等。各自的特点如下： 就地保存：保存原有的生态环境与生物多样性，保存费用较低；但易受自然灾害。异地种植保存：基因型集中，比较安全，管理研究方便；但费用较高，基因易发生混杂。 种子保存：种子容易采集、数量大而体积小，便于贮存、包装、运输、分发；但无性繁殖植物及顽拗型种子不易保存。 离体试管保存：

12、大大节约土地和劳力，繁殖系数高，可免除病毒感染，超低温保存可长期保存种质；技术依耐性较大。 2 南树北移在栽培上应采取的措施包括： 1 ）适当延期播种，适当减少生长量，增加组织充实度，提高引入植物的越冬能力。2 ）适当密植，提高植物的越冬性。（ 3 ）适当节制肥水，提前封顶期，使其枝条充实。（ 4 ）幼苗期进行短日照处理，缩短生长期，使其枝条组织充实，提高越冬性。（ 5 ）冬季进行防寒保护。（ 1 分 3 菊花育种的目标主要有：花期（多种花期）；花色（蓝色、黑色、复色、大花艳丽等）；花型（大花、小花、重瓣等）；株形（满足不同的用途）；抗性（抗病虫、抗逆境等）。（ 3 分） 实现育种目标的技术途

13、径为：引种；实生选种；人工杂交育种；芽变选种；诱变育种（辐射诱变、化学诱变、航空诱变）；生物技术育种。（ 3 分） 4 人工创造多倍体的方法： 1 ）物理方法：极端温度处理、机械损伤、电离及非电离辐射等（ 1 分）； 2 ）化学方法：秋水仙素等化学药剂处理（ 1 分）； 3 ）生物方法：有性杂交、胚乳培养等（ 1 分）。 人工创造多倍体的方法： 1 ）诱导孤雌生殖：远缘花粉刺激、延迟授粉、辐射、化学药剂处理等（ 1 分）； 2 ）花药或花粉培养（ 1 分）。 5 园林植物一代杂种（ F1 品种）选育的一般程序为： 1 ）确定育种目标，收集育种材料（ 2 ）选育优良的自交系：在每材料中选择一定数

14、量的优良单株自交，在自交后代中继续选择优良单株自交，直至选出稳定的优良自交系（ 3 ）进行自交系间配合力的测定（ 4 ）确定配组方式，配制一代杂种（5 ）品种比较试验、区域试验与生产试验（ 1 分） 6 远缘杂交不亲和性的表现主要有：异种花粉在柱头上不能正常萌发；花粉萌发后，花粉管不能进入柱头；花粉管生长缓慢或太短，不能到达胚囊；花粉管到达胚囊，但不能完成受精。克服远缘杂交不亲和的方法：适当选择亲本，并注意正反交（ 1 分）；采用特殊的授粉方式，如混合授粉、多次重复授粉、低剂量辐射处理花粉授粉、提前或延迟授粉（ 1 分）；染色体加倍法、媒介法、生理接近法（ 1 分）；柱头移植或花柱短截法（ 1

15、 分）；化学药剂的应用；改善授粉条件，如试管受精、利用保护地栽培等（ 1 分）。 五、论述题 1 植物基因工程又称植物遗传工程，是指以类型工程设计的方法，按照人们的意愿，将不同生物体的 DNA 在体外经酶切和连接，构成重组 DNA 分子，然后借助一定的方法转入受体植物细胞，使外源目的基因在受体中进行复制和表达，从而定向改变植物性状的技术方法。（ 2 分） 与有性杂交等传统的育种技术相比，植物基因工程具有定向改造植物的遗传性状（目的性明确、精确度高），打破物种间的生殖隔离障碍 ( 实现基因资源的真正共享 ) ，缩短育种周期等优点。（ 3 分） 植物基因工程在园林植物的性状改良上应用广泛，包括修饰

16、花色、改良花型、增加花香、改变花期、延缓衰老、改善株型、创造不育、提高抗性等多个方面。（ 4 分） 随着植物转基因技术的不断完善和更多目的基因的广泛克隆，园林植物基因工程改良具有广阔的发展前景。（ 1 分）2 杂交育种时亲本的选择和选配应注意遵循一定的原则，其中亲本选择的原则为： 1 ）从大量种质资源中精选亲本； 2 ）尽量选用优良性状多的种质材料； 3 ）明确目标性状，突出重点，分清主次； 4 ）选用优良性状遗传力强、一般配合力高的材料； 5 ）重视选用地方品种。（ 2.5 分） 亲本选配的原则为： 1 ）父母本性状互补； 2 ）选用地理上较远、不同生态型的亲本配组； 3 ）选用经济性状优良、遗传差异大的亲本配组； 4 ）选用配合力高的材料配组； 5 ）以优良性状多、结实率高的亲本为母本； 6 ）以开花早的材料作父本，开花晚的材料作母本； 7 ）注意亲本性状的遗传规律。（ 3.5 分） 植物新品种 经过人工培育的或者对发现的野生植物加以开发，具备新颖性、特异性、一致性和稳定性并有适当命名的植物品种。-第 6 页-