【机能实验】神经干动作电位.ppt

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1、1,蛙离体神经干生物电信号与兴奋性检测,2,RM-6240生物信号采集系统,3,1.材料和方法 (Materials and methods ),1.2药品(drug) 任氏液,每升任氏液含 NaCl 6.5 g、KCl 0.14 g、CaCl2 0.12 g,、NaHCO3 0.20 g、NaH2PO4 0.01 g。,4,1. 3器材( Experimental apparatus) RM6240 生物信号处理系统(RM6240 multichannel physiological recording and processing system )（成都仪器厂）、神经标本盒（ nerve

2、chamber )。,RM6240C微机生物信号处理系统,S+、S-刺激电极，E接地电极，r1- 、r1+和r2- 、r2+引导电极，,刺激电极,引导电极,引导电极,仪器连接,RM6240C微机生物信号处理系统,神经干标本盒。,S+ S- E R1 - R1+ R2- R2+,神经干标本盒两对引导电极分别接微机生物信号处理系统1、2通道,6,1.5 仪器连接和参数 (Apparatus junction and parameter) 神经干标本盒两对引导电极分别接微机生物信号处理系统1、2通道。 刺激器输出接刺激电极。1、2通道时间常数0.02s、滤波频率3 KHz、灵敏度5 mV，采样频率：

3、100 KHz，扫描速度：0.2ms/div。单刺激方式，电压1.0 V，波宽0.1 ms，延迟1 ms，同步触发。,S+ S- E R1- R1+ R2- R2+,神经干标本盒,RM6240C微机生物信号处理系统,第2通道,第1通道,刺激器输出口,刺激电极,第1对引导电极,第2对引导电极,“实验”菜单中选择自定义实验项目“神经干动作电位”进入实验状态。仪器参数：1、2通道时间常数0.020.002s、滤波频率1KHz、灵敏度5mV，采样频率：40KHz，扫描速度：0.5ms/div。单刺激激方式，刺激幅度0.13V，刺激波宽0.1ms，延迟5ms，同步触发。,1.5仪器连接和参数,采样频率,

4、通道模式,扫描速度,灵敏度,滤波频率,时间常数,8,1.6 记录动作电位( Record action potential) 神经干标本置于标本盒的电极上，用1.0 V 电压，波宽0.1ms 的单个方波刺激神经干,引导CAP。,Ap,Dp,An,Dn,问题： ApAn与DpAn。实验验证 假设2： NF传导速度的不同使ApAn。实验验证 假设3：BAP是由不对称正相波和负相波叠加而成，实验验证,Central end,Peripheral end,刺激电极,引导电极,引导电极,接地,9,Positive negative,2.1 测定中枢端引导的双相动作电位（biphasic action p

5、otential, BAP) 用1.0 V 电压，波宽0.1ms 方波刺激神经干末梢端，测定中枢端BAP正、负向振幅(amplitude，A)和时程(duration，D）,2. 观察（observations),A1chp,D1chp,A1chn,D1chn,A2chp,D2chp,A2chn,D2chn,Central end,Peripheral end,A1chp 4mV,刺激电极,引导电极,引导电极,10,2.4兴奋传导速度的测定 用1.0V电压，波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干中枢端，测定第1和第2对引导电极引导CAP起点的时间差t ，根据 S R1- R2- / t 计算出A

6、P的传导速度。,S R1- R2-,t,11,Dm,Am,Am,Dm,2.5 测定单相动作电位（monophasic action potential，MAP） 用镊子夹伤对1对引导电极间的神经干，然后用1.0V电压，波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干中枢端，测定末梢端MAP振幅和时程。,（1ch）,刺激电极,引导电极,引导电极,12,刺激伪迹(Stimulus artifact),刺激伪迹是刺激电流通过导电介质扩散至两引导电极而形成的电位差信号。,刺激伪迹,13,14,15,(1)为什么能引导出双相动作电位，其原理是什么？,-,+,-+-,+-+,A = B,A B,A = B,+-+,-

7、+-,-+-,+-+,A B,胞外,外,内,外,内,内,外,内,外,16,（2）为什么AP1较AP2出现早且波形幅度大呢？,粗,细,17,阈强度：对神经干而言，阈强度是指神经干刚好能产生动作电位的刺激强度。最大刺激强度：能产生最大动作电位的最小刺激强度。,“全”或“无”？,2. 阈强度、最大刺激强度,18,A,A,“全”或“无”,单个细胞,神经干/复合神经纤维,非“全”或“无”,细胞内外,细胞外,单向,双向,19,0V,0.25V,0.3V,0.4V,0.5V,0.6V,0.7V,0.8V,0.9V,20,（2）AP1与AP2的波峰的时差r1点与r3点间的距离,3.测定传导速度(自动/手动),（1）V=S/t（m/s）,21,S1,S2,r1,r4,r3,r2,S(cm),22,4.检测兴奋性周期变化,绝对不应期 相对不应期 阈上 超常期 阈下 低常期 阈上,兴奋性,0,阈值,23,最大刺激强度,双刺激,调节间隔时间,保持刺激强度和波宽不变,24,随着波间隔的缩小，越来越多神经纤维在接受第二个刺激时已处于第一个刺激诱发的动作电位的不应期，所产生的复合动作电位波幅就减小了。,25,S1,S2,r1,r4,r3,r2,5、 单相动作电位,（1）彻底夹伤r1与r2之间神经干 （2）产生单相AP原因 兴奋不能传导至B点,