实验三 观察DNA和RNA在细胞中的分布(8页).doc
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1、-实验三 观察DNA和RNA在细胞中的分布-第 8 页观察DNA和RNA在细胞中的分布学习指导 核酸存在于所有生物的细胞中,它是生物体内与生物的生长、发育、遗传、变异有关的一类十分重要的化合物。核酸包括脱氧核糖核酸(简称DNA)和核糖核酸(简称RNA)。在真核细胞内,DNA主要分布在细胞核中,占细胞中DNA总量的98%以上。DNA呈双螺旋长链状态,与蛋白质结合,这个复合物称为染色质。在线粒体、叶绿体内也含有少量的环状DNA。RNA主要存在于细胞质中,约占细胞中RNA总量的90%。细胞内的RNA主要有三种。其中分子量最小的是转移RNA(tRNA)。tRNA的主要功能是在蛋白质合成中起携带活化的氨
2、基酸的作用。另一种为核糖体RNA(rRNA)。rRNA与蛋白质结合而构成核糖体。核糖体是合成蛋白质的细胞器。第三种是信使RNA(mRNA)。mRNA携带着遗传信息,在蛋白质合成中起着决定氨基酸顺序的模板作用。实验报告【实验目的】1尝试使用吡罗红、甲基绿混合染色剂显示细胞中DNA和RNA分布的方法。2说出DNA主要分布在细胞核中,RNA主要分布在细胞质中。【实验原理】甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿和吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。盐酸能够改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时
3、使染色体中的DNA与蛋白质分离,有利于DNA和染色剂结合。【材料器具】1材料:人的口腔上皮细胞,洋葱表皮细胞。2用具:大小烧杯,温度计,滴管,消毒牙签,载玻片,盖玻片,铁架台,石棉网,火柴,酒精灯,吸水纸,显微镜。3试剂及配制方法:(1)试剂质量分数为09%的NaCl溶液,质量分数为8%的盐酸,乙酸钠,乙酸,蒸馏水,吡罗红甲基绿混装粉。如果化学试剂商店没有吡罗红甲基绿混装粉,可以分别购买甲基绿和吡罗红G,然后按A液的第二种方法配制。(2)染色剂的配制染色剂A液的两种配制方法第一种方法:取吡罗红甲基绿粉1 g,加入到100 mL蒸馏水中溶解,然后用滤纸过滤,将滤液放入棕色瓶中备用。第二种方法:取
4、甲基绿2 g溶于98 mL蒸馏水中,取吡罗红G 5 g溶于95 mL蒸馏水中。取6 mL甲基绿溶液和2 mL吡罗红溶液加入到16 mL蒸馏水中,即为A液,放入棕色瓶中备用。染色剂B液的配制方法B液是一种缓冲液,由乙酸钠和乙酸混合而成。先取乙酸钠164 g,用蒸馏水溶解至1 000 mL备用;再取乙酸12 mL,用蒸馏水稀释至1 000 mL备用。取配好的乙酸钠溶液30 mL和稀释的乙酸20 mL,加蒸馏水50 mL,配成pH为48的B液(缓冲液)。染色剂的配制染色剂是由A液、B液混合配制而成的。取A液20 mL和B液80 mL混合,就是实验中所用的吡罗红甲基绿染色剂。应该注意的是该试剂应现用现
5、配。【实验过程】1.取口腔上皮细胞(1)在洁净的载玻片上,滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液。(2)用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻轻地刮几下,把牙签上附有碎屑的一端,放在载玻片的液滴中涂抹几下。取人的口腔上皮细胞时,用牙签的钝头稍稍用力刮取,既可避免划伤黏膜,又可刮取到形态完整、自然脱落之前的细胞(3)点燃酒精灯,将涂有口腔上皮细胞的载玻片烘干。烘干时要注意观察,当涂片将要干时即可。2.水解(1)在小烧杯中加入30 mL质量分数为8%的盐酸,将烘干的载玻片放入小烧杯中。往小烧杯中倒入盐酸时,动作要轻要慢,防止盐酸溅在皮肤上。(2)在大烧杯中加入30 温水。(3)将盛有盐酸和载玻片的小
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