2022年专题一基因工程知识点归纳 .docx
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1、精品_精品资料_专题一 基因工程一【高考目标定位】1、专题重点 :DNA重组技术所需的三种基本工具.基因工程的基本操作程可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_序四个步骤. 基因工程在农业和医疗等方面的应用.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_蛋白质工程的原理.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_2、专题难点 :基因工程载体需要具备的条件.从基因文库中猎取目的基因.利用 PCR技术扩增目的基因.基因治疗.蛋白质工程的原理.二【课时支配】2 课时三【考纲学问梳理】第 1节 DNA重组技术的基本工具教材梳理:学问点一 基因工程的概念:基因工程是指依据人们的愿望,进行
2、严格的设计,并通过体外 DNA重组和转基因等技术,给予生物以新的遗传特性,从而制造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品.由于基因工程是可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_在 DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫做留意:对本概念应从以下几个方面懂得:操作环境 生物体外操作对象 基因操作水平 DNA分子水平可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_DNA重组技术.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_基本过程 剪切拼接导入表达结果 人类需要的基因产物学问点二 基因工程的基本工具1. 限制性核酸内切酶“ 分子手术刀”(1)限制性内切酶的 来源 :主要是从原核生物
3、中分别纯化来的.(2)限制性内切酶的 作用 :能够识别双链 DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并能将每一条链上特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键切开.(3)限制性内切酶的切割方式及结果 :在中心轴线两侧将DNA切开,切可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_口是黏性末端.沿着中心轴线切开 2.DNA 连接酶“ 分子缝合针”可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_DNA,切口是平末端.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_(1)来源 :大肠杆菌、 T4 噬菌体可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_(2)DNA连接酶的 种类 :E.coliDNA可编辑资料 -
4、 - - 欢迎下载精品_精品资料_连接酶和 T4DNA连接酶.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_(3)作用 及作用部位: E.coliDNA 连接酶作用于黏性末端被切开的磷酸二可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_酯键, T4DNA连接酶作用于黏性末端和平末端被切开的磷酸二酯键.留意:比较有关的 DNA酶可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_(1)DNA水解酶:能够将 脱氧核糖和含氮碱基(2)DNA解旋酶:能够将可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_DNA水解成四种脱氧核苷酸,完全水解成膦酸、DNA或 DNA的某一段解成两条长链,作用的部位可编辑资料
5、 - - - 欢迎下载精品_精品资料_是碱基和碱基之间的氢键.留意:使 DNA解成两条长链的方法除用解旋酶 以外,在适当的高温(如 94)、重金属盐的作用下,也可使 DNA解旋.(3)DNA聚合酶 :能将单个的核苷酸通过磷酸二酯键连接成 DNA长链.DNA的缺口.留意比较 DNA(4)DNA连接酶 :是通过磷酸二酯键连接双链 聚合酶和 DNA连接酶的异同点.3. 基因进入受体细胞的载体“ 分子运输车”(1)分子运载车的 种类 :质粒: 常存在于原核细胞和酵母菌中,是一种可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_分子质量较小的环状的暴露的可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_DN
6、A分子,独立于拟核之外.病毒:常用可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_的病毒有噬菌体、动植物病毒等.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_(2)运载体 作用 :是用它做运载工具,可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_将目的基因转运到宿主细胞中去.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_是利用它在受体细胞内对目的基因进行大量复制.(3)作为运载体必需 具备的条件 :在宿主细胞中储存下来并大量复制 有多个限制性内切酶切点 有肯定的标记基因,便于挑选.思维探究:学问点 3、4、5 主要是介绍 DNA重组技术的三种基本工具 及其作用.限制酶 “ 分子手术刀” ,
7、主要是介绍限制酶的作用,切割 后产生的结果.在这部分内容学习时,应关怀的问题之一是:限制酶从哪 里查找?我们可以联想从前学过的内容 噬菌体侵染细菌的试验,进而可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_熟悉细菌等单细胞生物简单受到自然界外源可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_DNA的入侵.那么这类原核生可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_物之所以长期进化而不绝灭,有何爱护机制?进而联想到可能是有什么酶 来切割外源 DNA,而使之失效,达到爱护自身的目的” .这样就对“ 限制 酶主要是从原核生物中分别纯化出来” 的熟悉提高了一个层次.基因进入受体细胞的载体 “ 分子运
8、 输车” 的学习内容,不能仅仅着眼于记住这几 个条件,而应当深化摸索每一个条件的内涵,通过深思熟虑, 才能真正明确为什么要有这些 条件才能充当载体.教材拓展:拓展点一 限制酶所识别序列的特点 限制酶所识别的序列的特点是:出现碱基互补对称,无论是奇数个碱 基仍是偶数个碱基,都可以找到一条中心轴线,如图,中轴线两侧的双链可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_DNA 上的碱基是反向对称重复排列的.如:可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_以中心线为轴,两侧碱可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_基互补对称.以为轴,两侧碱基
9、互补对称.拓展点二 DNA 连接酶连接的是什么部位?DNA连接酶是将一段DNA片段 3 端的羟基与另一DNA片段 5 端磷酸基团上的羟基连接起来形成酯键,而不是连接互补碱基之间的氢键.第 2节 基因工程的基本操作程序教材梳理:基因工程的基本操作步骤为四步曲:目的基因的猎取.基因表达载体 的构建.将目的基因导入受体细胞.目的基因的检测与鉴定.一目的基因的猎取 1目的基因:主要是指编码蛋白质的结构基因.2目的基因的猎取方法:基因组文库 从基因文库中猎取 cDNA 文库人工合成 逆转录法、依据已知的氨基酸序列估计脱氧核苷(真核生物)序列、 PCR技术扩增目的基因、DNA合成仪合成等.可编辑资料 -
10、- - 欢迎下载精品_精品资料_注: 需要重点复习的内容有:可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_a 基因组文库与部分基因文库的含义及区分可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_(教材 P10 表格),建立基因文库的目的?如何从基因文库中猎取目的基因? b 逆转录法的过程 cPCR技术(原理、场所、条件、过程、特点)DNA复制与 PCR技术列表比较.如下所示:可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_(1)从基因文库中猎取可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_基因文库:将含有某种生物不同基因的很多可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_DNA片段,导入
11、受体菌的可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_群体储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因.构建基因文库的目的:为了在不知目的基因序列的情形下,便于获得 所需的目的基因.基因组文库:含有一种生物的全部基因.部分基因文库 (如 cDNA文库):含部分基因, 可由 mRNA反转录而来.(2)利用 PCR技术扩增目的基因可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_PCR:是一项在生物体外复制特定 原理: DNA双链复制可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_DNA片段的核酸合成技术.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_原料:模板 DNA.RNA引物.四种脱氧核苷
12、酸. 热稳固 DNA聚合酶(Taq 酶).可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_方法: DNA受热变性解旋为单链、可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_冷却后 RNA引物与单链相应互补序可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_列结合、 DNA聚合酶作用下延长合成互补链.过程:热变性(90-95 )、退火( 55-60 )、延长( 70-75 ).特点:指数形式扩增 二基因表达载体的构建(基因工程的核心体外进行)1目的: 使目的基因在受体细胞中稳固存在.可以遗传给下一代.使 目的基因能够表达和发挥作用.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_目的基因:依据需要
13、来挑选.2基因表达启动子:位于基因首端,RNA 聚合酶识别和结合的部位,驱动转录基因.载体的组成 终止子:位于基因尾端,使转录在所需要的的方停下来.标记基因:鉴别受体细胞中是否含有目的基因.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_3方法: 同种限制酶分别切割载体和目的基因,者连接.可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_再用 DNA连接酶把两可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_目的基因与运载体结合(以质粒为运载体)可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_4条件:同种限制酶、标记基因)可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_DNA 连接酶、(目的基因、
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