2022年骨髓细胞形态学检查操作流程 .docx

《2022年骨髓细胞形态学检查操作流程 .docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《2022年骨髓细胞形态学检查操作流程 .docx（6页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、精品_精品资料_骨髓细胞检验一、骨髓的取材骨髓取材方式主要有两种,即骨髓穿刺术及环钻术,后者又称骨髓活检.特殊适合 用于“干抽”情形下且可看到造血组织的自然结构,能判定造血组织与脂肪组织的比例,有助于对再生障碍时病情严峻程度的估量,也有助于骨髓纤维化、骨髓转移癌及MDS的诊断.（一）骨髓穿刺部位1. 胸骨穿刺在其次与第三肋骨之间的胸骨正中线上穿刺,穿刺针长度固定在1cm 以下.2. 脊突穿刺第三、四腰椎脊突为穿刺点,在此处进行穿刺.3. 髂前上棘穿刺髂骨前上棘后约 3cm 处.4. 髂后上棘穿刺此处骨质较薄,简单穿刺,骨髓液较丰富,假设作骨髓培育, 须取 5ml10ml 骨髓液.（二）骨髓穿刺

2、时应留意的问题骨髓穿刺一般由临床医生自行操作,检验人员也应明白以下有关问题：1. 穿刺前必需向患者作耐心的说明,以尽量削减患者的惧怕心理.2. 穿刺术必需严格无菌操作,盛骨髓的玻片不能接触穿刺针头.3. 骨髓抽取量不宜过多,一般以少于0.2ml 为最好.抽量过多可导致外周血液稀释,失去诊断意义.穿刺困难时,只要针芯有一小滴骨髓即可涂片,假设需要 作细菌培育或其他检查,也应先抽少量涂片,然后再抽所需量.4. 干抽的意义干抽是指多部位多次穿刺均抽不出骨髓.可见于骨髓造血细胞反常增生,如白血病、真性红细胞增多症等,更易见骨髓纤维化症.确定干抽时可用环钻术取活检标本,同时将环钻针内沾有的骨髓液涂片.5

3、. 骨髓液稀释此情形由于吸取骨髓液用力过大或穿刺针头刺入骨髓血窦所致, 可见涂片上骨髓小粒及脂肪滴削减,各阶段细胞比例失调,中性粒细胞分叶核杆状核,无巨核细胞、组织嗜碱细胞、网状细胞等.6. 穿刺部位的差异骨髓造血组织分布不均,且某些病变也可限于局部,因此穿刺部位的不同,其结果可有显著差异.如再生障碍性贫血,特殊是慢性再障, 往往远心部位的髂骨最易第一受损,棘突次之,而胸骨就可再生良好.即或是同一部位的髂骨也有灶性增生现象,可致两次穿刺结果不相同.某些疾病诊断阳性率也因穿刺部位而异.多发性骨髓瘤、转移癌时,均以病变部位穿刺阳性率最高.因此对一些疑难病例最好是多部位穿刺.7. 死亡病例假设需作骨

4、髓穿刺明确诊断时,应在死亡后半小时内进行.（三）骨髓穿刺胜利的指标1. 在抽搐骨髓的瞬时,病人有特殊的疼痛感.2. 在黄白色的骨髓小粒,多集中于片尾部.3. 镜下有骨髓内特有的细胞,如巨核细胞、幼红细胞、浆细胞及网状细胞等.4. 粒细胞的杆状核与分叶核的比值大于外周血,网织红细胞、有核细胞值均应高于外周血.二、骨髓涂片骨髓涂片的制备是一项重要的工作, 确定不行无视. 有时骨髓取材良好, 但由可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_于玻片的不清洁或推片技术不佳, 而不能得到中意的涂片. 如涂片太厚细胞重叠就无法识别细胞的结构.涂片太薄,细胞过于分散,就影响检查速度和精确性,甚至 漏诊或误

5、诊.因此必需制备薄厚相宜、分布匀称的涂片.（一）涂片制备取髓液一滴置于载玻片的一端,以边缘平齐的推片最好比载片稍窄或磨去两角 的一端放在骨髓液的前方,逐步后移接触骨髓液,使骨髓沿推片散开,将推片与载 片保持约 30角,平稳的向前推动至玻片的另一端, 载片上便留下一薄层骨髓液膜.图片制成后,在空气中挥动,使其快速干燥,以免细胞皱缩.（二）涂片的要求及留意事项1. 玻片要洁净, 不能用手指触摸玻片外表. 一张良好的骨髓涂片, 要求厚薄相宜,头、体、尾明显,细胞分布匀称.2. 骨髓内纤维蛋白原含量高, 易凝固, 穿刺后应立刻涂片. 应挑选有骨髓粒部分涂片.3. 图片干燥后用铅笔在髓膜头部写上、编号、

6、日期.4. 骨髓液一般不用抗凝剂, 必要时可用肝素抗凝, 但用量不宜过多, 否就影响细胞形状.三、骨髓涂片的染色骨髓中有核细胞量多,又有很多稚嫩细胞,因此染色时应留意以下问题：1. 涂片要新奇,涂片后立刻进行染色,如不能立刻染色,应先固定后储存,但也不宜储存过久,否就血浆蛋白质分解,使染色背景变蓝,成效不佳.2. 固定时间比血片稍长或另用无染料的甲醇或乙醇固定5min10min.3. 染液的用量应多于染血片, 但不宜过浓, 染色时间要长些, 使稚嫩细胞受色匀称,结构清晰.4. 最好用瑞特和吉氏混合染液染色.5. 细胞染色时间长短除与气温有关外, 也与细胞增生情形, 各批染液的性能有关,故要将染

7、色中的涂片, 在显微镜下观看, 待颗粒清晰, 胞核与胞质分明, 着色中意后再终止染色,然后再冲洗、待干、镜检.6. 染色过深的涂片, 可用瑞特染液滴加于涂片上立刻冲洗. 过浅可复染, 此时先加缓冲液后加染液,混合后复染到需要的深度为止.四、骨髓细胞分类和骨髓现象观看一骨髓片的低倍镜观看1. 观看涂片情形明白骨髓涂片厚薄是否适度, 有核细胞是否较丰富, 细胞分布是否匀称,细胞受色是否中意,假设涂片情形较差,应另选良好涂片,并将情形填写记录.2. 判定骨髓增生程度除个别情形通过骨髓有核细胞直接计数判定增生程度外,一般均借助骨髓涂片中有核细胞与成熟红细胞的比例进行判定,据此可将 增生程度分为 5 级

8、见表 20-6 .由于穿刺吸取骨髓时,只有西式的可能而无浓缩的时机,因此检查结果介于两级增生程度之间时,可将其增生程度上提一 级.例如在增生活跃与增生明显活跃之间,应判定为增生明显活跃.对增生减 低的标本,应观看全部送检的骨髓片,以免遗漏有代表性标本,而误将外周血 稀释的不分涂片认为增生减低.表 20-6可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_骨髓增生程度成熟红细胞与有核细胞之比常见缘由增生极度活跃1：1白血病、红白血病等增生明显活跃10： 1白血病、增生性贫血增生活跃20： 1正常骨髓或某些贫血增生减低50： 1造血功能低下 增生严峻减低300：1典型的再生障碍性贫血3. 骨髓巨核细

9、胞计数 取染色后的骨髓涂片, 低倍镜查找巨核细胞, 要留意边缘与尾部, 查找以 1.5cm3cm为一单位面积, 约等于 450500 低倍视野, 计数其巨核细胞,如未找到巨核细胞,应再观看其他涂片,均未发觉方可报告未找到巨核细胞.参考值 7 个35 个.必要时可用油镜进行巨核细胞分类.4. 观看有无体积较大、异形或成堆的特殊细胞.如转移癌细胞、高雪Gaucher 氏细胞、尼曼皮克 NiemannPick 氏细胞、巨网细胞、多核巨细胞以及红细胞有无缗钱状等.观看时要留意边缘及尾部.5. 明白造血岛的多少及其中的细胞组成及形状.二油镜检查低倍镜观看全片后,用油镜观看个细胞系形状,在熟识涂片的基础上

10、作细胞分类, 在分类过程中连续观看细胞形状有无变化,最终分析结果.1. 有核细胞分类一般从骨髓涂片中段开头向尾部上下来回移动分类,依次计数 200 个或更多的有核细胞,按细胞的种类、发育阶段分别记录, 并运算其比值.有核细胞过多而重叠时,应挑选涂片染色良好、细胞分 布适当的部位计数. 增生明显活跃以上的骨髓, 应分数 400 个500 个有核细胞,增生减低有核细胞很少时,可相应削减分类细胞数.2. 观看各系细胞形状变化认真观看各细胞系的数量、 细胞发育成熟度和形状是否正常.如有无大小不均、形状反常、巨幼变或巨幼样变、分叶 过多、颗粒反常、毒性变、退行性变、 有丝分裂细胞增多或反常等现象.（1）

11、 ） 粒细胞系：除观看红细胞系增生程度,各阶段细胞百分率和形状变化外,应同时留意嗜酸、嗜碱粒细胞的百分率和有无形状变异.（2） ） 红细胞系：除观看红细胞系增生程度,各阶段细胞百分率外, 仍应留意中、晚幼红细胞胞质变化,晚幼红细胞脱核情形,有无巨幼红细胞显现和其他反常现象.贫血患者可依据临床需要,单独作100个200 个有核红细胞的 6 级分类.（3） ） 巨核细胞系：对出血性疾病的患者,应依次数完骨髓片的巨核细胞数,并作形状观看和分类计数,留意有无脱血小板现象,估量血小板数量及其形状、集合性、颗粒变化等,要特殊留意侏儒性巨核细胞.（4） ） 单核细胞、淋巴细胞、浆细胞等有很多量转变和形状反常

12、.3. 观看成熟红细胞形状变化要留意观看成熟红细胞的大小、形状、染色及结构反常等,特殊是贫血的病人,对诊断和鉴别诊断有肯定的意义. 成熟红细胞反常应观看外周血片变化.4. 观看非造血细胞及反常细胞如网状细胞、内皮细胞、组织嗜碱细胞、吞噬细胞等,因数量太少,应结合高、低倍镜在涂片的边缘、尾部观看, 说明是多见或是偶见,有无形状反常.并要留意观看有无反常细胞,如恶 性组织细胞及转移癌细胞等.5. 观看核分裂现象数 500 个1000 个有核细胞,记录各类细胞有丝分裂可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_相的细胞数,运算分裂相的总百分率和各细胞系的比值.贫血患者可专数 200 个有核红细胞

13、,报告红细胞系分裂相的百分率, 以示红系造血活动情形.同时留意有无各种畸形分裂现象.6. 留意观看有无寄生虫如疟原虫、黑热病小体及弓形体等.三结果运算1. 运算各系各阶段细胞的百分率.2. 运算粒红比值 G/E将各阶段粒细胞包括 四 血涂片观看送检骨髓时必需同时送检血片,以供对比观看,帮助诊断.1. 低倍镜观看血涂片染色是否中意,估量有核细胞数一般为白细胞.2. 作 200 个白细胞分类计数,并应观看各种细胞的形状及有无稚嫩细胞的显现,假设见幼红细胞, 应说明在分类计数 200 个白细胞的过程中见到几个幼红细胞,并留意其所属阶段.3. 观看成熟红细胞有无形状反常.4. 有无其他反常细胞和侏儒性

14、巨核细胞显现.5. 观看血小板有很多量、形状、集合性、颗粒等反常.6. 观看有无血液寄生虫. 对疑有血液寄生虫的患者, 应集中留意力, 认真查找. 五 骨髓象分析与报告1结合有核细胞增生情形和各细胞系总百分率,估量该细胞系增生程度.2依据各细胞系内各阶段细胞的百分率, 分析该细胞系发育成熟度, 是否有成熟障碍、成熟过度等现象. 3依据细胞形状变化,分析某细胞系是否有特异性的转变.4. 将细胞分类结果填写骨髓检验报告单, 用简练的语言, 重点突出的将骨髓和血液细胞的观看情形填写报告记录. 表略5. 综合分析骨髓象、 血象及临床资料, 客观的向临床提出细胞学检查的初步印象或参考看法.一般骨髓检查的

15、参考看法主要有以下几种：1确定性诊断： 某些具有特异性细胞学变化的疾病,其临床表现与细胞学特 征均典型时可作确定性诊断. 如白血病、恶性组织细胞性疾病、 骨髓转移癌瘤、巨幼细胞性贫血、血液寄生虫病等.2符合性诊断： 某些无特异性细胞学变化的疾病, 其临床与骨髓象皆符合或骨髓象仅有部分转变又可说明其临床现象时,即可提出支持性看法.如缺铁性 贫血、溶血性贫血、类白血病反应,粒细胞削减症、血小板削减症、传染性单 核细胞增多症等.此时尚可提出进一步作某些帮助诊断性试验的建议.3疑似性诊断：骨髓发觉少量病理细胞,但临床尚不典型,或骨髓象特别典型,但与临床情形不符合时,应考虑是否为疾病早期,可作动态观看,

16、或提示作其他帮助性诊断的试验.4排除某些诊断： 见于临床已初步诊断为某些血液病, 但骨髓象大致正常时, 可供临床考虑是否排除此病,但也可能是骨髓尚未反映出来的疾病早期,特殊是临床症状典型者,应谨慎对待,尚需要作多部位多次穿刺,经认真检查,甚至长期追踪观看后,才能否认.5假设骨髓象有某些转变, 但对临床现象提不出详细支持或反对看法, 可直接扼要简述骨髓象特点,必要时追踪观看.六骨髓细胞分类和骨髓象检验中应留意的问题1识别细胞时不能单凭一两个特点下结论,应认真观看,全面分析判定.不同可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_涂片、不同染色的情形下,细胞受色的深浅、染色质着色的程度等,均不尽相

17、 同,因此判定细胞时,应结合同一涂片中各种正常细胞染色的实际情形进行分 析. 2各细胞系的原始细胞虽有特点,但极相像,甚难鉴别,除应作相应的化学染色帮助区分外,也可依据显现的稚嫩细胞或成熟细胞,估量原始细胞的所属.3由于细胞发育是一个连续的过程, 具有两个发育阶段之间特点的细胞属于正常的过渡形式,此时一般按成熟方向拟归于下一阶段来计数.病理情形下细胞 发育紊乱,胞核与胞质发育失去平稳,对失衡较轻者也按上述情形处理.发育 失调相差太远,如形状基本是原始阶段的细胞,但胞质中却显现几个特异性颗 粒,此时一般以胞核形状和多数特点为划分阶段的依据,但在骨髓象描述中应 加以说明. 4实属难以确定的细胞,可

18、列入分类不明细胞栏中,但不应过多,假设有肯定数量,就应通过细胞化学染色或请专家会诊等方法弄清晰细胞类别.实在困难 时应作形状学描述或加以照相记录,或用有关针对细胞外表标志的单抗进行区 别.5急性白血病时对退化破裂的细胞, 应单独计数,明白其显现的百分率和形状,用以估量原始细胞的类型.如网状细胞样裸核多时,支持急性单核细胞性白血病时退化细胞的百分率较高,单核细胞白血病就较低.但上述情形并不是确定的,只能供分析细胞类型时参考. 6作骨髓象检查的同时,应作血象观看,二者互为对比,有利于诊断和鉴别诊断,二者的关系有以下四种情形：1骨髓相像,血象显著不同：如急性失血性贫、某些溶血性贫血、缺铁性贫 血的骨

19、髓象均属增生性贫血,有时不易区分,但于急性失血性贫血时其血象常 见血小板、中性粒细胞增多,且可见核象左移.而缺铁性贫血时白细胞、血小 板多正常或削减,成熟红细胞常有中心染色过浅现象.而溶血性贫血除网织红 细胞明显增多外, 75%患者外周血可见幼红细胞. 恶性肿瘤所致类白血病反应的骨髓象所见能区分开来,而慢性粒细胞白血病时血片与骨髓片区分不显著.神 经母细胞瘤骨髓内转移时其弥散的肿瘤细胞与急性粒细胞性白血病的原粒细胞 很难区分,但前者血片中成熟粒细胞增多,仅可显现少数不成熟粒细胞晚幼 及中幼粒细胞,而后者就显现大量原粒细胞及早幼粒细胞.2血象相像, 骨髓象有显著不同： 如传染性单核细胞增多症和慢

20、性淋巴细胞白血病的血片皆可显示小淋巴细胞明显增多,但前者的骨髓涂片中,淋巴细胞 稍增多,而后者却显著增多,常达60%以上.又如某些非白血性急性白血病, 再生障碍性贫血以及黑热病的血涂片皆显示全血细胞显著削减,但这三种病的 骨髓象却有显著区分：急性白血病时,原始及稚嫩细胞显著增多.再生障碍性 贫血时就粒、红系削减,淋巴细胞相对增多.黑热病时虽可见红系增生,但却 能发觉利杜小体.3骨髓象变化不显著而血象有显著反常,或骨髓象有显著转变而血象变化不明显：前者如传染性单核细胞增多症,后者如多发性骨髓瘤、高雪氏病、尼曼- 皮克氏病等.4血象是骨髓象的连续： 白血病的血象变化随骨髓而异, 但有程度上的差异,

21、 血片的细胞成熟程度比骨髓为好,细胞愈成熟愈易区分,故从骨髓片不易打算类型时,参考血片可帮助判定细胞类型.五、骨髓细胞学检验的临床应用可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_1. 诊断造血系统疾病骨髓是机体重要造血器官, 各种血液病常导致血细胞发生质与量的转变,对于白血病特殊是非白血性白血病、再生障碍性贫血、巨幼 细胞性贫血、多发性骨髓瘤及特发性血小板性紫癜等的诊断有打算性意义.血 液病治疗过程中,也常通过骨髓检查来评判疗效或判定预后.2. 帮忙诊断某些代谢障碍性疾病如高雪 Gaucher氏病、尼曼 - 皮克Niemann-pick 氏病是由于脂类代谢酶的遗传性缺陷,导致脂类在单核 - 巨噬细胞系统细胞内沉积的疾病,在骨髓涂片中找到其特殊细胞即可确定诊断.3. 诊断原发性及继发性转移瘤除骨髓原发性肿瘤外, 某些癌特殊是肺癌、 骨癌、前列腺癌等常可转移到骨髓,故能在骨髓涂片中查到癌细胞. 4诊断某些原虫性传染病骨髓富有单核 - 巨噬细胞系统,故能较多的捕获病原体,查到黑热病原虫主要靠骨髓涂片. 5做干细胞培育及染色体核型检查,以助诊断某些特殊类型的血液病.骨髓检查对病人有肯定痛楚,故应严格把握适应症,有明显出血倾向的病人不宜行骨髓穿刺术.可编辑资料 - - - 欢迎下载