动物实验基础.ppt
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1、关于动物实验基础现在学习的是第1页,共71页一、概念一、概念1、动物实验、动物实验以实验动物为材料,采用各种方法在实验动以实验动物为材料,采用各种方法在实验动物身上进行实验,研究实验过程中实验动物发物身上进行实验,研究实验过程中实验动物发生的生理、病理变化以及产生这些变化的机理,生的生理、病理变化以及产生这些变化的机理,从而为生命科学服务。从而为生命科学服务。现在学习的是第2页,共71页2、实验动物、实验动物实验动物实验动物指以实验研究为目的而进行培育指以实验研究为目的而进行培育的,具有明确微生物和遗传背景的动物。的,具有明确微生物和遗传背景的动物。(1)通过人工培育。通过人工培育。(2)对其
2、携带的微生物实行控制、遗传学背景对其携带的微生物实行控制、遗传学背景明确。明确。(3)用于科学实验。用于科学实验。现在学习的是第3页,共71页 1、按动物机体水平不同,可分为整体实验和、按动物机体水平不同,可分为整体实验和离体实验离体实验。(1)整体实验整体实验:整体动物和无损伤动物:整体动物和无损伤动物 (2)离体实验:离体实验:可进一步具体分为分子、亚细胞、细胞、组织、可进一步具体分为分子、亚细胞、细胞、组织、器官等不同水平的实验。器官等不同水平的实验。2、按动物实验所需时间的长短,、按动物实验所需时间的长短, ()急性实验()急性实验(2天以内)天以内)()亚急性实验()亚急性实验(14
3、周)周)()慢性实验()慢性实验(26个月或更长时间甚至整个生命期)个月或更长时间甚至整个生命期)现在学习的是第4页,共71页 1 1、按遗传学控制方法分类按遗传学控制方法分类 (1)(1)近交系动物近交系动物: : 近交系动物又称纯系动物,是指动物通近交系动物又称纯系动物,是指动物通过连续全同胞兄妹、亲子、堂兄妹近亲交配过连续全同胞兄妹、亲子、堂兄妹近亲交配2020代以上,群体基因达到高度纯合和稳定的代以上,群体基因达到高度纯合和稳定的动物群。动物群。 优点优点:提高实验的精确度,减少实提高实验的精确度,减少实验的样本数,使实验结果更加可靠。验的样本数,使实验结果更加可靠。 现在学习的是第5
4、页,共71页(2)(2)突变系动物突变系动物突变系动物是指保持有特殊的突变基因的品系动物。突变系动物是指保持有特殊的突变基因的品系动物。如贫血鼠、肿瘤鼠、白血病鼠、肥胖病大鼠如贫血鼠、肿瘤鼠、白血病鼠、肥胖病大鼠(fa)(fa)、白内障大鼠(白内障大鼠(rcrc)、糖尿病大鼠)、糖尿病大鼠(di)(di)、新西兰高血压、新西兰高血压大鼠大鼠(GHR)(GHR)、米兰高血压大鼠、米兰高血压大鼠(MHS)(MHS)、尿崩症大鼠、尿崩症大鼠(didi)、裸大鼠()、裸大鼠(runrun)、糖尿病小鼠()、糖尿病小鼠(dbdb)、肌萎)、肌萎缩症小鼠缩症小鼠(dy)(dy)、无胸腺裸鼠(、无胸腺裸鼠(
5、nunu)、肥胖症小鼠)、肥胖症小鼠(odod)、侏儒症小鼠()、侏儒症小鼠(dwdw)、等。)、等。 现在学习的是第6页,共71页 (3)(3)系统杂交动物系统杂交动物现在学习的是第7页,共71页 (4)(4)封闭群动物封闭群动物以非近亲交配方式繁殖生产的一个实以非近亲交配方式繁殖生产的一个实验动物种群,在不从外部引入新的血缘验动物种群,在不从外部引入新的血缘条件下,至少连续繁殖条件下,至少连续繁殖4 4代以上,称为一代以上,称为一个封闭群,又称为远交群。个封闭群,又称为远交群。 现在学习的是第8页,共71页特点:特点:繁殖量较大,适应性和抗病力较强,繁殖量较大,适应性和抗病力较强,群内的基
6、因频率能保持稳定。饲养成本也较群内的基因频率能保持稳定。饲养成本也较低。但个体的重复性和一致性没有近交系和低。但个体的重复性和一致性没有近交系和系统杂交动物好。系统杂交动物好。在目前的实验中,这类动物占了很大的比在目前的实验中,这类动物占了很大的比例,如例,如WistarWistar大鼠、大鼠、SDSD(Sprague-DaweySprague-Dawey)大鼠、瑞士种大鼠、瑞士种(Swiss)(Swiss)小鼠、昆明种(小鼠、昆明种(KMKM)小鼠、小鼠、NIHNIH小鼠、小鼠、LACALACA小鼠、小鼠、Dunkin Dunkin HarlegHarleg豚鼠、青紫兰家兔、新西兰家兔、大豚
7、鼠、青紫兰家兔、新西兰家兔、大耳白家兔等都属于这类。耳白家兔等都属于这类。 现在学习的是第9页,共71页(1 1)无菌动物()无菌动物()是指机体内外均无任何寄生物(微生物和寄生虫)的动物。是指机体内外均无任何寄生物(微生物和寄生虫)的动物。此种动物在自然界中并不此种动物在自然界中并不存在,必须用人为的方法培育出来。其法:一般将临产前的健康动物用麻醉药品或存在,必须用人为的方法培育出来。其法:一般将临产前的健康动物用麻醉药品或颈椎臼法处死后,立即浸泡在颈椎臼法处死后,立即浸泡在37灭菌液中,送进无菌室(或无菌隔离器),按无菌灭菌液中,送进无菌室(或无菌隔离器),按无菌手术进行剖腹,切除带胎子宫
8、(子宫内首先应无菌),将其浸入消毒液里并输送到另一手术进行剖腹,切除带胎子宫(子宫内首先应无菌),将其浸入消毒液里并输送到另一隔离器中,切开子宫取胎,经用灭菌纱布揩拭仔体并断脐(电刀切断)后,放隔离器内隔离器中,切开子宫取胎,经用灭菌纱布揩拭仔体并断脐(电刀切断)后,放隔离器内人工喂乳或用其它品系的无菌母鼠作保姆供养。小鼠和大鼠等用人工喂乳非常麻烦,故人工喂乳或用其它品系的无菌母鼠作保姆供养。小鼠和大鼠等用人工喂乳非常麻烦,故采用保姆代养较为方便。而豚鼠因在一定程度上能自力饮乳,故人工哺乳较容易。另外,采用保姆代养较为方便。而豚鼠因在一定程度上能自力饮乳,故人工哺乳较容易。另外,禽类、鱼类、昆
9、虫类,因是在卵中无菌的前提下进行的,故用药物将卵周围灭菌后移入禽类、鱼类、昆虫类,因是在卵中无菌的前提下进行的,故用药物将卵周围灭菌后移入无菌隔离器内使其孵化即可,而且,这些动物一般在在出生后能自力采食,故较易育成。无菌隔离器内使其孵化即可,而且,这些动物一般在在出生后能自力采食,故较易育成。又称为四级动物。又称为四级动物。 现在学习的是第10页,共71页(2)悉生动物)悉生动物是指机体内带着已知微生物(动物或植物)的动物。是指机体内带着已知微生物(动物或植物)的动物。此种动物原此种动物原是无菌动物,系人为的将指定微生物丛投给其体内,例如使大肠是无菌动物,系人为的将指定微生物丛投给其体内,例如
10、使大肠杆菌定居在无菌小鼠体内,在进行微生物检查时,仅能检出大肠杆菌定居在无菌小鼠体内,在进行微生物检查时,仅能检出大肠杆菌。亦有人工投给二种以上的已知微生物。悉生动物一般分为杆菌。亦有人工投给二种以上的已知微生物。悉生动物一般分为单菌(单菌(Monoxenie)、双菌()、双菌(Dixenie)、三菌()、三菌(Trixenie),或多),或多菌(菌(Polyxenie)动物。此种动物同无菌动物一样是放在隔离器内饲)动物。此种动物同无菌动物一样是放在隔离器内饲育的,但因其带有已知的微生物,故隔离器内有微生物及其代谢产物育的,但因其带有已知的微生物,故隔离器内有微生物及其代谢产物的污染。例如,人
11、工投给的微生物,除可在饮水中增殖外,还能在隔的污染。例如,人工投给的微生物,除可在饮水中增殖外,还能在隔离器内放出大量的氨气。离器内放出大量的氨气。 现在学习的是第11页,共71页(3 3)无特殊病原体动物()无特殊病原体动物()是指机体内无特定的微生物和寄生虫存在的动物,简称是指机体内无特定的微生物和寄生虫存在的动物,简称SPF动物。动物。但非特但非特定的微生物和寄生虫是允许存在的,故其实际上就是指无传染病的健定的微生物和寄生虫是允许存在的,故其实际上就是指无传染病的健康动物。由于用疫苗和药物进行预防及治疗,或用淘汰带菌动物来作康动物。由于用疫苗和药物进行预防及治疗,或用淘汰带菌动物来作出出
12、SPF动物的方法并不实用(既浪费时间,又难保确实除去病原)。故一动物的方法并不实用(既浪费时间,又难保确实除去病原)。故一般大多先培育出无菌动物或悉生动物后,再把其转移到有封闭系统般大多先培育出无菌动物或悉生动物后,再把其转移到有封闭系统(Barrier System)的设施中饲育繁殖。原则上)的设施中饲育繁殖。原则上SPF动物室内是不允动物室内是不允许存在病原菌的,但在封闭系统环境中,难免有很多非病原性微生物许存在病原菌的,但在封闭系统环境中,难免有很多非病原性微生物会逐渐进入动物机体内,故亦有人把这个转移过程称之为通常动物化。会逐渐进入动物机体内,故亦有人把这个转移过程称之为通常动物化。S
13、PF动物的祖先是无菌动物,按理来说,无菌动物的子宫内和卵中应该是动物的祖先是无菌动物,按理来说,无菌动物的子宫内和卵中应该是无菌的,然而,有些病毒实际上是通过亲代传给胎儿的,因此,在作出无无菌的,然而,有些病毒实际上是通过亲代传给胎儿的,因此,在作出无菌动物和菌动物和SPF动物之前,必须充分考虑这个问题。动物之前,必须充分考虑这个问题。这是目前国际标准这是目前国际标准级别的实验动物。级别的实验动物。现在学习的是第12页,共71页4清洁普通动物,亦称最低限度疾病动物,或称清洁动物清洁普通动物,亦称最低限度疾病动物,或称清洁动物来自屏障系统的来自屏障系统的SPF动物,饲养在设有两条走廊的,温湿度恒
14、定的普通动物,饲养在设有两条走廊的,温湿度恒定的普通设施中的动物。垫料、饲料、用具等均应经过高压消毒。饮水设施中的动物。垫料、饲料、用具等均应经过高压消毒。饮水pH为为2.52.8,鼠盒上带过滤帽,空气亦应经过一定的过滤,工作人员穿干,鼠盒上带过滤帽,空气亦应经过一定的过滤,工作人员穿干净服装操作,此类动物的微生物控制标准基本与净服装操作,此类动物的微生物控制标准基本与SPF相同,不同之相同,不同之处为血清病毒抗体检查(脑脊髓炎病毒、鼠肝炎病毒处为血清病毒抗体检查(脑脊髓炎病毒、鼠肝炎病毒)经常可检)经常可检出一定滴度的抗体,但不允许出现临床症状和脏器的病理变化和自出一定滴度的抗体,但不允许出
15、现临床症状和脏器的病理变化和自然死亡。然死亡。5.普通动物普通动物是未经积极的微生物学控制,普遍地饲养在开放卫生是未经积极的微生物学控制,普遍地饲养在开放卫生环境里的动物。垫料和食物不经高压消毒,饮水为自来水,不喂青环境里的动物。垫料和食物不经高压消毒,饮水为自来水,不喂青饲料。鼠应排除肺炎病毒,沙门氏菌和链球菌,地鼠不应有蛲虫。饲料。鼠应排除肺炎病毒,沙门氏菌和链球菌,地鼠不应有蛲虫。普遍动物只能供教养和一般性实验,不适用于研究实验。普遍动物只能供教养和一般性实验,不适用于研究实验。现在学习的是第13页,共71页三、常用实验动物介绍三、常用实验动物介绍 1 1、家兔、家兔 家兔属哺乳纲,啮齿
16、目,兔科。家兔的寿命为家兔属哺乳纲,啮齿目,兔科。家兔的寿命为4 49 9年,年,性成熟期为性成熟期为5 58 8个月。母兔孕期个月。母兔孕期3030天,每胎可产仔天,每胎可产仔1 15 5只。只。用家兔作实验动物有以下优点:一是来源较充足,易用家兔作实验动物有以下优点:一是来源较充足,易于饲养,较耐寒冷,繁殖率高,价格较低。二是家兔性较于饲养,较耐寒冷,繁殖率高,价格较低。二是家兔性较温顺,便于捕捉、搬运、实验操作,平时也较为安静,一温顺,便于捕捉、搬运、实验操作,平时也较为安静,一般没有叫声。三是形体较大,可以直接记录血压、呼吸、般没有叫声。三是形体较大,可以直接记录血压、呼吸、心跳、体温
17、等,而且一次可采取较大量的血液心跳、体温等,而且一次可采取较大量的血液( (约约10ml)10ml),也可采取脑脊液。也可采取脑脊液。现在学习的是第14页,共71页(1 1)适应范围)适应范围1 1)发热:如家兔对各种致热原较为敏感,易发热,适宜于研究发热)发热:如家兔对各种致热原较为敏感,易发热,适宜于研究发热机理、检查致热原和研究退热药药理之用。机理、检查致热原和研究退热药药理之用。2 2)感染:家兔易感受多种细菌、病毒,所以适合于制作各种感)感染:家兔易感受多种细菌、病毒,所以适合于制作各种感染的动物模型。染的动物模型。3 3)心脏功能:家兔的心脏在离体条件下能维持较长的搏动时间,所以)
18、心脏功能:家兔的心脏在离体条件下能维持较长的搏动时间,所以离体兔心可用于观察多种病因或药物对心脏病的直接作用。离体兔心可用于观察多种病因或药物对心脏病的直接作用。家兔的耳部血管清晰,可用于观察药物对血管的直接作用。家兔的耳部血管清晰,可用于观察药物对血管的直接作用。(2 2)不足之处)不足之处1 1)消化:家兔属食草动物,其消化系统与人的差别较大,不适宜用作)消化:家兔属食草动物,其消化系统与人的差别较大,不适宜用作研究消化系统药物的药理。研究消化系统药物的药理。2 2)呕吐、咳嗽:家兔缺乏呕吐和咳嗽反射,因而即使胃或肺部发生)呕吐、咳嗽:家兔缺乏呕吐和咳嗽反射,因而即使胃或肺部发生病变,也无
19、外在呕吐、咳嗽等表现。病变,也无外在呕吐、咳嗽等表现。 现在学习的是第15页,共71页(3 3)常见品种)常见品种1 1)青紫兰兔青紫兰兔,又名金基拉种家兔,原为法国培育的品种。毛色特点是全,又名金基拉种家兔,原为法国培育的品种。毛色特点是全身以银灰色为主,其毛多毛根灰色,中段白色,毛尖黑色,两耳一垂一竖,身以银灰色为主,其毛多毛根灰色,中段白色,毛尖黑色,两耳一垂一竖,母兔颌下有肉髯。成年兔体重约母兔颌下有肉髯。成年兔体重约2.52.55 5公斤,体质健壮,生长快,繁殖率公斤,体质健壮,生长快,繁殖率强,抗病力强,多用于生物制品和药品鉴定的研究。强,抗病力强,多用于生物制品和药品鉴定的研究。
20、2 2)大耳白兔大耳白兔,又名日本大耳兔。是在中国白兔基础上由日本选育而成的。,又名日本大耳兔。是在中国白兔基础上由日本选育而成的。其外观特点是全身毛纯白,红眼睛,两耳长大而竖起,头呈方形,嘴稍钝,其外观特点是全身毛纯白,红眼睛,两耳长大而竖起,头呈方形,嘴稍钝,四肢粗壮,体型较长,毛浓密。成年兔体重约四肢粗壮,体型较长,毛浓密。成年兔体重约4 46 6公斤,体格健壮,繁殖公斤,体格健壮,繁殖率强,生长快,耳部皮薄,耳部血管清晰,因而在耳上作静脉注射比较方率强,生长快,耳部皮薄,耳部血管清晰,因而在耳上作静脉注射比较方便。但是抗病力较差。便。但是抗病力较差。现在学习的是第16页,共71页2 2
21、、小鼠、小鼠小鼠属哺乳纲,啮齿目,鼠科,是野生鼷鼠的变种,其较常小鼠属哺乳纲,啮齿目,鼠科,是野生鼷鼠的变种,其较常见的是小白鼠,全身白毛,但也有其它毛色者。小鼠寿命约见的是小白鼠,全身白毛,但也有其它毛色者。小鼠寿命约2 2年,年,性成熟期性成熟期35355555天,孕期天,孕期20202525天,每胎生仔天,每胎生仔2 21212只,成年小鼠体重只,成年小鼠体重约为约为202030g30g。用小鼠作动物实验有以下的优点:一是来源方便,繁殖周期短,产仔用小鼠作动物实验有以下的优点:一是来源方便,繁殖周期短,产仔多,生长速度快,饲料消耗少,生活条件容易控制,价格低。适合于需要多,生长速度快,饲
22、料消耗少,生活条件容易控制,价格低。适合于需要大量动物的实验。二是小鼠较易培育成纯系动物,具有较多的近交系、突大量动物的实验。二是小鼠较易培育成纯系动物,具有较多的近交系、突变系、变系、F1F1动物和封闭群等,便于科学研究之用。三是小鼠较为温顺,动物和封闭群等,便于科学研究之用。三是小鼠较为温顺,易于捕捉和进行实验操作。易于捕捉和进行实验操作。 现在学习的是第17页,共71页(1 1)适用范围)适用范围1 1)动物实验中用得最多的动物,可以制作多种疾病的动物)动物实验中用得最多的动物,可以制作多种疾病的动物模型。模型。2 2)药理、药效、毒理研究。)药理、药效、毒理研究。(2 2)不足之处:)
23、不足之处:1 1)对外界环境的适应能力差,如气温过高或过低,或过)对外界环境的适应能力差,如气温过高或过低,或过饥过饱等,均会引起死亡,抗病力也较差。饥过饱等,均会引起死亡,抗病力也较差。2 2)个体较小,每次取血量较少,也不适宜进行连续采血。)个体较小,每次取血量较少,也不适宜进行连续采血。3 3)在体实验较为困难。)在体实验较为困难。 现在学习的是第18页,共71页(3 3)品种)品种小鼠的品系较多,目前已培育的近交系有数百种,是小鼠的品系较多,目前已培育的近交系有数百种,是但国际上最常用的近交系品种也只有但国际上最常用的近交系品种也只有7 71010种。种。1 1)中国昆明()中国昆明(
24、KMKM)种:属封闭群动物,系在)种:属封闭群动物,系在19461946年从印年从印度引进到昆明,于度引进到昆明,于19521952年从昆明引进到北京生物制品研年从昆明引进到北京生物制品研究所,再推广到全国。抗病能力较强,容易饲养,繁究所,再推广到全国。抗病能力较强,容易饲养,繁殖率高。现普遍用于药理、毒理、微生物学和病毒学殖率高。现普遍用于药理、毒理、微生物学和病毒学的研究及生物制品和药品的鉴定等方面。的研究及生物制品和药品的鉴定等方面。2 2)ICRICR小鼠:小鼠:3 3)LACALACA小鼠小鼠 现在学习的是第19页,共71页3.3.品种品种小鼠的品系较多,目前已培育的近交系有数百种,
25、是小鼠的品系较多,目前已培育的近交系有数百种,是但国际上最常用的近交系品种也只有但国际上最常用的近交系品种也只有7 71010种。种。(1 1)中国昆明()中国昆明(KMKM)种:属封闭群动物,系在)种:属封闭群动物,系在19461946年从印年从印度引进到昆明,于度引进到昆明,于19521952年从昆明引进到北京生物制品研究所,年从昆明引进到北京生物制品研究所,再推广到全国。抗病能力较强,容易饲养,繁殖率高。现普遍再推广到全国。抗病能力较强,容易饲养,繁殖率高。现普遍用于药理、毒理、微生物学和病毒学的研究及生物制品和药品用于药理、毒理、微生物学和病毒学的研究及生物制品和药品的鉴定等方面。的鉴
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