实验一显微镜使用和简单染色.ppt

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1、食品微生物学,实验技术,实验内容,细菌简单染色与显微镜的使用 细菌革兰氏染色法及细菌形态和特殊结构特征 观察酵母菌形态及放线菌的形态 食品中常见霉菌形态特征观察 培养基的配制与灭菌 稀释平板计数及酵母菌的分离与鉴定 酵母菌的纯培养与酒精发酵 血球计数板的使用及运用 明胶液化、淀粉水解等生化试验 乳酸细菌的培养与酸牛奶的制作 微生物细胞大小的测量 独立实际操作考试,适用专业：食品科学与工程（含食科院 专业，东方食科专业，食科 教），食品质量与安全专 业；共9个班。,食品微生物学实用技术课程考试方法与计分标准,一、理论题考试（笔试，20分）：考试时间15min。 两道题：型题（基本原理与概念等）个

2、，满分为12分； 型题（培养基成分与功用）1个，满分为8分。 （均采用抽题方式，各人题目内容均不一样） 二、实际动手操作考试题( 单人独立操作，50分) ：考试时间45min。 革兰氏制片染色、显微镜使用与保养：满分35分；考试时间：25min。 菌种移植：满分5分；考试时间10min； 显微镜观察微生物的个体形态：满分5分；考试时间5min；细菌1个、放线菌1个、霉菌3个。 菌落识别：满分5分；考试时间5min。细菌1个、酵母1个、放线菌1个、霉菌2个 三、平时成绩（ 30分） 包含：实验报告的份数与质量(满分20分)；实验课中操作动手的态度、力度与到课率(满分10分)。 四、考核时间（3个

3、学时） 最后一次实验课全班同学在实验室分组进行第一题和第二题考试， 由四位老师监考，当场不进行重考。,实验报告书写和实验要求,1. 一个实验技术内容写一份报告。 2. 实验内容包括实验目的、原理、操作步骤及实验结果，强调的是不能将书本上的搬到实验报告中，必须是你真实完成的步骤及对应每步的结果反映在你的报告中。 3. 要求绘图时必须用铅笔描绘，用一个圆表示从显微镜看到的视野，标明菌名、放大倍数等。,大肠杆菌 10010,4. 实验结束后要求每位同学将自己使用过的仪器和玻璃器皿打扫干净，并放回原处，保持实验室整洁，每次实验全班留4位同学打扫实验室卫生。,实验一 细菌简单染色及显微镜使用,一、目的要

4、求 学习并掌握显微镜油镜的使用技术。 学习微生物涂片，简单染色的基本方法及无菌操作技术，通过显微镜观察,掌握细菌的个体形态。 二、实验原理 (一)油镜的工作原理 1.增加照明亮度：油镜与玻片之间加入与 玻璃的折射率（n=1.55）相仿的镜油（ 常用香柏油，n=1.52）,减少光线折射； 2.增加显微镜的分辨率： 分辨率（最大可分辨距离）= /2NA (二)染色的原理 只用一种染料（结晶紫或石炭酸复红），是细菌着色，与背景形成鲜明的对比，便于在显微镜下观察细菌的一般形态构造。,a干燥系 b油浸系,三、器材 1. 器材：显微镜，香柏油，二甲苯，擦镜纸 ，载玻片，接种 环，酒精灯。 2. 菌种：细菌标本片；金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌斜面菌 种。 3. 染色液：石炭酸复红溶液、蒸馏水。 四、操作方法 （一）本室显微镜的结构介绍 (二)显微镜的油镜使用 1. 调节光照 2. 低倍镜观察 3. 油镜观察 4. 细菌形态描绘 5. 显微镜的保养,普通光学显微镜结构图,螺旋菌,螺旋体,弧菌,短杆菌,梭状芽孢杆菌,长杆菌,细菌个体形态图,(三)简单染色步骤,涂片,干燥,火焰固定,染色,镜检,水洗,干燥,冷却,棉塞,五、作业与思考题 1. 绘出所观察细菌的个体形态图。 2. 制片中火焰固定的目的是什么？ 3. 显微镜油镜使用的注意事项有哪些？,