药物分析维生素类药物的分析.ppt

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1、第九章维生素类药物的分析The Analysis of Vitamines,概 述,维生素是维持人体正常生理机能所必需的生物活性物质。 如果人体缺少某种维生素，就会引起维生素缺乏症，而影响人体的正常生理机能。 例如: VA 缺乏夜盲症 VB1缺乏脚气病,脂溶性： VA、VD、VE、VK等 水溶性：B族（VB1、VB2等）、VC 、烟酸、 叶酸、泛酸等,按溶解性分类,9.1 维生素A的分析,一、结构与性质 VA含有共轭多烯醇侧链的环已稀(有多种异构体),R=H VA醇 VA1 R= COCH3 VA醋酸酯 R= COC15H31 VA棕榈酸酯,VA为油状物,存在于鱼肝脏中,称鱼肝油,不溶于水.

2、有人工合成的.,国际单位IU=0.344微克维生素醋酸酯； IU0.300微克维生素醇 换算：1g维生素醋酸酯相当于：,1g维生素醇相当于：,VA1: VA2:(去氢VA) VA3:(去水VA),二、鉴别试验 1、三氯化锑反应 VA在饱和无水三氯化锑的无醇三氯甲烷溶液中显蓝色，渐变成紫红色。（P245）,注意:在水中三氯化锑水解,必须在绝对无水中进行!,2、紫外吸收光谱 VA的无水乙醇溶液在326nm有最大吸收。,VA(5个共轭双键)在盐酸中加热,生成6个共轭双键的 去水VA VA在326nm有一个吸收峰 去水VA在350-390nm有三个吸收峰（P247）,3、TLC：,确认醇或酯，是醋酸酯

3、或其他酸酯， 例：VA和其标准品用环己烷溶解 展开剂：环己烷乙醚（80：20） 板：硅胶G 显色：磷钼酸为显色剂 Rf： VA 醇 0. VA 醋酸酯 0.4 VA棕榈酸酯 0.7,三含量测定,维生素中含有稀释用油和其它杂质，所测得的吸光度不是维生素独有的吸收对测定有影响。 即在三个波长处测得吸光度，进行校正后再计算。称为三点校正法 原理：吸光度是维生素A和杂质吸收之和，测得A值需校正。（最大吸收为328nm),紫外分光光度法三点校正法,方法: (1)分别测300、316、328、340、360nm吸光度， 求出各波长吸光度与328nm吸光度比值， 各比值与P249表中数据对比； (2)若比值

4、不超过0.02可直接用测得A值； (3)若比值超出0.02则A需校正： A（校正）=3.52(2A328-A316-A340) (4)计算：,A:吸光度; C:浓度(g/mL); L:溶液厚度(cm);,求效价：每g供试吕中所含维生素A的国际单位,求百分含量：,A：吸光度（校正后的吸光度） D：稀释倍数； 1900：以环已烷为溶剂时的换算因子； L：比色池厚度； W：取样量；,9.2维生素B1的分析,一、化学结构与性质 维生素B1:氨基嘧啶环和噻唑环通过亚甲基连接成的季铵类化合物. 白色结晶,溶于水,显酸性.,学名: 氯化4-甲基-3-（2-甲基-4-氨基-5-嘧啶基）甲基-5-（2-羟乙基）

5、噻唑的盐酸盐 俗名:盐酸硫胺,二. 鉴别试验,1. 硫色素荧光反应： 维生素B1在碱性溶液中，与铁氰化钾氧化成硫色素，在正丁醇中显蓝色荧光,VB1专属反应，用于鉴别和含量测定。,2、沉淀反应： 碘化汞钾-淡黄色沉淀 碘-红色沉淀 VB1 硅钨酸-白色沉淀 苦味酸-扇形白色结晶,三. 含量测定 1、非水溶液滴定法：（Ch.P收录） VB1分子中含有已成盐的伯胺和季铵基团，在非水溶液中，在醋酸汞存在下，均可被高氯酸滴定。,溶剂：冰醋酸 / 醋酸汞 指示剂：喹哪定红- 亚甲蓝混合指示液 滴定剂：高氯酸（0.1mol/L) 终点：天蓝色 摩尔比：VB1：高氯酸=1：2 VB1摩尔质量=337.27 滴

6、定度T=0.1(1/2) 337.27=16.86mg/ml,2、紫外UV（中国药典） VB1片：方法与片剂含量测定相同(246nm),VB1注射液：与液剂相同。（246nm),9.3 维生素C的分析 一、化学结构,1、 具有内酯结构。 碱性下可水解。 2、具有烯二醇基。 还原性，能够被氧化成去氢 抗坏血酸。 3、结构与糖类相似，具有糖性质。 溶于水，酸性，旋光性。,D(-)-异抗坏血酸,L(+)-异抗坏血酸,L(+)-抗坏血酸,D(-)-抗坏血酸,4、具有4种光学异构体。其中生理活性最强的是 L（+）-抗坏血酸,二、鉴别试验 1、硝酸银反应（中国药典） 烯二醇基具有还原性，可被硝酸银氧化成去

7、氢抗血酸，同时生成黑色的银。,2、与2，6-二氯靛酚（染料）反应 VC被还原为无色的酚亚胺,3. 糖的性质 VC的结构很象糖结构，具有糖的性质 VC + 三氯化醋酸或盐酸-水解-脱羧-戊糖-失水-糠醛-（加吡咯，加热）-蓝色,4、紫外分光光度法（英国药典） VC在盐酸溶液中，243nm最大吸收。,三含量测定,1. 碘量法（Ch.P收录） VC在醋酸条件下，被碘定量氧化。,加入淀粉指示剂，蓝色不褪为碘过量（30S内）。 由消耗碘量计算含量。,操作：（P265）,终点颜色：无色蓝色 1ml 0.1mol/L碘液，1ml8.806mg C6H8O6 加入新沸放冷的水为了减少水中溶解氧的影响。 酸性：

8、使VC在空气中氧化速度减慢。 VC注射液中常加有亚硫酸盐如NaHSO3作为抗氧剂.,终点的颜色是溶液由无色变为红色。,氧化型（红色）,还原型（无色）,+,+,2、 2,6-二氯靛酚滴定法 酸性下直接用2,6-二氯靛酚滴定，用滴定剂自身的颜色变化指示终点，不需要另外的指示剂。,3、高效液相色谱法 HPLC P276,9.4 维生素D VD是一类抗佝偻病维生素的总称,有片剂,注射剂,胶囊等. 一、结构（P268） 开环麦角甾烯醇，又称麦角骨化酸。,VD2，VD3 无色针状结晶，旋光性，不溶于水。,二、鉴别试验 1、显色反应,2、维生素D2和D3的区分,三、含量测定 高效液相色谱法，药典收录。,名称

9、：消旋-生育酚醋酸酯（ -异构体生理活性最强） 母核：苯骈二氢吡喃衍生物，苯环上有一乙酰化的酚羟基 侧链：脂肪烷烃 性质：不溶于水，油状，微黄色液体。,9.5 维生素E（称为生育酚） 一、结构：苯并二氢吡喃醇衍生物，,二、鉴别试验 1、硝酸反应：（药典收录）VE在硝酸条件下,水解生成生育酚.生育酚被硝酸氧化为邻醌结构的生育红. VE + HNO3 -水解生成生育酚-生育红（橙红色） 2、水解后氧化反应： VE在碱性条件下水解，得生育酚，在联吡啶和三氯化铁试液的作用下，反应产生血红色配离子。 VE+KOH 生育酚（加入三氯化铁）-生育醌 + 铁配合物 （血红色）,3、UV吸收： VE的0.01%

10、无水乙醇液： max=284nm min=254nm 4、红外光谱（中国药典）,三、杂质检查 检查游离生育酚: ChP2005 铈量法：用Ce(SO4)2(0.01mol/L)滴定， 指示剂：二苯胺 终点：亮黄灰紫 消耗Ce(SO4)2液不得超过1.0ml。,1、铈量法（中国药典） 原理：VE用硫酸加热回流，水解成生育酚，用硫酸铈定量地氧化为对一生育醌，过量的硫酸铈氧化二苯胺指示剂而指示滴定终点。 终点：亮黄灰紫 ，需作空白试验。,四、含量测定,2、气相色谱法：Chp2005,3、高效液相色谱法 日本药局方（JP13）,练习题：维生素AD胶丸中维生素A的含量测定 已知：平均胶丸重为0.0815

11、g 维生素A的标示量为10000IU/丸 取样：,测定数据如下表，求：维生素A的标示百分含量。,首先要求样品的 。,计算吸收度比值和吸收度比值差。（填于上表）,由此可知，应该用测得的328nm处的吸收度计算。,然后计算校正吸收度与未校正吸收度相差的百分数,由结果知，需计算校正吸收度。,维生素A的标示含量,维生素A醋酸酯胶丸含量测定:取内容物39.1 mg,加环己烷溶解并稀释成100ml，在下列五个波长处测得吸收度A值如下：,已知：平均胶丸内容物重为0.08736g;维生素A的标示量为3000 IU/丸 试求：维生素A的标示百分含量？,维生素A醋酸酯胶丸的含量测定，取内容物W，加环己烷溶解并稀释至10ml，摇匀，精密量取0.1ml,再加环己烷稀释至10ml ，使其浓度为915IU/ml。已知内容物平均重量为80.0mg,每丸标示量为10000IU。试计算取样量（ W ）的范围是多少？,