微生物农药病毒.ppt

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1、关于微生物农药病毒现在学习的是第1页，共80页 病毒是非细胞形式的最小有机体，是一种最原始的生命形态。一个病毒由两部分构成：内部是核酸，外部是衣壳，成分是蛋白质。结构简单。只含有一种类型的核酸（RNA或DNA）。没有细胞器和细胞构造、不能独立生活，只能在活的寄主细胞内才能复制增殖。1、什么是病毒？一、病毒的主要特征现在学习的是第2页，共80页现在学习的是第3页，共80页2、病毒与其他生物的主要区别、病毒与其他生物的主要区别病毒只含一种核酸，病毒只含一种核酸，DNADNA或或RNARNA，而其他生物一般同时，而其他生物一般同时含有含有DNADNA和和RNARNA两种核酸；两种核酸；病毒依靠自身的

2、核酸通过复杂的生物合成过程进病毒依靠自身的核酸通过复杂的生物合成过程进行复制，而不是通过二分裂或类似二分裂方式在行复制，而不是通过二分裂或类似二分裂方式在特定的宿主活细胞中进行繁殖；特定的宿主活细胞中进行繁殖；现在学习的是第4页，共80页病毒缺乏完整的酶系统，不含核糖体，病毒缺乏完整的酶系统，不含核糖体，必须利用必须利用宿主细胞的核糖体合成自身蛋白质宿主细胞的核糖体合成自身蛋白质，脱离宿主不，脱离宿主不能进行任何形式的代谢活动；能进行任何形式的代谢活动；病毒病毒对抗菌素对抗菌素或其他对微生物代谢途径起作用的或其他对微生物代谢途径起作用的因因子子不敏感不敏感；病毒对宿主病毒对宿主DNADNA复制

3、有一定指导性。复制有一定指导性。昆虫病毒的主要组成成分是核酸和蛋白质，只有核酸能够繁殖和具有感染能力。现在学习的是第5页，共80页3 3、病毒的复制、病毒的复制病毒在活细胞内，以其基因为模板，在酶的作用下，病毒在活细胞内，以其基因为模板，在酶的作用下，分别合成病毒基因及蛋白质，再组装成完整的病毒颗分别合成病毒基因及蛋白质，再组装成完整的病毒颗粒，这种方式称为粒，这种方式称为复制（复制（replication)replication)。从病毒进入宿主细胞开始，经过基因组复制和病毒蛋白从病毒进入宿主细胞开始，经过基因组复制和病毒蛋白合成，至释放出子代病毒的全过程，称为一个合成，至释放出子代病毒的全

4、过程，称为一个复制周期复制周期。病毒复制周期：包括病毒复制周期：包括吸附、侵入、脱壳、大分子合成、吸附、侵入、脱壳、大分子合成、装配与释放装配与释放五个连续步骤。五个连续步骤。现在学习的是第6页，共80页复制周期复制周期现在学习的是第7页，共80页4、昆虫病毒分类与性状、昆虫病毒分类与性状病毒分类主要依据：病毒分类主要依据：1、病毒粒子特性、病毒粒子特性（1）病毒的形态特征病毒的形态特征（囊膜、粒子的大小、形状以及亚显微结构）；（囊膜、粒子的大小、形状以及亚显微结构）；（2）生理生化和物理性质生理生化和物理性质；（3）病毒基因组病毒基因组（核酸的类型、特性）（核酸的类型、特性）；（4）病毒蛋白

5、病毒蛋白（数量、大小、功能、活性）；（数量、大小、功能、活性）；（5）病毒脂类和病毒脂类和碳水化合物的含量及特性碳水化合物的含量及特性；（；（6）病毒基因组组成和复制特性病毒基因组组成和复制特性。2、病毒抗原性质、病毒抗原性质3、病毒生物学特性、病毒生物学特性 天然寄主范围、传播特性、分布、致病机理、引发的病理和组天然寄主范围、传播特性、分布、致病机理、引发的病理和组织病理学特点。织病理学特点。现在学习的是第8页，共80页 属于属于13个病毒科，个病毒科，2个病毒亚科，个病毒亚科，21个病毒属个病毒属1、根据病毒核酸的类型分为：、根据病毒核酸的类型分为：（1）双链）双链DNA病毒（有囊膜）：病

6、毒（有囊膜）：杆状病毒科；多分杆状病毒科；多分DNADNA病毒科；病毒科；痘病毒科；痘病毒科；泡囊病毒科；泡囊病毒科；（2）双链）双链DNA病毒（无囊膜）：病毒（无囊膜）：虹彩病毒科；虹彩病毒科；细尾病毒科细尾病毒科 （3）单链）单链DNA病毒（无囊膜）病毒（无囊膜）：细小病毒科：细小病毒科二、昆虫病毒分类：现在学习的是第9页，共80页（4）双链）双链 RNA病毒病毒：呼肠孤病毒科；呼肠孤病毒科；二分二分RNARNA病毒科病毒科（5）单链）单链RNA病毒病毒：微微RNARNA病毒科；野田村病毒科；病毒科；野田村病毒科；T4T4病毒科病毒科（6）DNA和和RNA反转录病毒反转录病毒，包括：，包括

7、：前病毒科；前病毒科；变位病毒科变位病毒科现在学习的是第10页，共80页2、根据包含体在寄主细胞中的部位，分为：（1 1）核型多角体病毒）核型多角体病毒(NPV)(NPV)寄生在寄主寄生在寄主细胞核细胞核内，包含体内含有多个杆状病毒粒子。内，包含体内含有多个杆状病毒粒子。（2 2）质型多角体病毒）质型多角体病毒(CPV)(CPV)寄生在寄主寄生在寄主细胞质细胞质中，包含体内含有多个球状病毒粒子。中，包含体内含有多个球状病毒粒子。（3 3）颗粒体病毒）颗粒体病毒(GV)(GV)在感染的在感染的细胞核里和细胞质里均可发育形成细胞核里和细胞质里均可发育形成。多为椭圆形，也有。多为椭圆形，也有肾形，每

8、个包含体一般仅含一个杆状病毒粒子。肾形，每个包含体一般仅含一个杆状病毒粒子。（4 4）无包含体病毒）无包含体病毒 如昆虫浓核病毒、感染病毒的寄主细胞核膨胀、核内物质呈浓密、如昆虫浓核病毒、感染病毒的寄主细胞核膨胀、核内物质呈浓密、丰盈现象。丰盈现象。（5 5）昆虫痘病毒）昆虫痘病毒(EPV)(EPV)于于细胞质内细胞质内，但纺锤形包涵体是不包埋病毒粒子的。，但纺锤形包涵体是不包埋病毒粒子的。现在学习的是第11页，共80页昆虫病毒包括两类昆虫病毒包括两类昆虫病原病毒昆虫病原病毒虫媒病毒虫媒病毒昆虫病原病毒现在学习的是第12页，共80页昆虫病原病毒：是指以昆虫为宿主并对昆虫有致病性的是指以昆虫为宿

9、主并对昆虫有致病性的病毒，超显微没有细胞结构，在活细胞里专性寄生的大分病毒，超显微没有细胞结构，在活细胞里专性寄生的大分子微生物。子微生物。在活体外具有一般大分子的特征，进入宿主细胞又在活体外具有一般大分子的特征，进入宿主细胞又具有生命特征具有生命特征 80%的昆虫病毒都是农林业中常见的鳞翅目的昆虫病毒都是农林业中常见的鳞翅目害虫的病原体，国此是害虫生物防治的巨大资源库害虫的病原体，国此是害虫生物防治的巨大资源库。现在学习的是第13页，共80页三、昆虫病毒研究历史和现状三、昆虫病毒研究历史和现状家蚕和蜜蜂黄疸病家蚕和蜜蜂黄疸病。中国陈旉所著。中国陈旉所著农书农书(1149)中即有关于家中即有关

10、于家蚕蚕“高节高节”、“脚肿脚肿”病的记载，即中国农民俗称的病的记载，即中国农民俗称的“脓病脓病”。20世纪初才证明世纪初才证明“脓病脓病”病原是病原是核型多角体病毒核型多角体病毒1949年年加拿大加拿大引进欧洲引进欧洲云杉叶蜂云杉叶蜂NPV(核多角体病毒核多角体病毒)控制害虫。控制害虫。1940-60年代主要应用细菌防治，年代主要应用细菌防治，70年代才利用病毒年代才利用病毒。1981年，对病毒病的描述，几乎遍及昆虫纲的各个目，记载了年，对病毒病的描述，几乎遍及昆虫纲的各个目，记载了800多种多种寄主昆虫和螨类的寄主昆虫和螨类的1200种病毒病。种病毒病。1980年代年代，我国我国已经分离出

11、已经分离出200种以上的昆虫病毒。种以上的昆虫病毒。现在学习的是第14页，共80页俄：黄叶蜂NPV、甘蓝夜盗蛾、舞毒蛾、美国白蛾、天幕毛虫等。捷：美国白蛾GV法：松带蛾CPV日：1974年注册了赤松毛虫CPV，直升飞机喷洒。还对茶小卷叶蛾、茶卷叶蛾GV进行研究利用。埃及、中：斜纹夜蛾NPV新西兰：牧草蝙蝠蛾WNPV斐济：独角仙病毒现在学习的是第15页，共80页 国际上已报道过的昆虫病毒有国际上已报道过的昆虫病毒有1600多种多种，分属于，分属于6个目的昆虫，个目的昆虫，60%为杆状病毒为杆状病毒，能引起，能引起1100种昆虫和螨类发病，可控制近种昆虫和螨类发病，可控制近30%的粮的粮食和纤维作

12、物上的主要害虫。食和纤维作物上的主要害虫。至少有至少有60多株进入大田应用或示范，约多株进入大田应用或示范，约20多株制成杀虫剂，仅就俄多株制成杀虫剂，仅就俄罗斯而言，罗斯而言，1990年已有年已有14种病毒杀虫剂种病毒杀虫剂，其中有，其中有7种年总产量为种年总产量为60多吨多吨，防治面积，防治面积150万公顷。万公顷。1971年，棉铃虫年，棉铃虫NPV在美国成为第一个商品化制剂在美国成为第一个商品化制剂，1987年美国年美国加强了对舞毒蛾、黄杉毒蛾、苜蓿尺蠖等加强了对舞毒蛾、黄杉毒蛾、苜蓿尺蠖等NPV的研究。的研究。现在学习的是第16页，共80页 我国我国已报道已报道220种，种，250株株

13、，绝大部分为杆状病毒，寄生，绝大部分为杆状病毒，寄生在在70多种寄主中。多种寄主中。始于始于60年代年代，先是调查、收集，先是调查、收集，70年代后做了大量年代后做了大量工作。工作。1987年我国将棉铃虫年我国将棉铃虫NPV投入商品化生产。投入商品化生产。北京北京、广东广东(斜纹夜蛾斜纹夜蛾NPV)、武汉武汉、华东华东(棉铃虫棉铃虫NPV)都进行过卓有成效的工作。都进行过卓有成效的工作。我国有我国有20株进入大田应用或示范株进入大田应用或示范，7株制成制剂株制成制剂，先，先后建立后建立5座工厂，一种新的生物农药产业。座工厂，一种新的生物农药产业。现在学习的是第17页，共80页从从防治对象防治对

14、象来看，可分为来看，可分为二个阶段二个阶段:4060年代：食叶性年代：食叶性森林害虫森林害虫；70年代后：年代后：农业害虫农业害虫。从从病毒生产方式病毒生产方式，二个阶段二个阶段:40年代到年代到60年代：年代：野外采集野外采集；之后：之后：人工饲养虫制成杀虫剂人工饲养虫制成杀虫剂。现在学习的是第18页，共80页四、病毒杀虫剂的优点四、病毒杀虫剂的优点选择性好：选择性好：不损伤天敌，不易引起生态平衡的破坏。传播性强：传播性强：很快扩散蔓延，造成流行病。持久性长：持久性长：包涵体可抵抗不良环境，具有非常好的稳定性。4)经济效益高：经济效益高：剂量低，使用简便。5)安全无害：安全无害：无残留。现在

15、学习的是第19页，共80页五、病毒杀虫剂的缺点五、病毒杀虫剂的缺点1)防治效果慢防治效果慢：10天，潜伏期较长，往往降低其商业价值和实际效果。2)防治谱窄防治谱窄：不能成功地用来防治种植地区生长季节内繁衍的多种害虫。3)受到温度、阳光等环境条件影响较大环境条件影响较大。4)不易生产不易生产（活体生物培养）。现在学习的是第20页，共80页存在的安全隐患昆虫病毒、其它的无脊椎动物、脊椎动物和植物病毒之间并无明确的界限。日本乙型脑炎病毒通过三带喙库蚊传染给人类。黄热病毒和登革热病毒通过伊蚊传染人类。呼肠孤病毒科呼肠孤病毒科环状病毒属的全体成员、朋扬病毒科朋扬病毒科的全体成员、弹弹状病毒科状病毒科水疱

16、病毒属和狂犬病毒属的部分成员，植物呼肠孤病植物呼肠孤病毒毒等，都是既能使昆虫致死，又能寄生植物；野田村病毒野田村病毒既能使昆虫发病，又能使哺乳动物发病致死。现在学习的是第21页，共80页六、六、DNADNA病毒杀虫剂病毒杀虫剂一、核型多角体病毒（一、核型多角体病毒（NPVNPV）二、颗粒体病毒（二、颗粒体病毒（GVGV）三、昆虫痘病毒（三、昆虫痘病毒（EPVEPV）四、细小病毒（四、细小病毒（DNVDNV）五、其他五、其他DNADNA杀病毒杀病毒 1 1、多分、多分DNADNA病毒科病毒科 2 2、虹彩病毒科、虹彩病毒科 3 3、泡囊病毒科、泡囊病毒科 4 4、细尾病毒科、细尾病毒科 5 5、

17、棕榈独角仙病毒、棕榈独角仙病毒现在学习的是第22页，共80页 杆状病毒杆状病毒 A亚组亚组核型多角体病毒核型多角体病毒(NPV)，如家蚕，如家蚕NPV，棉铃虫，棉铃虫NPV，松毛虫，松毛虫NPV，春尺蠖，春尺蠖NPV，舞毒蛾，舞毒蛾NPV，斜纹夜蛾，斜纹夜蛾NPV，粘虫，粘虫NPV，中国刺蛾，中国刺蛾NPV等；等；B亚组亚组颗粒体病毒颗粒体病毒(GV)，如黄地老虎，如黄地老虎GV，菜粉蝶，菜粉蝶GV，茶小卷叶蛾茶小卷叶蛾GV等；等；C亚组亚组非包涵体核型杆状病毒非包涵体核型杆状病毒，如印度棕榈独角仙病毒；，如印度棕榈独角仙病毒；D亚组亚组非包涵体多分体非包涵体多分体DNA基因组核型杆状病毒基因

18、组核型杆状病毒，如甜，如甜菜尺蠖姬蜂病毒。菜尺蠖姬蜂病毒。现在学习的是第23页，共80页感染病毒的幼虫形成大量包含体，扩散、传播杆状病毒有宿主专一性，宿主仅限于节肢动物，对脊椎动物、植物完全不感染应用安全主要见于昆虫体内，是已知昆虫病毒中类群最大、发现最早、研究最多，且实用意义最大的主要应用：1）作为载体，表达外源基因 2）作为杀虫剂，有效地控制农业害虫的发生，并且对环境不造成污染杆状病毒杀虫剂的的特点现在学习的是第24页，共80页1)研发现状研发现状 二十世纪50年代，我国开始昆虫杆状病毒的基础性和应用性研究。有20种左右杆状病毒杀虫剂进入田间试验或实际应用，包括：棉铃虫、甜菜夜蛾、斜纹夜蛾

19、、苜蓿银纹夜蛾、春尺蠖、舞毒蛾、木毒蛾、美国白蛾、甘蓝夜蛾、茶毛虫、灰茶尺蠖、茶尺蠖、大蓑蛾、油桐尺蠖等核型多角体病毒。小菜蛾、菜青虫、黄地老虎、杨扇舟蛾、玉米螟、茶蚕等颗粒体病毒。现在学习的是第25页，共80页2)昆虫表现症状昆虫表现症状 初期：行动迟缓，缺乏食欲，体躯肿胀，变黄或乳白色，皮肤变脆，组织液化，一触即破。后期：趋向最高处，如植株项端，头朝下倒挂。现在学习的是第26页，共80页3)杀虫活性杀虫活性 7个目，290多种害虫，主要为鳞翅目，其次为膜翅目、双翅目、鞘翅目和直翅目昆虫。LD50：50100微克/头。害虫死亡高峰在施药后的4-5天。甜菜夜蛾核型多角体病毒只对甜菜夜蛾有效，药

20、后4天达到死亡高峰；棉铃虫病毒只对夜蛾属的昆虫有效，死亡高峰在第5天 现在学习的是第27页，共80页广谱性的杆状病毒：苜蓿银纹夜蛾病毒广谱性的杆状病毒：苜蓿银纹夜蛾病毒 对10多种害虫有效。克服防治谱窄的部分弱点 但活性低12个数量级。研究最为深入 现在学习的是第28页，共80页重要品种：重要品种：（1）核多角体病毒）核多角体病毒(nuclear polyhedrosis viruses，简称简称NPV)是是研究最早研究最早、最详细的一个类群，我国至少已发现、最详细的一个类群，我国至少已发现60多种，已有多种，已有比较成功的病毒制剂。比较成功的病毒制剂。包涵体的形态结构包涵体的形态结构：NPV

21、的包涵体称多角体的包涵体称多角体(polyhedron)，简，简称称IB或或PIB，是在感染的细胞核中产生的包涵和保护病毒粒子的一，是在感染的细胞核中产生的包涵和保护病毒粒子的一团蛋白质，呈多边形，具梭角。团蛋白质，呈多边形，具梭角。常因寄主种类的不同而不同常因寄主种类的不同而不同。常见的有三角形、四角形、五角形、。常见的有三角形、四角形、五角形、六角形、立方形、近圆形和不规则形。六角形、立方形、近圆形和不规则形。现在学习的是第29页，共80页不同多角体的形状现在学习的是第30页，共80页同一品系或分离株病毒的多角体的形状是趋于稳定的同一品系或分离株病毒的多角体的形状是趋于稳定的，相同寄，相同

22、寄主而不同品系或分离株病毒的多角体的形状和平均大小就可能主而不同品系或分离株病毒的多角体的形状和平均大小就可能判别比较大。判别比较大。如从盗毒蛾幼虫体分离的如从盗毒蛾幼虫体分离的NPV的两菌株，一个多角体是多的两菌株，一个多角体是多形状的，另一个是立方形的，而用它们混合感染盗毒蛾幼虫时形状的，另一个是立方形的，而用它们混合感染盗毒蛾幼虫时，在同一感染细胞内并未同时发现两个病毒株，因而，在同一感染细胞内并未同时发现两个病毒株，因而多角体的多角体的形状可以作为辨别一个病毒品系或分离株的标志。形状可以作为辨别一个病毒品系或分离株的标志。多角体的表面有膜，若多角体被溶解，则会留下囊状空泡，再多角体的表

23、面有膜，若多角体被溶解，则会留下囊状空泡，再延长时间，也会被溶解，与核膜相似。延长时间，也会被溶解，与核膜相似。现在学习的是第31页，共80页病毒粒子的形态结构 在在NPV中，每个囊膜可以包封一个至多个核衣壳中，每个囊膜可以包封一个至多个核衣壳，一个囊膜内有多个排列成束的核衣壳的，常称为，一个囊膜内有多个排列成束的核衣壳的，常称为病毒束病毒束.获得囊膜的病毒粒子被随机的获得囊膜的病毒粒子被随机的包埋在蛋白质构成的结包埋在蛋白质构成的结晶状多角体之内晶状多角体之内，一个多角体可以包埋一个至多个病，一个多角体可以包埋一个至多个病毒粒子。而未被包埋的病毒粒子则只有核衣壳。毒粒子。而未被包埋的病毒粒子

24、则只有核衣壳。现在学习的是第32页，共80页核型多角体病毒的包涵体呈多角形，有两种包埋形核型多角体病毒的包涵体呈多角形，有两种包埋形式：式：1、一种是多角体内包埋着许多单个的病毒粒（单粒、一种是多角体内包埋着许多单个的病毒粒（单粒包埋型），简称包埋型），简称SEV2、另一种是、另一种是1个包膜内包裹着多个核壳个包膜内包裹着多个核壳(一般称为病一般称为病毒束毒束)，成束地被包埋于多角体蛋白基质中，成束地被包埋于多角体蛋白基质中(多粒包埋型多粒包埋型)，简称简称MEV。包涵体的大小为包涵体的大小为0.515微米。微米。C亚组与亚组与 D亚组都不形亚组都不形成包涵体。成包涵体。现在学习的是第33页，

25、共80页现在学习的是第34页，共80页棉铃虫棉铃虫NPV的病毒束可有的病毒束可有2-6个核衣壳，最多达个核衣壳，最多达20 多多个；斜纹夜蛾为个；斜纹夜蛾为2-10个；盗毒蛾为个；盗毒蛾为6-10个。个。两种不同包埋型的病毒，与不同的病毒品系或分离株两种不同包埋型的病毒，与不同的病毒品系或分离株有关，是由遗传性决定的。有关，是由遗传性决定的。同一种昆虫的两种不同包埋型的同一种昆虫的两种不同包埋型的NPV，它们对寄主的，它们对寄主的感染力、专一性、对环境的抵抗力以及多角体蛋白的化感染力、专一性、对环境的抵抗力以及多角体蛋白的化学持性、血清学特征等方面都可能有较大的差异学持性、血清学特征等方面都可

26、能有较大的差异。现在学习的是第35页，共80页扫描电子显微镜下的隐纹稻苞虫NPV的多角体现在学习的是第36页，共80页1、对不同化学药剂具有高度抵抗力、对不同化学药剂具有高度抵抗力2、不溶于水及多种有机溶剂、不溶于水及多种有机溶剂3、不被细胞或细胞蛋白酶分解、不被细胞或细胞蛋白酶分解4、在、在pH值值22.9时，可被胰蛋白酶破坏时，可被胰蛋白酶破坏5、溶于强酸和强碱溶液、溶于强酸和强碱溶液6、比重大于水，对低温有较强的抗力，抗高温能力差、比重大于水，对低温有较强的抗力，抗高温能力差7、不溶于昆虫血淋巴，所以将其接种于昆虫的血腔，幼虫不会感、不溶于昆虫血淋巴，所以将其接种于昆虫的血腔，幼虫不会感

27、染。染。8、必须通过幼虫食入，经消化液消化后，才能释放出有感染力的病毒、必须通过幼虫食入，经消化液消化后，才能释放出有感染力的病毒粒子。粒子。核多角体的理化性质核多角体的理化性质现在学习的是第37页，共80页9、经干燥后，可以保存多年性质不变，如家蚕多角体、经干燥后，可以保存多年性质不变，如家蚕多角体在无水氯化钙中保存在无水氯化钙中保存37年，其在碳酸钠中的溶解性不变。年，其在碳酸钠中的溶解性不变。10、可以抵抗细菌的腐败作用，在提纯或死虫尸为细菌污、可以抵抗细菌的腐败作用，在提纯或死虫尸为细菌污染时，多角体一般不受收破坏。染时，多角体一般不受收破坏。11、在昆虫幼虫消化认中的溶解性不受寄主范

28、围的限制、在昆虫幼虫消化认中的溶解性不受寄主范围的限制，对非敏感昆虫也是如此。，对非敏感昆虫也是如此。12、有较强的折光性，成熟的多角体不易被一般染料、有较强的折光性，成熟的多角体不易被一般染料着色，但经酸碱处理一可为一些染料所强染。着色，但经酸碱处理一可为一些染料所强染。现在学习的是第38页，共80页侵染途径：侵染途径：通过幼虫通过幼虫口服侵入口服侵入。多角体在易感虫体中肠内迅速溶。多角体在易感虫体中肠内迅速溶解，侵入上皮细胞，并出现最初的复制。解，侵入上皮细胞，并出现最初的复制。在侵染昆虫细胞核内充满大量的多角体。体内组织液化在侵染昆虫细胞核内充满大量的多角体。体内组织液化。专化性强，一般

29、只感染同种昆虫。专化性强，一般只感染同种昆虫。现在学习的是第39页，共80页中毒症状：中毒症状：初期无明显变化，渐而行动迟缓，食欲减退，体色变淡或油初期无明显变化，渐而行动迟缓，食欲减退，体色变淡或油光色，血淋巴变乳白色。光色，血淋巴变乳白色。体内组织液化，躯体前端膨大，皮肤易裂，破后流出乳白色或褐色体内组织液化，躯体前端膨大，皮肤易裂，破后流出乳白色或褐色浓绸液体，无特殊臭味浓绸液体，无特殊臭味。棉铃虫幼虫的环节处被核型多角体病毒感染棉铃虫幼虫的环节处被核型多角体病毒感染现在学习的是第40页，共80页现在学习的是第41页，共80页 1987年建成我国第一座棉铃虫病毒杀虫剂实验工厂，开始步入商

30、品化生产 1993年，由中国科学院武汉病毒所同湖北蒋湖农场登记了我国第一个昆虫病毒杀虫剂产品棉铃虫核型多角体病毒杀虫剂。随后共有12个昆虫病毒制剂品种登记注册，1个原药品种获得登记。开发最成功的是棉铃虫病毒杀虫剂，十多年里，累计生产2000余吨，累计推广面积超过1000万亩次。推广应用：现在学习的是第42页，共80页 中国科学院动物研究所与河南省济源白云实业有限公司联合开展的昆虫病毒杀虫剂产业化合作项目2 2吨吨/年年50005000亿亿pib/pib/克棉铃虫核型多角体病毒原粉克棉铃虫核型多角体病毒原粉获得国家发改委的生产核准.被列入农业部首批公布的无公害农产品生产推荐被列入农业部首批公布的

31、无公害农产品生产推荐农药品种和植保机械名单中农药品种和植保机械名单中。现在学习的是第43页，共80页（2）颗粒体病毒）颗粒体病毒(GV)最是是法国人于最是是法国人于1926年在患病的大菜粉蝶中发现的。年在患病的大菜粉蝶中发现的。主要存在于鳞翅目昆虫幼虫中，至主要存在于鳞翅目昆虫幼虫中，至1980年，全世年，全世界已发现界已发现100种昆虫感染这种病毒，其中只有一种是膜种昆虫感染这种病毒，其中只有一种是膜翅目昆虫翅目昆虫我国从我国从20多种昆虫中发现这种病毒病多种昆虫中发现这种病毒病有较强的致病性。有较强的致病性。现在学习的是第44页，共80页包涵体的形态颗粒体是包涵和保护病毒粒子的颗粒体是包涵

32、和保护病毒粒子的结晶状蛋白质结晶状蛋白质，体积较，体积较多角体小，呈卵形、椭圆形、肾形，有时也出现长角状、多角体小，呈卵形、椭圆形、肾形，有时也出现长角状、角状、分叉状、不规则形、多角形等。角状、分叉状、不规则形、多角形等。在同一昆虫体内，颗粒体的体积也有不同。在同一昆虫体内，颗粒体的体积也有不同。一个颗粒体仅包埋一个（偶尔一个颗粒体仅包埋一个（偶尔2个）病毒粒子。个）病毒粒子。现在学习的是第45页，共80页稻纵卷叶螟稻纵卷叶螟GV颗粒体颗粒体现在学习的是第46页，共80页菜粉蝶GV颗粒体经弱碱溶解后释放出的病毒粒子现在学习的是第47页，共80页颗粒体的形态结构颗粒体的形态结构病毒粒子呈杆状，

33、常弯曲，大小因寄主种类不同而异。病毒粒子从颗粒体中释放出来后，其直径和长度有增大的现象，病毒粒子脱去囊膜，其长度也会增加。如黄地老虎GV，完整的病毒粒子大小为31070nm，脱去囊膜后，核衣壳大小为32545nm。每个病毒粒子 两层膜包被：囊膜、衣壳；两层膜之间有空隙。现在学习的是第48页，共80页1、比重大于水2、不溶于水及多种有机溶剂3、强酸和强碱条件下迅速溶解，并使粒子变性失活4、耐低温，高温和紫外线易使粒子失活5、有包涵体的颗粒体病毒，在外界环境中较稳定，在室内和野外土壤中的存活时间长达数年6、没有包涵体保护的颗粒体，稳定性差。颗粒体病毒的理化性质颗粒体病毒的理化性质现在学习的是第49

34、页，共80页侵染途径：侵染途径：口服侵入口服侵入易感虫体，颗粒在中肠内溶解，粒子通过肠易感虫体，颗粒在中肠内溶解，粒子通过肠道柱形细胞的微绒毛侵入细胞，在细胞核中增殖，新形成道柱形细胞的微绒毛侵入细胞，在细胞核中增殖，新形成的粒子释放入血液，继发感染。的粒子释放入血液，继发感染。现在学习的是第50页，共80页中毒症状：中毒症状：初期无明显病症，发展出现反应迟钝和停止取食初期无明显病症，发展出现反应迟钝和停止取食，在不同组织中颗粒体大量累积，体色有明显变化，在不同组织中颗粒体大量累积，体色有明显变化，腹面出现淡白或乳白色或带黄色。体壁出现斑点或变腹面出现淡白或乳白色或带黄色。体壁出现斑点或变色，

35、身体变软，皮肤易破。色，身体变软，皮肤易破。现在学习的是第51页，共80页对昆虫有很强的致病性，常常在野外爆发自然流行病对昆虫有很强的致病性，常常在野外爆发自然流行病，抑制寄主种群的发展，实验室饲养昆虫种群也往往因，抑制寄主种群的发展，实验室饲养昆虫种群也往往因受受GV感染而大量死亡感染而大量死亡作感染力测定常以死虫尸内含物的稀释倍数作剂量单位。作感染力测定常以死虫尸内含物的稀释倍数作剂量单位。小龄幼虫比大龄幼虫敏感，大龄幼虫受感染后，可以化小龄幼虫比大龄幼虫敏感，大龄幼虫受感染后，可以化蛹并发育为成虫，但受感染的蛹常常死亡。蛹并发育为成虫，但受感染的蛹常常死亡。经血腔接种，幼虫不受感染。经血

36、腔接种，幼虫不受感染。专一性比专一性比NPV强强，交叉感染只限于种内或属内。，交叉感染只限于种内或属内。现在学习的是第52页，共80页(3)痘病毒痘病毒 病毒形态相似，大小随寄主不同而不同病毒形态相似，大小随寄主不同而不同 鳃角金龟子痘病毒：鳃角金龟子痘病毒：400250毫微米毫微米 鳞翅目和直翅目痘病毒：鳞翅目和直翅目痘病毒：350250毫微米毫微米 双翅目痘病毒：双翅目痘病毒：320230毫微米毫微米 包涵体有包涵体有2类：类：球形体（包埋病毒粒子）球形体（包埋病毒粒子）纺缍体（不含病毒粒子）纺缍体（不含病毒粒子）均在细胞质均在细胞质中形成中形成现在学习的是第53页，共80页 害虫症状与作

37、用机理害虫症状与作用机理 害虫食入包涵体，包涵体进入消化道后溶解，散出病毒害虫食入包涵体，包涵体进入消化道后溶解，散出病毒粒子。粒子在体腔感染寄主脂肪体、气管上皮细胞和生殖腺粒子。粒子在体腔感染寄主脂肪体、气管上皮细胞和生殖腺等。等。害虫染害后，体呈恶白色，脂肪体呈泡沫状，血细害虫染害后，体呈恶白色，脂肪体呈泡沫状，血细胞增大，病毒在脂肪体细胞和血细胞的细胞质内增殖。胞增大，病毒在脂肪体细胞和血细胞的细胞质内增殖。病毒传递主要通过口服和接种进行，没有卵传现象。病毒传递主要通过口服和接种进行，没有卵传现象。现在学习的是第54页，共80页2)杀虫活性杀虫活性 Herpin和和Vago于于1983发

38、现，可感染发现，可感染鞘翅目鞘翅目、鳞翅目、鳞翅目、双翅目双翅目和和直翅目昆虫直翅目昆虫 我国新疆地区发现的新疆西伯利亚蝗寄主。我国新疆地区发现的新疆西伯利亚蝗寄主。现在学习的是第55页，共80页(4)虹彩病毒虹彩病毒 病毒粒子为二十面体，直径病毒粒子为二十面体，直径120200毫微米，毫微米，核心为双股脱氧核糖核酸，无膜，无包涵体。核心为双股脱氧核糖核酸，无膜，无包涵体。代表种为：二化螟虹彩病毒，是鳞翅目幼虫代表种为：二化螟虹彩病毒，是鳞翅目幼虫感染虹彩病毒的第一个例子。发现于日本九州。感染虹彩病毒的第一个例子。发现于日本九州。现在学习的是第56页，共80页昆虫症状与作用机理昆虫症状与作用机

39、理 食入病毒感染，粒子大量复制，在组织内形成大食入病毒感染，粒子大量复制，在组织内形成大量结晶体，活体昆虫出现虹彩颜色。量结晶体，活体昆虫出现虹彩颜色。感染部位主要在脂肪细胞，其次为皮肤上皮细胞感染部位主要在脂肪细胞，其次为皮肤上皮细胞、神经细胞和肌肉细胞。、神经细胞和肌肉细胞。现在学习的是第57页，共80页2)杀虫活性杀虫活性 感染感染28种双翅目，种双翅目，10多种鳞翅目，也可感染鞘翅目、多种鳞翅目，也可感染鞘翅目、半翅目和膜翅目昆虫。半翅目和膜翅目昆虫。主要寄主有：棉铃象甲、叶跳虫、深山叶蝉、稻绿叶主要寄主有：棉铃象甲、叶跳虫、深山叶蝉、稻绿叶跳虫、黑尾叶蝉、小褐飞虱，蚊虫。跳虫、黑尾叶

40、蝉、小褐飞虱，蚊虫。现在学习的是第58页，共80页(5)细小病毒细小病毒 病毒粒子为多轴体，直径约病毒粒子为多轴体，直径约22毫微米，核心为单股毫微米，核心为单股DNA，无膜，无包涵体。，无膜，无包涵体。只有只有3个种，其中只有个种，其中只有浓核症病毒浓核症病毒侵染昆虫。侵染昆虫。现在学习的是第59页，共80页1)害虫症状与作用机理害虫症状与作用机理 幼虫不肿胀而呈萎缩形，死后呈茶褐色，有时为暗红色。幼虫不肿胀而呈萎缩形，死后呈茶褐色，有时为暗红色。可与菜粉蝶颗粒体病毒混合感染，也可单独感染，混合感染多呈可与菜粉蝶颗粒体病毒混合感染，也可单独感染，混合感染多呈肿胀型，单独感染呈萎缩型。肿胀型，

41、单独感染呈萎缩型。害虫死亡较快，在害虫死亡较快，在25下，染虫后下，染虫后23天即可死亡。天即可死亡。现在学习的是第60页，共80页2)杀虫活性杀虫活性 国外：蜡螟浓缩核症病毒和鹿眼蝶浓缩核症病毒。国外：蜡螟浓缩核症病毒和鹿眼蝶浓缩核症病毒。国内：菜粉蝶浓缩核症病毒国内：菜粉蝶浓缩核症病毒 可感染：鳞翅目、鞘翅目、膜翅目害虫可感染：鳞翅目、鞘翅目、膜翅目害虫现在学习的是第61页，共80页七、七、RNARNA病毒杀虫剂病毒杀虫剂一、质型多角体病毒（一、质型多角体病毒（CPVCPV）二、其他二、其他RNARNA杀病毒杀病毒 1 1、双、双RNARNA病毒科病毒科 2 2、野田村病毒科、野田村病毒科

42、 3 3、四对称病毒科、四对称病毒科 现在学习的是第62页，共80页(1)质型多角体病毒（质型多角体病毒（CPV）属于呼肠弧病毒科属于呼肠弧病毒科 1950年年 患病灯蛾幼虫患病灯蛾幼虫 侵袭昆虫侵袭昆虫 消化管消化管 在在细胞细胞质内寄生质内寄生，细胞核中并无多角体，细胞核中并无多角体 已在鳞翅目、双翅目、膜翅目、鞘翅目和脉翅目等已在鳞翅目、双翅目、膜翅目、鞘翅目和脉翅目等200多种昆虫多种昆虫 发现。发现。已知寄主种类和数量，仅次于已知寄主种类和数量，仅次于NPV，在我国已发现有在我国已发现有10多种。多种。现在学习的是第63页，共80页 无囊膜，无囊膜，形态形态有六角形、二十面体、圆球形

43、、椭圆形、四角形和有六角形、二十面体、圆球形、椭圆形、四角形和正方体正方体 直径直径0.20.5微米微米 不溶于水，但在水中经较长时间易被蚀刻，从而容易失去粒子。不溶于水，但在水中经较长时间易被蚀刻，从而容易失去粒子。在碱液中的溶解度小于在碱液中的溶解度小于NPV，粒子在碱液中迅速失活。，粒子在碱液中迅速失活。一个多角体可以埋一个多角体可以埋1001000个病毒粒子个病毒粒子 大多数粒子为二十面体，具大多数粒子为二十面体，具12条突起条突起形态结构形态结构CPV病毒粒子模式图现在学习的是第64页，共80页家蚕CPV立方形多角体现在学习的是第65页，共80页2)昆虫表现症状昆虫表现症状 初期：食

44、欲不振，体形缩小，比例失调形成大头，长刺毛。皮肤初期：食欲不振，体形缩小，比例失调形成大头，长刺毛。皮肤不被侵染，其它组织也很少侵染，无组织液化现象。幼虫消化道吐现不不被侵染，其它组织也很少侵染，无组织液化现象。幼虫消化道吐现不透明和淡黄色或乳白色，失去半透明和淡绿色。透明和淡黄色或乳白色，失去半透明和淡绿色。后期：皮肤出现白色斑块。后期：皮肤出现白色斑块。中肠细胞液化后，多角体可中肠细胞液化后，多角体可被呕吐出来或由粪便排出。被呕吐出来或由粪便排出。现在学习的是第66页，共80页3)杀虫活性杀虫活性 100多种害虫，主要为鳞翅目、少数为双翅目和膜翅目。染虫后多种害虫，主要为鳞翅目、少数为双翅

45、目和膜翅目。染虫后720天天死亡。死亡。口服感染。进入虫体，在后部第口服感染。进入虫体，在后部第7节穿透中肠，在细胞间扩散，直至节穿透中肠，在细胞间扩散，直至中肠前端。中肠前端。中肠上皮细胞核内是病毒中肠上皮细胞核内是病毒RNA合成部位，核周围的细胞质是病毒蛋合成部位，核周围的细胞质是病毒蛋白质合成部位。白质合成部位。致病性强，低剂量即可使寄主昆虫感染致病性强，低剂量即可使寄主昆虫感染 死亡率与剂量没有直接对应性死亡率与剂量没有直接对应性 可通过母代传递至寄主的子代，成为长期抑制寄主种群的一个致病因子可通过母代传递至寄主的子代，成为长期抑制寄主种群的一个致病因子现在学习的是第67页，共80页八

46、、影响病毒防治效果的因素八、影响病毒防治效果的因素 (1)病毒本身病毒本身 选择毒力高的病毒株系 正确掌握适宜的浓度、用药次数及合适的施药时间(2)防治对象防治对象(3)环境因素环境因素1)温度温度 15度，LT50为9天；32度，LT50为23天 2)光照光照 紫外光，5cm5min可使HaNPV全部失活，2h粉纹夜蛾NPV失活3)pH值和土壤值和土壤 HaNPV pH值为2或12时，经24h活性大减，以pH值=7为宜。现在学习的是第68页，共80页九、大量生产与应用九、大量生产与应用 用天然饲料、人工饲料饲养昆虫。原理简单：活虫体、活细胞、活组织 采集或引进昆虫病毒的原种：不同单株毒力不同

47、，且差异很大，所以一定要选用最好的病毒株。必须经济方便：牵涉到大量饲养的方法，对一些昆虫已经解决，如斜纹夜蛾、棉铃虫等，它能用人工配制的食料来解决，若一种病毒能感染几种害虫，应选用最易感染的昆虫。找出一个最适宜的接种量、虫期、环境条件。现在学习的是第69页，共80页大量生产的方法大量生产的方法:直接在害虫自然种群中繁殖直接在害虫自然种群中繁殖：虫口密度大，适当虫期喷，把死虫收回，最简便，适于一些害虫在室内不易人工培养，如叶蜂，森林上的害虫。野外采集野外采集：采回(小区、室内)接种。完全在室内条件下用自然或人工合成的饲料来繁殖完全在室内条件下用自然或人工合成的饲料来繁殖：斜纹夜蛾、地老虎。现在学

48、习的是第70页，共80页病毒杀虫剂生产工艺病毒杀虫剂生产工艺(以以NPV杀虫剂为例杀虫剂为例)病毒的提取技术防菌保护剂增效诱饵剂病毒杀虫剂安全性试验填充剂辅助剂NPV剂型配制称量标准计数生物活性测定产品分装、包装、保藏病毒多角体检测感病虫体的收集、破碎、匀浆过滤NPV的采集、分离、鉴定NPV毒株的引进天然饲料养、添食、使感染，大量增殖NPV直接从野外大量收集NPV虫尸用人工半合成饲料大量增殖NPV重组(遗传改良)昆虫杆状病毒现在学习的是第71页，共80页水平传递：水平传递：经污染的环境和食物传给健康昆虫垂直传递：垂直传递：经雌虫所产的卵传递给它的子代1、由患病幼虫传播：患病毒病而死亡的幼虫，从

49、其尸体中释放出大量的病毒，这些病毒留在植物叶子或其它食物上，甚至严重污染周围环境，从而感染其它健康昆虫。或从口和粪便中排出病毒。昆虫病毒的传播与诱发现在学习的是第72页，共80页2、由患病成虫传播：受感染的成虫，在它们仍能飞行的时候，往往将病毒传播到较大的范围。患病成虫还可通过交尾而将病毒传给对方。3、经鸟类和其它媒介传染：鸟类：鸟类：取食病虫尸的同时食入了病毒，排出的鸟粪残留期很长，并且可以传染到更远的地方寄生昆虫：寄生昆虫：沾染了病毒的寄生蜂产卵管，在产卵过程中将病毒带进寄主体内，在寻找寄主的过程也是接种和传播病毒病的过程。现在学习的是第73页，共80页应用应用 短期防治短期防治：作为一种

50、农药喷到田间。4-5天，还能缩短 长期防治长期防治：一次或多次地使用病毒，希望它能长期地存在于生态体系中，调节种群密度。某些病毒在不同寄主上交替感染，故它可长期保存在生态系统中。选择防治：选择防治：利用其专化强的特点，虫口密度低时杀死一部分害虫来保护天敌，起到了补充防治的作用，最终达到控制害虫的目的协调防治的问题。现在学习的是第74页，共80页注意事项1、防治对象2、密度比水大3、口服进入消化道4、较长的潜伏期5、使用环境6、混用现在学习的是第75页，共80页经验和结果 单独使用：w1-78 在全国不同经纬度的20多个省市，防效达80-90%，科学院病毒所 油桐尺蠖npv 8省20多个地区，2