微生物工程发酵第六章发酵工艺的控制.pptx
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1、微生物工程发酵第六章发酵工艺的控制现在学习的是第1页,共65页温度对微生物发酵的影响主要由哪些?温度对微生物发酵的影响主要由哪些?影响发酵温度的因素主要有哪些?影响发酵温度的因素主要有哪些?发酵热的主要测定方法?发酵热的主要测定方法?如何确定最适发酵温度?如何确定最适发酵温度?发酵过程中发酵过程中pHpH变化的原因主要有哪些?变化的原因主要有哪些?pHpH对发酵的影响主要有哪些?对发酵的影响主要有哪些?发酵过程中发酵过程中pHpH的控制措施主要有哪些?的控制措施主要有哪些?溶氧量对微生物发酵的影响主要有哪些?溶氧量对微生物发酵的影响主要有哪些?有氧发酵中,溶氧量如何变化?有氧发酵中,溶氧量如何
2、变化?为何利用为何利用DODO 浓度的变化,可以对发酵过程进行检测?浓度的变化,可以对发酵过程进行检测?COCO2 2对发酵的影响主要有哪些?对发酵的影响主要有哪些?COCO2 2浓度的控制措施主要有哪些?浓度的控制措施主要有哪些?发酵过程中泡沫产生的危害主要有哪些?发酵过程中泡沫产生的危害主要有哪些?选择消泡剂的主要依据是什么?选择消泡剂的主要依据是什么?常用的消泡剂主要有哪几类?常用的消泡剂主要有哪几类?现在学习的是第2页,共65页 工艺条件控制的目的:为生产菌创造最适工艺条件控制的目的:为生产菌创造最适的环境,使我们所需要的代谢得以最充分的环境,使我们所需要的代谢得以最充分的表达。的表达
3、。现在学习的是第3页,共65页 6.1 发酵过程温度的控制 6.2 发酵过程的pH控制 6.3 发酵过程氧的供需 6.4 CO2对发酵的影响及对其控制 6.5 发酵过程泡沫的形成与控制现在学习的是第4页,共65页6.1 温度变化及其控制温度变化及其控制 6.1.1 温度对微生物的影响 温度对生长的影响温度对生长的影响 温度对发酵的影响温度对发酵的影响现在学习的是第5页,共65页温度对生长的影响温度对生长的影响不同微生物的生长对温度的要求不同,根据不同微生物的生长对温度的要求不同,根据它们对温度的要求大致可分为四类:它们对温度的要求大致可分为四类:嗜冷菌嗜冷菌适应于适应于0260C生长,生长,嗜
4、温菌嗜温菌适应于适应于15430C生长,生长,嗜热菌嗜热菌适应于适应于37650C生长,生长,嗜高温嗜高温菌菌适应于适应于650C以上生长以上生长 现在学习的是第6页,共65页每种微生物对温度的要求可用每种微生物对温度的要求可用最适温度最适温度、最高温最高温度度、最低温度最低温度来表征。在最适温度下,微生物生来表征。在最适温度下,微生物生长迅速;超过最高温度微生物即受到抑制或死亡;长迅速;超过最高温度微生物即受到抑制或死亡;在最低温度范围内微生物尚能生长,但生长速度在最低温度范围内微生物尚能生长,但生长速度非常缓慢,世代时间无限延长非常缓慢,世代时间无限延长;现在学习的是第7页,共65页微生物
5、受高温的伤害比低温的伤害大,即微生物受高温的伤害比低温的伤害大,即超过最高温度,微生物很快死亡;低于最超过最高温度,微生物很快死亡;低于最低温度,微生物代谢受到很大抑制,并不低温度,微生物代谢受到很大抑制,并不马上死亡。这是菌种保藏的原理;马上死亡。这是菌种保藏的原理;现在学习的是第8页,共65页温度对发酵的影响温度对发酵的影响a.a.温度影响反应速率温度影响反应速率发酵过程的反应速率实际是酶反应速率,酶反应有一个最发酵过程的反应速率实际是酶反应速率,酶反应有一个最适温度。适温度。从从阿累尼乌斯方程式阿累尼乌斯方程式可以看到可以看到 dlnKr/dt=E/RT2 积分积分得得 E=2112/1
6、/1/log6.4TTKKrrE活化能活化能Kr速率常数速率常数阿累尼乌斯方程:阿累尼乌斯方程:关于化学反应的速率常数与温度之关于化学反应的速率常数与温度之间的关系式;间的关系式;R气体常数气体常数现在学习的是第9页,共65页 例:青霉菌生产青霉素 青霉菌生长活化能E=34kJ/mol 青霉素合成活化能E=112kJ/mol 青霉素合成速率对温度较敏感,温度控制相当重要现在学习的是第10页,共65页b.b.温度影响发酵方向温度影响发酵方向金色链霉菌金色链霉菌可可同时产生金霉素和四环素,当温度低于同时产生金霉素和四环素,当温度低于300C时,时,合成金霉素能力较强;温度提高,合成四环素的比例也提
7、高,合成金霉素能力较强;温度提高,合成四环素的比例也提高,温度达到温度达到350C时,金霉素的合成几乎停止,只产生四环素时,金霉素的合成几乎停止,只产生四环素现在学习的是第11页,共65页 c.温度温度影响发酵液的物理性质影响发酵液的物理性质 影响基质溶解度,如氧;影响基质溶解度,如氧;影响基质分解速率;影响基质分解速率;现在学习的是第12页,共65页6.1.2 影响发酵温度的因素影响发酵温度的因素 产热因素:生物热 搅拌热 散热因素:蒸发热 辐射热现在学习的是第13页,共65页生物热:生物热是生产菌在生长繁殖时产生的大量热量。影响生物热的因素:随菌株、培养基、发酵时期的不同而不同。生物热的大
8、小还与菌体的呼吸强度有对应关系。现在学习的是第14页,共65页l 培养过程中生物热的产生具有强烈的时间性。培养过程中生物热的产生具有强烈的时间性。在培养初期,菌体处于适应期,菌数少,呼吸作用缓在培养初期,菌体处于适应期,菌数少,呼吸作用缓慢,产生热量较少。慢,产生热量较少。菌体在对数生长期时,菌体繁殖迅速,呼吸作用激烈,菌体在对数生长期时,菌体繁殖迅速,呼吸作用激烈,菌体也较多,所以产生的热量多,温度上升快,必须菌体也较多,所以产生的热量多,温度上升快,必须注意控制温度。注意控制温度。培养后期,菌体已基本上停止繁殖,产生热量不多,培养后期,菌体已基本上停止繁殖,产生热量不多,温度变化不大,且逐
9、渐减弱。温度变化不大,且逐渐减弱。如果培养前期温度上升缓慢,说明菌体代谢缓慢,发酵不如果培养前期温度上升缓慢,说明菌体代谢缓慢,发酵不正常正常;培养基营养越丰富,生物热也越大;培养基营养越丰富,生物热也越大;现在学习的是第15页,共65页搅拌热:好气发酵都有大功率搅拌,搅拌的机械运动造成液体之间,液体与设备之间的摩擦而产生热 Q搅拌=3600(P/V)3600:热功当量(kJ/(kW.h)(P/V):通气条件下单位体积发酵液所消耗的功率(kW/m3)现在学习的是第16页,共65页蒸发热:通入发酵罐的空气和发酵液广泛接触进行热交换。同时必然会引起水分的蒸发;蒸发所需的热量即为蒸发热。现在学习的是
10、第17页,共65页 辐射热:由于发酵罐内外温度差,通过罐体向外辐射的热量。辐射热可通过罐内外的温差求得,一般不超过发酵热的5%。现在学习的是第18页,共65页发酵热:发酵过程中释放出来的净热量。Q发酵=Q生物+Q搅拌-Q蒸发-Q辐射现在学习的是第19页,共65页6.1.3发酵热的测定发酵热的测定方法一:方法一:是用冷却水进出口温度差计算发酵热。在工厂是用冷却水进出口温度差计算发酵热。在工厂里,通过测量冷却水进出口的水温,再从水表里,通过测量冷却水进出口的水温,再从水表上得知每小时冷却水流量来计算发酵热。上得知每小时冷却水流量来计算发酵热。Q发酵发酵GCm(T出出T进进)Cm水的比热水的比热G冷
11、却水流量冷却水流量现在学习的是第20页,共65页方法二:方法二:根据罐温上升速率来计算。先自控,让发酵根据罐温上升速率来计算。先自控,让发酵液达到某一温度,然后停止加热或冷却,液达到某一温度,然后停止加热或冷却,使罐温自然上升或下降,根据罐温变化的使罐温自然上升或下降,根据罐温变化的速率计算出发酵热。速率计算出发酵热。现在学习的是第21页,共65页6.1.4 最适温度的确定最适温度是一个相对概念,是指在该温度下最适于菌的生长或发酵产物的生成;最适发酵温度与菌种、培养基成分、培养条件和菌体生长阶段有关;最适发酵温度的选择 在发酵的整个周期内仅选一个最适培养温度不一定好;温度的选择要参考其它发酵条
12、件;温度的选择还应考虑培养基成分和浓度;现在学习的是第22页,共65页6.1.4.16.1.4.1根据菌种选择根据菌种选择微生物种类不同,所具有的酶系及其性质不同,所微生物种类不同,所具有的酶系及其性质不同,所要求的温度范围也不同。要求的温度范围也不同。如黑曲霉生长温度为如黑曲霉生长温度为370C,谷氨酸产生菌棒状杆菌的生长温度为谷氨酸产生菌棒状杆菌的生长温度为30320C,青霉菌生长温度为青霉菌生长温度为300C。现在学习的是第23页,共65页发酵前期由于菌量少,发酵目的是要尽快发酵前期由于菌量少,发酵目的是要尽快产生大量产生大量菌体,取稍高菌体,取稍高的温度,促使菌的呼吸与代谢,使菌生长迅
13、速;的温度,促使菌的呼吸与代谢,使菌生长迅速;中期菌量已达到合成产物的最适量,发酵需要延长中期,从中期菌量已达到合成产物的最适量,发酵需要延长中期,从而提高产量,因此中期温度要稍低一些,可以推迟衰老。因而提高产量,因此中期温度要稍低一些,可以推迟衰老。因为在稍低温度下氨基酸合成蛋白质和核酸的正常途径关闭得为在稍低温度下氨基酸合成蛋白质和核酸的正常途径关闭得比较严密,有利于产物合成。比较严密,有利于产物合成。发酵后期,产物合成能力降低,延长发酵周期没有必要,提发酵后期,产物合成能力降低,延长发酵周期没有必要,提高温度,刺激产物合成到放罐。如四环素生产时,生长阶段高温度,刺激产物合成到放罐。如四环
14、素生产时,生长阶段280C,合成期,合成期260C,后期再升温;但也有菌种产物形成比生长温度,后期再升温;但也有菌种产物形成比生长温度高。如谷氨酸产生菌生长高。如谷氨酸产生菌生长30320C,产酸,产酸34370C。最适温度选择要根据菌种与发酵而阶段选择。最适温度选择要根据菌种与发酵而阶段选择。6.1.4.2根据生长阶段选择根据生长阶段选择现在学习的是第24页,共65页6.1.4.3 6.1.4.3 根据培养条件选择根据培养条件选择温度选择还要根据培养条件综合考虑,灵活选择。温度选择还要根据培养条件综合考虑,灵活选择。通气条件差时可适当降低温度,使菌呼吸速率降低些,通气条件差时可适当降低温度,
15、使菌呼吸速率降低些,溶氧浓度也可髙些。溶氧浓度也可髙些。培养基稀薄时,温度也该低些。因为温度高营养利用快,培养基稀薄时,温度也该低些。因为温度高营养利用快,会使菌过早自溶。会使菌过早自溶。现在学习的是第25页,共65页6.1.4.4 6.1.4.4 根据菌生长情况选择根据菌生长情况选择菌生长快,维持在较高温度时间要短些;菌生长快,维持在较高温度时间要短些;菌生长慢,维持较高温度时间可长些。培养条件适宜,菌生长慢,维持较高温度时间可长些。培养条件适宜,如营养丰富,通气能满足,那么前期温度可髙些,以如营养丰富,通气能满足,那么前期温度可髙些,以利于菌的生长。利于菌的生长。总的来说,温度的选择根据菌
16、种生长阶段及培养条件综总的来说,温度的选择根据菌种生长阶段及培养条件综合考虑。要通过反复实践来定出最适温度。合考虑。要通过反复实践来定出最适温度。现在学习的是第26页,共65页6.1.5 温度的控制 发酵罐:1.夹套 2.盘管(蛇管)现在学习的是第27页,共65页6.2 6.2 发酵过程的发酵过程的pHpH控制控制 pH是微生物代谢的综合反映,又影响代谢的进行,是微生物代谢的综合反映,又影响代谢的进行,是十分重要的参数;是十分重要的参数;发酵过程中发酵过程中pH是不断变化的,通过观察是不断变化的,通过观察pH变化规律变化规律可以了解发酵过程正常与否可以了解发酵过程正常与否现在学习的是第28页,
17、共65页6.2.16.2.1发酵过程发酵过程pHpH变化的原因变化的原因 a.a.基质代谢基质代谢(1)糖代谢)糖代谢 特别是快速利用的糖,分解成小特别是快速利用的糖,分解成小分子酸、醇,使分子酸、醇,使pH下降。糖缺乏,下降。糖缺乏,pH会上升,因会上升,因此是补料的标志之一此是补料的标志之一(2)氮代谢)氮代谢 当氨基酸中的当氨基酸中的-NH2被利用后被利用后pH会下会下降;尿素被分解成降;尿素被分解成NH3,pH上升,上升,NH3利用后利用后pH下下降,当碳源不足时氮源当碳源利用降,当碳源不足时氮源当碳源利用pH上升。上升。(3)生理酸碱性物质利用后)生理酸碱性物质利用后pH会上升或下降
18、会上升或下降现在学习的是第29页,共65页b.b.产物形成产物形成 某些产物本身呈酸性或碱性,使发酵液某些产物本身呈酸性或碱性,使发酵液pH变化。如有机酸类产生使变化。如有机酸类产生使pH下降,红霉下降,红霉素、洁霉素、螺旋霉素等抗生素呈碱性,使素、洁霉素、螺旋霉素等抗生素呈碱性,使pH上升。上升。c.c.菌体自溶菌体自溶,pH上升,发酵后期,上升,发酵后期,pH上升。上升。现在学习的是第30页,共65页6.2.2 pH6.2.2 pH对发酵的影响对发酵的影响(1)pH影响酶的活性。当影响酶的活性。当pH值抑制菌体某些值抑制菌体某些酶的活性时,菌的新陈代谢受阻酶的活性时,菌的新陈代谢受阻(2)
19、pH值影响微生物细胞膜所带电荷的改变,从值影响微生物细胞膜所带电荷的改变,从而改变细胞膜的透性,影响微生物对营养物质的吸而改变细胞膜的透性,影响微生物对营养物质的吸收及代谢物的排泄,影响新陈代谢的进行收及代谢物的排泄,影响新陈代谢的进行(3)pH值影响培养基某些成分和中间代谢物的解离,值影响培养基某些成分和中间代谢物的解离,从而影响微生物对这些物质的利用从而影响微生物对这些物质的利用 现在学习的是第31页,共65页(4)pH影响代谢方向影响代谢方向 pH不同,往往引起菌体代谢过程不同,不同,往往引起菌体代谢过程不同,使代谢产物的质量和比例发生改变。使代谢产物的质量和比例发生改变。例例如:黑曲霉
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- 微生物 工程 发酵 第六 工艺 控制
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