微生物的代谢与发酵课件.ppt
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1、第1页,此课件共130页哦一一 酶酶 活细胞产生的,具有蛋白质性质的有机催化剂。活细胞产生的,具有蛋白质性质的有机催化剂。19世纪末德国生物学家毕希纳(世纪末德国生物学家毕希纳(Edward Buchner)证明酵母无细胞提取液能使糖发)证明酵母无细胞提取液能使糖发酵产生酒精,第一次提出酶,目前酵产生酒精,第一次提出酶,目前,人类已经人类已经发现并鉴定出发现并鉴定出3000多酶。多酶。酶作为一种催化剂,已被广泛地应用于各个生酶作为一种催化剂,已被广泛地应用于各个生产领域。产领域。第2页,此课件共130页哦 将饲料分解为可消化吸收的小分子物质,直将饲料分解为可消化吸收的小分子物质,直接提高饲料的
2、利用率接提高饲料的利用率 去除抗营养因子,改善消化机能,促进动物去除抗营养因子,改善消化机能,促进动物机体对营养物质的吸收机体对营养物质的吸收 扩大饲料的来源扩大饲料的来源 改善动物的内分泌,增强抗病能力,促进动改善动物的内分泌,增强抗病能力,促进动物生长物生长 第3页,此课件共130页哦 高效性高效性:极少量的酶也具有较强的催化作用极少量的酶也具有较强的催化作用.酶的催化效率比没有催化剂催化的反应高酶的催化效率比没有催化剂催化的反应高10810810201020倍,比一倍,比一般催化剂催化的反应高般催化剂催化的反应高10710710131013倍,如脲酶水解尿素的倍,如脲酶水解尿素的反应效率
3、比酸水解尿素高反应效率比酸水解尿素高7 710121012倍左右。倍左右。专一性专一性:一种酶只催化一种反应或一类反应。一种酶只催化一种反应或一类反应。反应条件温和反应条件温和:酶的催化作用一般在常温、常压、接酶的催化作用一般在常温、常压、接近中性近中性pH等较温和的条件下进行。等较温和的条件下进行。敏感性敏感性:第4页,此课件共130页哦微生物酶的分类微生物酶的分类(传统分类法传统分类法):):淀粉酶淀粉酶:淀粉酶是能够分解淀粉糖苷键的一类酶的总称淀粉酶是能够分解淀粉糖苷键的一类酶的总称.主要是黑曲霉主要是黑曲霉(左美曲霉、泡盛曲霉左美曲霉、泡盛曲霉)、根霉、根霉(雪白根酶、雪白根酶、德氏根
4、霉德氏根霉)、拟内孢霉、红曲霉。、拟内孢霉、红曲霉。蛋白酶蛋白酶:蛋白酶系催化分解蛋白质肽键的一群酶的总称,蛋白酶系催化分解蛋白质肽键的一群酶的总称,它作用于蛋白质。它作用于蛋白质。酸性蛋白酶酸性蛋白酶(最适最适pH=2pH=25)5)产生菌主要是黑曲霉、米曲霉、根霉、产生菌主要是黑曲霉、米曲霉、根霉、微小毛霉、似青霉、青霉、血红色螺孔菌等的某些种;微小毛霉、似青霉、青霉、血红色螺孔菌等的某些种;中性蛋白酶中性蛋白酶(最适最适pH=7pH=78)8)产生菌主要是枯草杆菌、巨大芽孢杆菌、产生菌主要是枯草杆菌、巨大芽孢杆菌、腊状芽孢杆菌、米曲霉、栖土曲霉、灰色链霉菌、微白色链霉菌、腊状芽孢杆菌、米
5、曲霉、栖土曲霉、灰色链霉菌、微白色链霉菌、耐热性解蛋白质杆菌等;耐热性解蛋白质杆菌等;碱性蛋白酶碱性蛋白酶(最适最适pH=9pH=911)11)主要产生菌为枯草杆菌、腊状芽孢杆菌、主要产生菌为枯草杆菌、腊状芽孢杆菌、米曲霉、栖土曲霉、灰色链霉菌、镰刀菌等。米曲霉、栖土曲霉、灰色链霉菌、镰刀菌等。第5页,此课件共130页哦纤维素酶纤维素酶:一类酶的总称,因此纤维素酶又有纤维素酶复合物之称。一类酶的总称,因此纤维素酶又有纤维素酶复合物之称。微生物主要是木菌、黑曲霉、青霉和根霉,此外,漆斑霉、反刍动微生物主要是木菌、黑曲霉、青霉和根霉,此外,漆斑霉、反刍动物瘤胃菌、嗜纤维菌、产黄纤维单孢菌、侧孢菌、
6、粘细菌、梭状芽物瘤胃菌、嗜纤维菌、产黄纤维单孢菌、侧孢菌、粘细菌、梭状芽孢杆菌等也能产生纤维素酶。孢杆菌等也能产生纤维素酶。半纤维素酶半纤维素酶:半纤维素酶是分解半纤维素半纤维素酶是分解半纤维素(包括各种降戊糖与聚己包括各种降戊糖与聚己糖糖)的一类酶的总称。曲霉、根霉、木霉发酵产生的一类酶的总称。曲霉、根霉、木霉发酵产生 果胶酶果胶酶:果胶酶是分解果胶的酶的通称,也是一个多酶复合物果胶酶是分解果胶的酶的通称,也是一个多酶复合物.主主要是霉菌,常用菌种有文氏曲霉、苹果青霉、黑曲霉、白腐核菌、要是霉菌,常用菌种有文氏曲霉、苹果青霉、黑曲霉、白腐核菌、米曲霉、酵母等,此外,木质壳霉、芽孢杆菌、梭状芽
7、孢杆菌、米曲霉、酵母等,此外,木质壳霉、芽孢杆菌、梭状芽孢杆菌、葡萄孢霉、镰刀霉也能产生果胶酶。葡萄孢霉、镰刀霉也能产生果胶酶。脂肪酶脂肪酶:脂肪酶作用于脂肪中的酯键,将脂肪分解成脂肪酸和甘油。脂肪酶作用于脂肪中的酯键,将脂肪分解成脂肪酸和甘油。主要有假丝酵母、园酵母、黑曲霉、根霉、白腐核菌、白地霉、青主要有假丝酵母、园酵母、黑曲霉、根霉、白腐核菌、白地霉、青霉、毛霉、镰刀霉及假单孢菌、无色杆菌、葡萄球菌等。霉、毛霉、镰刀霉及假单孢菌、无色杆菌、葡萄球菌等。植酸酶植酸酶:植酸酶是降解饲料中植酸及其盐的酶。微生物主要是酵母菌、植酸酶是降解饲料中植酸及其盐的酶。微生物主要是酵母菌、霉菌和细菌。霉菌
8、和细菌。第6页,此课件共130页哦酶的分类酶的分类 国际酶学委员会(国际酶学委员会(Enzyme Commission,ECEnzyme Commission,EC)将所有的酶按它)将所有的酶按它们所催化的反应的性质分为六大类。们所催化的反应的性质分为六大类。分类分类序号序号酶的类型酶的类型催化反应的性质催化反应的性质举举 例例1 1氧化还原酶类氧化还原酶类(oxidoreductase)(oxidoreductase)脱氢酶、氧化酶、过氧脱氢酶、氧化酶、过氧化物酶、加氧酶化物酶、加氧酶2 2转移酶类转移酶类(transferase)(transferase)谷丙转氨酶、已糖激酶谷丙转氨酶、已
9、糖激酶3 3水解酶类水解酶类(hydrolase)(hydrolase)酯酶、蛋白酶、淀粉酶酯酶、蛋白酶、淀粉酶AH2+BA+BH2AR+BA+BRAB+H2OAOH+BH第7页,此课件共130页哦分类分类序号序号酶的类型酶的类型催化反应的性质催化反应的性质举举 例例4 4裂解酶类裂解酶类(lyase)(lyase)醛缩酶、水合酶、脱醛缩酶、水合酶、脱氨酶、脱羧酶氨酶、脱羧酶5 5异构酶类异构酶类(isomerase)(isomerase)差向异构酶、顺反异差向异构酶、顺反异构酶、酮醛异构酶构酶、酮醛异构酶6 6合成酶类合成酶类(连接酶连接酶类类)(ligase)(ligase)羧化酶、氨酰羧
10、化酶、氨酰-tRNA-tRNA合成酶、天冬酰胺合合成酶、天冬酰胺合成酶成酶ABXYA BXYAAABABATPADPPi第8页,此课件共130页哦第9页,此课件共130页哦第二节第二节 微生物的代谢微生物的代谢微生物代谢微生物代谢:微生物细胞所进行的化学反应的总和:微生物细胞所进行的化学反应的总和。微生物的代谢微生物的代谢物质代谢物质代谢能量代谢能量代谢产能代谢产能代谢耗能代谢耗能代谢分解代谢分解代谢合成代谢合成代谢第10页,此课件共130页哦资料资料1.1.若干微生物和动物、植物组织的呼吸速率若干微生物和动物、植物组织的呼吸速率生物材料生物材料消耗消耗O O2 2ul/mgul/mg生物干重
11、生物干重/h/hazotobacterazotobacter固氮菌固氮菌20002000AcetobacterAcetobacter醋杆菌醋杆菌18001800面包酵母面包酵母110110肾和肝组织肾和肝组织10-2010-20根和叶组织根和叶组织0.5-40.5-4微生物代谢的特点微生物代谢的特点相同时间、相同干重前提下耗氧量高。相同时间、相同干重前提下耗氧量高。第11页,此课件共130页哦 大肠杆菌每小时分解的糖是自身重量的大肠杆菌每小时分解的糖是自身重量的2000倍。倍。利用乳糖的细菌在利用乳糖的细菌在1小时内可分解其自重小时内可分解其自重1000-10000倍的乳糖。倍的乳糖。产朊假丝
12、酵母合成蛋白质的能力比大豆强产朊假丝酵母合成蛋白质的能力比大豆强100倍,比食用牛强倍,比食用牛强10万倍。万倍。结论:代谢活动极其旺盛?结论:代谢活动极其旺盛?第12页,此课件共130页哦边长边长4cm边长边长2cm边长边长1cm总表面积总表面积/总体积总体积 =96/64=1.5/1总表面积总表面积/总体积总体积=192/64=3/1总表面积总表面积/总体积总体积=384/64=6/1第13页,此课件共130页哦代谢意义代谢意义代谢是生命的基本特征代谢是生命的基本特征,代谢通过代谢通过代谢途径完成代谢途径完成;代谢途径是不平衡的稳态体系、代谢途径是不平衡的稳态体系、形式多样、形式多样、有明
13、确的细胞定位、相互沟通、有能量关联;有明确的细胞定位、相互沟通、有能量关联;关键酶限制代谢途径的流量关键酶限制代谢途径的流量第14页,此课件共130页哦一一 微生物物质代谢之合成代谢微生物物质代谢之合成代谢小分子合成复杂大分子的过程(同化作用)小分子合成复杂大分子的过程(同化作用),这些物质包括蛋白质、核酸、多糖及脂类等这些物质包括蛋白质、核酸、多糖及脂类等化合物。在微生物的合成代谢中有许多过程化合物。在微生物的合成代谢中有许多过程与其他生物是基本相同的,如蛋白质和核酸与其他生物是基本相同的,如蛋白质和核酸等物质的合成,在生物化学中已作了专门介等物质的合成,在生物化学中已作了专门介绍。绍。复杂
14、分子(有机物)分解代谢合成代谢简单小分子ATPH第15页,此课件共130页哦1 1 微生物合成反应的类型微生物合成反应的类型微生物合成反应类型微生物合成反应类型 分类依据分类依据合成反应类型合成反应类型举例举例产物分子量产物分子量1.1.单体合成单体合成2.2.大分子聚合物合成大分子聚合物合成 氨基酸氨基酸,单糖单糖,单核苷酸单核苷酸蛋白质蛋白质,多糖多糖,核酸核酸产物性质产物性质1.1.初级代谢产物初级代谢产物2.2.次级代谢产物次级代谢产物 蛋白质蛋白质,多糖多糖,核酸核酸,脂类脂类抗生素抗生素,激素激素,毒素毒素,色素色素 合成反应在生物体中的分合成反应在生物体中的分布布1.1.生物共有
15、合成反应生物共有合成反应2.2.微生物特有合成反应微生物特有合成反应 初级代谢产物的合成初级代谢产物的合成肽聚糖合成,固氮,微生肽聚糖合成,固氮,微生物次级代谢反应物次级代谢反应 2.2.微生物合成代谢的原料微生物合成代谢的原料 微生物合成作用需要微生物合成作用需要小分子物质、能量和还原力小分子物质、能量和还原力NAD(P)HNAD(P)H2 2第16页,此课件共130页哦小分子物质、能量和还原力NAD(P)H2来源:直接自外界环境中吸取从分解代谢中获得。(1 1)还原力)还原力-主要指还原型烟酰胺腺嘌呤核苷酸类物质,即NADPH2或NADH2,这两种物质在转氢酶作用下可以互换。化能异养微生物
16、:化能自养型细菌:通过发酵或呼吸过程形成 氢酶催化H2形成NAD(P)H2(氢细菌等)电子逆转,在消耗ATP的前提下,电子通过在电子传递链上的逆转过程(由高电位向低电位流动)产生NAD(P)H2 第17页,此课件共130页哦(2 2)小分子前体碳架物质小分子前体碳架物质-这类物质指直接被机体用来合这类物质指直接被机体用来合成细胞物质基本组成成分的前体物成细胞物质基本组成成分的前体物(氨基酸、核苷酸及单糖等氨基酸、核苷酸及单糖等)。形成这些前体物的小分子碳架主要有12种:乙酰CoA、磷酸二羟丙酮、3-磷酸甘油醛、PEP、丙酮酸、4-磷酸赤藓糖、-酮戍二酸、琥珀酸、草酰乙酸、5-磷酸核糖、6-磷酸
17、果糖及6-磷酸葡萄糖,它们可通过单糖酵解途径及呼吸途径由单糖等物质产生 中间代谢产物中间代谢产物分解代谢起源分解代谢起源在生物合成中的作用在生物合成中的作用葡萄糖葡萄糖-1-磷酸磷酸葡萄糖葡萄糖-6-磷酸磷酸核糖核糖-5-磷酸磷酸赤藓糖赤藓糖-4-磷酸磷酸磷酸烯醇式丙酮酸磷酸烯醇式丙酮酸丙酮酸丙酮酸3-磷酸甘油酸磷酸甘油酸a-酮戊二酸酮戊二酸草酰乙酸草酰乙酸乙酰辅酶乙酰辅酶A葡萄糖葡萄糖 半乳糖半乳糖 多糖多糖EMP途径途径HMP途径途径HMP途径途径EMP途径途径EMP途径途径 ED途径途径EMP途径途径三羧酸循环三羧酸循环三羧酸循环三羧酸循环丙酮酸脱羧丙酮酸脱羧 脂肪氧化脂肪氧化核苷糖类核
18、苷糖类戊糖戊糖 多糖贮藏物多糖贮藏物核苷酸核苷酸 脱氧核糖核苷酸脱氧核糖核苷酸芳香氨基酸芳香氨基酸芳香氨基酸芳香氨基酸 葡萄糖异生葡萄糖异生 CO2固定固定胞壁酸合成胞壁酸合成 糖的运输糖的运输丙氨酸丙氨酸 缬氨酸缬氨酸 亮氨酸亮氨酸 CO2固定固定丝氨酸丝氨酸 甘氨酸甘氨酸 半胱氨酸半胱氨酸谷氨酸谷氨酸 脯氨酸脯氨酸 精氨酸精氨酸 赖氨酸赖氨酸天冬氨酸天冬氨酸 赖氨酸赖氨酸 蛋氨酸蛋氨酸 苏氨酸苏氨酸 异亮氨酸异亮氨酸脂肪酸脂肪酸 类异戊二烯类异戊二烯 甾醇甾醇第18页,此课件共130页哦(3 3)能量能量 -微生物合成代谢所需能量来自发酵、呼吸和光合磷微生物合成代谢所需能量来自发酵、呼吸和
19、光合磷酸化过程形成的酸化过程形成的ATPATP和其他高能化合物。和其他高能化合物。3.微生物独特合成代谢举例微生物独特合成代谢举例肽聚糖生物合成肽聚糖生物合成微生物特有的结构大分子:微生物特有的结构大分子:细菌:肽聚糖、磷壁酸、脂多糖、各种荚膜成分等细菌:肽聚糖、磷壁酸、脂多糖、各种荚膜成分等真菌:葡聚糖、甘露聚糖、纤维素、几丁质等真菌:葡聚糖、甘露聚糖、纤维素、几丁质等肽聚糖:绝大多数原核微生物细胞壁所含有的独特成分;在细菌的生命活肽聚糖:绝大多数原核微生物细胞壁所含有的独特成分;在细菌的生命活动中有重要功能,尤其是许多重要抗生素如青霉素、头孢霉素、万古霉素动中有重要功能,尤其是许多重要抗生
20、素如青霉素、头孢霉素、万古霉素、环丝氨酸(恶唑霉素)和杆菌肽等呈现其选择毒力(、环丝氨酸(恶唑霉素)和杆菌肽等呈现其选择毒力(selective toxicity)的物质基础。是在抗生素治疗上有特别意义的物质。的物质基础。是在抗生素治疗上有特别意义的物质。合成特点:合成机制复杂,步骤多,且合成部位几经转移;合成过程合成特点:合成机制复杂,步骤多,且合成部位几经转移;合成过程中须要有能够转运与控制肽聚糖结构元件的载体(中须要有能够转运与控制肽聚糖结构元件的载体(UDP和细菌萜醇)参与和细菌萜醇)参与。第19页,此课件共130页哦 合成过程:依发生部位分成三个阶段:合成过程:依发生部位分成三个阶段
21、:细胞质阶段:合成派克(细胞质阶段:合成派克(Park)核苷酸)核苷酸细胞膜阶段:合成肽聚糖单体细胞膜阶段:合成肽聚糖单体细胞膜外阶段:交联作用形成肽聚糖细胞膜外阶段:交联作用形成肽聚糖第20页,此课件共130页哦异养菌合成代谢分三层次进行:异养菌合成代谢分三层次进行:第一层次:降解反应。(碳的骨架、能量)第一层次:降解反应。(碳的骨架、能量)多糖多糖单糖单糖小分子碳的化合物(小分子碳的化合物(C1-C7)(酶促)(酶促)第二层次:小分子合成反应(大分子合成的前提)第二层次:小分子合成反应(大分子合成的前提)碳化合物碳化合物小分子(氨基酸、氨基已糖、核苷酸)(酶促小分子(氨基酸、氨基已糖、核苷
22、酸)(酶促)第三层次:小分子合成大分子第三层次:小分子合成大分子(蛋白质、核酸、多糖)。(蛋白质、核酸、多糖)。第21页,此课件共130页哦 细胞物质或营养物质降解形成简单产物的细胞物质或营养物质降解形成简单产物的过程,并释放能量的过程。(异化作用)过程,并释放能量的过程。(异化作用)大多数微生物都能分解糖和蛋白质,少数大多数微生物都能分解糖和蛋白质,少数微生物能分解脂类。微生物能分解脂类。第22页,此课件共130页哦 将大分子的营养物质降解成氨基酸、单糖、脂肪酸等小将大分子的营养物质降解成氨基酸、单糖、脂肪酸等小分子物质。分子物质。进一步降解成为简单的乙酰辅酶进一步降解成为简单的乙酰辅酶A、
23、丙酮酸、及能进、丙酮酸、及能进入入TCA循环的中间产物。循环的中间产物。将第二阶段的产物完全降解生成将第二阶段的产物完全降解生成CO2,并将前面形成并将前面形成的还原力(的还原力(NADH2)通过呼吸吸链氧化、)通过呼吸吸链氧化、同时形成同时形成大量的大量的ATP。微生物代谢的特点:多样性、适应性、可控性第23页,此课件共130页哦 糖类是异养微生物的主要碳素来源和能量糖类是异养微生物的主要碳素来源和能量来源,包括各种多糖、双糖和单糖。来源,包括各种多糖、双糖和单糖。多糖必须在细胞外由相应的胞外酶水解,多糖必须在细胞外由相应的胞外酶水解,才能被吸收利用;双糖和单糖被微生物吸才能被吸收利用;双糖
24、和单糖被微生物吸收后,立即进入分解途径,被降解成简单收后,立即进入分解途径,被降解成简单的含碳化合物,同时释放能量,供应细胞的含碳化合物,同时释放能量,供应细胞合成所需的碳源和能源。合成所需的碳源和能源。第24页,此课件共130页哦 细菌分解蛋白质的酶有两类,一类为细菌分解蛋白质的酶有两类,一类为蛋白酶,蛋白酶,另一类为另一类为肽酶,肽酶,前者为胞外酶,能将蛋白质分解为多肽和二肽。前者为胞外酶,能将蛋白质分解为多肽和二肽。肽类可进入微生物细胞中,肽酶为胞内酶,将进入细肽类可进入微生物细胞中,肽酶为胞内酶,将进入细胞内的肽水解为游离的氨基酸,供菌体利用。胞内的肽水解为游离的氨基酸,供菌体利用。微
25、生物对氨基酸的分解方式很多,主要为脱氨作用和脱微生物对氨基酸的分解方式很多,主要为脱氨作用和脱羧作用。不同细菌水解不同氨基酸除生成氨基酸外,还羧作用。不同细菌水解不同氨基酸除生成氨基酸外,还有其他物质产生。如大肠杆菌、枯草杆菌水解含硫氨基有其他物质产生。如大肠杆菌、枯草杆菌水解含硫氨基酸有酸有H2SH2S产生;大肠杆菌、变形杆菌水解色氨酸,可形成产生;大肠杆菌、变形杆菌水解色氨酸,可形成吲哚。有些细菌则不能,因此这些特性可用于细菌的鉴定。吲哚。有些细菌则不能,因此这些特性可用于细菌的鉴定。第25页,此课件共130页哦 脂肪是脂肪酸和甘油的结合物。某些微生脂肪是脂肪酸和甘油的结合物。某些微生物能
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