微生物考研微生物细胞结构与功能.ppt
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1、微生物考研微生物细胞结构与功能现在学习的是第1页,共118页 微生物微生物-细胞型生物细胞型生物和和非细胞生物非细胞生物。凡有细胞形态的微生物称为凡有细胞形态的微生物称为细胞型微生物细胞型微生物。按其细胞结构又可分为按其细胞结构又可分为原核微生物原核微生物和和真核微生物真核微生物。原核微生物原核微生物是指细胞核为原核即核为原始形态的核,没有是指细胞核为原核即核为原始形态的核,没有核膜、核仁,由核膜、核仁,由DNA组成,不与组蛋白结合。组成,不与组蛋白结合。原核微生物包括真细菌和古生菌两大群。原核微生物包括真细菌和古生菌两大群。现在学习的是第2页,共118页 基本构造基本构造:1.1.细胞壁;细
2、胞壁;2.2.细胞膜;细胞膜;3.3.细胞核;细胞核;4.4.核糖体;核糖体;5.5.颗粒状内含物;颗粒状内含物;特殊构造特殊构造:6.间体;间体;7.7.质粒;质粒;8.8.荚膜;荚膜;9.9.芽孢;芽孢;10.10.鞭毛与菌毛鞭毛与菌毛 第一节第一节 原核细胞的构造原核细胞的构造现在学习的是第3页,共118页细胞的结构细胞的结构特殊构造:特殊构造:部分细菌具有的或一般细菌在特殊环境下才有的构造部分细菌具有的或一般细菌在特殊环境下才有的构造一般构造:一般构造:一般细菌都有的构造一般细菌都有的构造现在学习的是第4页,共118页第一节第一节 原核微生物细胞的结构原核微生物细胞的结构1、细胞壁、细
3、胞壁(重点:结构与功能)(重点:结构与功能)2、细胞质膜、细胞质膜(重点:结构与功能)(重点:结构与功能)3、细胞质和内含物、细胞质和内含物 1)概念)概念 2)贮藏物)贮藏物 3)磁小体)磁小体 4)羧酶体)羧酶体 5)气泡)气泡 6)载色体)载色体 7)核糖体)核糖体 8)质粒)质粒4、核区(、核区(nuclear region or area)5、特殊的休眠构造、特殊的休眠构造芽孢芽孢(重点:芽孢的基本特性和耐热机制,利用伴孢晶体作为生物杀虫剂)(重点:芽孢的基本特性和耐热机制,利用伴孢晶体作为生物杀虫剂)1)概念)概念 2)细菌芽孢的特点)细菌芽孢的特点 3)芽孢的形成与芽孢的萌发过程
4、)芽孢的形成与芽孢的萌发过程4)芽孢的耐热机制)芽孢的耐热机制 5)芽孢杆菌()芽孢杆菌(Bacillus)芽孢形成的生理调控)芽孢形成的生理调控6)伴孢晶体)伴孢晶体 7)细菌的其他休眠构造)细菌的其他休眠构造6、糖被、糖被(重点:基本特点及与生产、科研的关系)(重点:基本特点及与生产、科研的关系)1)概念概念 2)特点)特点7、鞭毛、鞭毛(基本结构及推动细菌运动的特点)(基本结构及推动细菌运动的特点)1)概念)概念 2)观察和判断细菌鞭毛的方法)观察和判断细菌鞭毛的方法3)鞭毛的结构及其运动机制)鞭毛的结构及其运动机制 4)鞭毛推动细菌运动的特点)鞭毛推动细菌运动的特点8、菌毛、菌毛 9、
5、性毛、性毛现在学习的是第5页,共118页不同细菌细胞壁的化学组成和结构不同,通过革兰氏不同细菌细胞壁的化学组成和结构不同,通过革兰氏染色法可将所有的细菌分为染色法可将所有的细菌分为革兰氏阳性(革兰氏阳性(G+)和革兰氏阴性和革兰氏阴性(G-)。)。一、细胞结构一)、细胞壁1.细菌细胞壁现在学习的是第6页,共118页细菌细胞壁的功能细菌细胞壁的功能 :1、固定细胞外形;、固定细胞外形;2、为鞭毛运动提供支点;、为鞭毛运动提供支点;3、保护细胞免受外力的损伤(、保护细胞免受外力的损伤(G+菌可抵御菌可抵御1525个大个大气压的渗透压,气压的渗透压,G-菌可抵御菌可抵御510个大气压的渗透压个大气压
6、的渗透压)4 4、为正常细胞的分裂所必需;、为正常细胞的分裂所必需;5 5、阻挡有害物质进入;、阻挡有害物质进入;6 6、与细菌的抗原性、致病性和对噬菌体的敏感性有关、与细菌的抗原性、致病性和对噬菌体的敏感性有关。现在学习的是第7页,共118页1).1).革兰氏阳性的细胞壁成分革兰氏阳性的细胞壁成分肽聚糖肽聚糖 G G+磷壁酸磷壁酸 现在学习的是第8页,共118页A.肽聚糖的分子结构肽聚糖的分子结构双糖单位:双糖单位:N-乙酰葡糖胺、乙酰葡糖胺、N-乙酰胞壁酸乙酰胞壁酸四肽尾(四肽侧链):四肽尾(四肽侧链):L-Ala、D-Glu、L-Lys、D-Ala肽桥(肽间桥):甘氨酸五肽肽桥(肽间桥)
7、:甘氨酸五肽肽聚糖单体:肽聚糖单体:肽聚糖是由组成肽聚糖的单体聚合而成的大分子网状化合物。肽聚糖是由组成肽聚糖的单体聚合而成的大分子网状化合物。现在学习的是第9页,共118页磷壁酸又名垣酸,是大多数磷壁酸又名垣酸,是大多数G+菌所特有的成分,约占细胞壁菌所特有的成分,约占细胞壁成分的成分的10%。B.磷壁酸磷壁酸磷壁酸磷壁酸壁磷壁酸壁磷壁酸膜磷壁酸膜磷壁酸磷壁酸主要有两种,一是核糖醇磷壁酸,一是甘油磷壁酸磷壁酸主要有两种,一是核糖醇磷壁酸,一是甘油磷壁酸,前者前者存在金黄色葡萄球菌和芽孢杆菌中,后者存在干酪乳杆菌中存在金黄色葡萄球菌和芽孢杆菌中,后者存在干酪乳杆菌中。现在学习的是第10页,共1
8、18页磷壁酸的主要功能:磷壁酸的主要功能:1 1、带负电荷,可与环境中、带负电荷,可与环境中Mg2等阳离子结合,提高等阳离子结合,提高这些离子的浓度,以保证细胞膜上一些合成酶维这些离子的浓度,以保证细胞膜上一些合成酶维持高活性的需要;持高活性的需要;3 3、赋予革兰氏阳性菌特异的表面抗原;、赋予革兰氏阳性菌特异的表面抗原;4 4、提供某些噬菌体特异的吸附受体。提供某些噬菌体特异的吸附受体。2 2、保证革兰氏阳性致病菌(如、保证革兰氏阳性致病菌(如A A族链球菌)与其宿族链球菌)与其宿主间的粘连(主要为膜磷壁酸);主间的粘连(主要为膜磷壁酸);5 5、调节细胞自溶素活力调节细胞自溶素活力,防止细
9、胞因自溶而死亡。防止细胞因自溶而死亡。现在学习的是第11页,共118页2).2).革兰氏阴性的细胞壁成分革兰氏阴性的细胞壁成分 G-细胞壁的组成和结构比细胞壁的组成和结构比G+更复杂。分为内壁层和外更复杂。分为内壁层和外壁层两部分。壁层两部分。肽聚糖肽聚糖 脂多糖脂多糖 脂蛋白脂蛋白 类脂类脂 蛋白质蛋白质 孔蛋白孔蛋白外壁蛋白外壁蛋白 外壁层外壁层 G-内壁层内壁层外壁层是外壁层是G细菌细胞壁所特有的结构,它位于壁的最外层细菌细胞壁所特有的结构,它位于壁的最外层,化学成分为脂多糖、磷脂和若干种外蛋白。,化学成分为脂多糖、磷脂和若干种外蛋白。现在学习的是第12页,共118页G G+菌与菌与G
10、G-菌肽聚糖单体的异同:菌肽聚糖单体的异同:其区别为其区别为:1 1、四肽上的第三个氨基酸不同、四肽上的第三个氨基酸不同,G,G+菌为赖氨酸;菌为赖氨酸;G G-菌为内消旋菌为内消旋二氨基庚二酸(二氨基庚二酸(DAP)DAP)。2 2、肽间桥不同:、肽间桥不同:G G+菌为甘氨酸五肽;菌为甘氨酸五肽;G G-菌为肽键。菌为肽键。现在学习的是第13页,共118页脂多糖(脂多糖(LPS)LPS)分子结构由三部分组成:分子结构由三部分组成:类脂类脂A:2个个N乙酰葡糖胺及乙酰葡糖胺及5个长链脂肪酸个长链脂肪酸 3个个2酮酮3脱氧辛糖酸(脱氧辛糖酸(KDO)内核心区内核心区 核心多糖区核心多糖区 3个
11、个 L甘油甘油D甘露(甘露(Hep)外核心区外核心区:5个己糖(个己糖(Hex),包括葡糖胺、半乳糖、包括葡糖胺、半乳糖、葡萄糖葡萄糖 O侧链侧链:多个多个4Hex单位单位,内含半乳糖、鼠李糖、甘露糖、阿比可糖内含半乳糖、鼠李糖、甘露糖、阿比可糖(Abq)LPS 类脂类脂A A是是G G-细菌的毒性中心细菌的毒性中心现在学习的是第14页,共118页1 1、是革兰氏阴性细菌致病物质、是革兰氏阴性细菌致病物质内毒素的物质基础;内毒素的物质基础;2 2、与磷壁酸相似,也有吸附、与磷壁酸相似,也有吸附MgMg2+2+和和CaCa2+2+等阳离子以提高这些离子在等阳离子以提高这些离子在细胞表面浓度的作用
12、;细胞表面浓度的作用;3 3、由于、由于LPS结构的变化,决定了革兰氏阴性细菌细胞表面抗原决定簇的结构的变化,决定了革兰氏阴性细菌细胞表面抗原决定簇的多样性;多样性;4 4、是许多噬菌体在细胞表面的吸附受体。、是许多噬菌体在细胞表面的吸附受体。5、具有控制某些物质进出细胞的部分选择性屏障功能、具有控制某些物质进出细胞的部分选择性屏障功能脂多糖的功能脂多糖的功能脂多糖要维持其结构的稳定性需要足量脂多糖要维持其结构的稳定性需要足量Ca2+的存在。如果用螯合剂去的存在。如果用螯合剂去除除Ca2+,LPS就解体。这时,就解体。这时,G-细菌的内壁层肽聚糖就暴露出来,因细菌的内壁层肽聚糖就暴露出来,因而
13、就可被溶菌酶所水解。而就可被溶菌酶所水解。现在学习的是第15页,共118页 脂多糖脂多糖LPS含有三种特殊的糖含有三种特殊的糖 Hep(L-甘油甘油-D-甘露庚糖甘露庚糖)KDO(2酮3脱氧辛糖酸)Abq(阿比可糖阿比可糖)LPS组成组成O侧链的糖类不同决定了不同细菌侧链的糖类不同决定了不同细菌的抗原特异性,可用血清学方法加以鉴定的抗原特异性,可用血清学方法加以鉴定。在非致病的。在非致病的G-细菌中脂多糖没有细菌中脂多糖没有O侧链侧链。脂多糖脂多糖LPS的毒性部分在的毒性部分在类脂类脂A。现在学习的是第16页,共118页注意几点:注意几点:不同细菌肽聚糖亚单位中短肽中的二氨基酸不一样。不同细菌
14、肽聚糖亚单位中短肽中的二氨基酸不一样。不同细菌肽聚糖亚单位之间的交联方式不一样不同细菌肽聚糖亚单位之间的交联方式不一样不同的细菌,肽聚糖中双糖亚单位的数量不一,例金黄色葡萄球菌只有不同的细菌,肽聚糖中双糖亚单位的数量不一,例金黄色葡萄球菌只有9个双糖亚单位,而地衣芽孢杆菌多达个双糖亚单位,而地衣芽孢杆菌多达79个二糖单位。个二糖单位。不同种类的细菌肽聚糖的含量不一。不同种类的细菌肽聚糖的含量不一。G+菌多,菌多,G-菌少,交链度也不一样,菌少,交链度也不一样,G+高,高,G-低。低。肽聚糖能被溶菌酶水解,水解部位在肽聚糖能被溶菌酶水解,水解部位在-1.4糖苷键。糖苷键。G+菌对青霉素敏感,因青
15、霉素可阻止肽聚糖亚单位之间交联肽链的形成菌对青霉素敏感,因青霉素可阻止肽聚糖亚单位之间交联肽链的形成。肽聚糖存在于除古细菌以外的所有有壁原核生物的细胞壁中。肽聚糖存在于除古细菌以外的所有有壁原核生物的细胞壁中。现在学习的是第17页,共118页 简单染色法简单染色法 正染色正染色 革兰氏染色法革兰氏染色法 鉴别染色法鉴别染色法 抗酸性染色法抗酸性染色法 芽孢染色法芽孢染色法 死菌死菌 姬姆萨染色法姬姆萨染色法 负染色负染色:荚膜染色法等荚膜染色法等细菌染色法细菌染色法 活菌:用美蓝或活菌:用美蓝或TTCTTC(氧化三苯基四氮唑)氧化三苯基四氮唑)等作活菌染色等作活菌染色 3).革兰氏染色革兰氏染
16、色现在学习的是第18页,共118页用碱性染料结晶紫对菌液涂片进行初染。用碱性染料结晶紫对菌液涂片进行初染。2.用碘液进行媒染,其作用是提高染料和细胞间的相互作用碘液进行媒染,其作用是提高染料和细胞间的相互作用从而使二者结合得更牢固。用从而使二者结合得更牢固。3.用乙醇冲洗脱色。在经历脱色后仍将结晶紫保留在细胞内用乙醇冲洗脱色。在经历脱色后仍将结晶紫保留在细胞内的为革兰氏阳性细菌,而革兰氏阴性细菌的结晶紫被洗掉的为革兰氏阳性细菌,而革兰氏阴性细菌的结晶紫被洗掉,细胞呈无色。,细胞呈无色。4.用一种与结晶紫具有不同颜色的碱性染料对涂片进行复染用一种与结晶紫具有不同颜色的碱性染料对涂片进行复染。例如
17、番红,使原来无色的革兰氏阴性细菌最后呈现红色。例如番红,使原来无色的革兰氏阴性细菌最后呈现红色,而革兰氏阳性细菌继续保持深紫色。,而革兰氏阳性细菌继续保持深紫色。革兰氏染色革兰氏染色C.Gram(革兰)于革兰)于1884年发明的一种鉴年发明的一种鉴别不同类型细菌的染色方法。别不同类型细菌的染色方法。现在学习的是第19页,共118页革兰氏染色的原理:革兰氏染色的原理:G+菌的细胞壁肽聚糖含量高、网格结构紧密,含脂量低,菌的细胞壁肽聚糖含量高、网格结构紧密,含脂量低,用酒精脱色时,肽聚糖层收缩,网格孔径缩小,阻止了结晶用酒精脱色时,肽聚糖层收缩,网格孔径缩小,阻止了结晶紫碘的复合物逸出,当复染时染
18、不上蕃红的红色,菌体仍紫碘的复合物逸出,当复染时染不上蕃红的红色,菌体仍为结晶紫的紫色,此为为结晶紫的紫色,此为G+反应。反应。G-菌的细胞壁肽聚糖层薄,含脂量高,用酒精脱色时由于细菌的细胞壁肽聚糖层薄,含脂量高,用酒精脱色时由于细胞壁中的脂类物质溶于酒精,使细胞通透性增加,使得初染胞壁中的脂类物质溶于酒精,使细胞通透性增加,使得初染时进入细胞中的结晶紫碘的复合物逸出,当再用蕃红复染时进入细胞中的结晶紫碘的复合物逸出,当再用蕃红复染时菌体就染上蕃红的红色,此为时菌体就染上蕃红的红色,此为G-反应。反应。现在学习的是第20页,共118页4).G4).G细菌与细菌与G G-细菌细胞壁的化学组成细菌
19、细胞壁的化学组成 肽聚糖肽聚糖 G G+磷壁酸磷壁酸 多糖多糖 壁磷壁酸壁磷壁酸膜磷壁酸膜磷壁酸 肽聚糖肽聚糖-内壁层内壁层 脂多糖脂多糖G-脂蛋白脂蛋白 类脂类脂 蛋白质蛋白质 孔蛋白孔蛋白外壁蛋白外壁蛋白 外壁层外壁层 G-细菌的细胞壁比细菌的细胞壁比G+菌要复杂得多,结构层次明显,菌要复杂得多,结构层次明显,分为内壁层和外壁层两层。分为内壁层和外壁层两层。现在学习的是第21页,共118页肽聚糖的单体构成了大分子网状化合物肽聚糖的单体构成了大分子网状化合物:G G+菌的肽聚糖的分子结构交联度高,肽聚糖层厚菌的肽聚糖的分子结构交联度高,肽聚糖层厚,如枯草杆菌网如枯草杆菌网状分子有状分子有40
20、40层。而层。而G G-菌的交联度低菌的交联度低,肽聚糖层薄,如大肠杆菌仅肽聚糖层薄,如大肠杆菌仅由由1 12 2层分子组成。层分子组成。现在学习的是第22页,共118页G+菌与菌与G-菌细胞壁的比较菌细胞壁的比较特性特性G+细菌细菌G-细菌细菌 结构结构一层,厚度为一层,厚度为20-80nm肽聚糖网格结构紧密肽聚糖网格结构紧密二层,内层二层,内层2-3nm,外层,外层8nm,肽聚糖位于内层,网肽聚糖位于内层,网格状结构疏松。格状结构疏松。化化学学组组成成肽聚糖肽聚糖磷壁酸磷壁酸多多 糖糖脂蛋白脂蛋白脂多糖脂多糖蛋白质蛋白质脂脂 类类对青霉素对青霉素对溶菌酶对溶菌酶层数多,交联度高,层数多,交
21、联度高,占壁干重的占壁干重的40-90%+或或-+-+或或-敏感敏感敏感敏感层数少,交联度低,只占层数少,交联度低,只占5-10%-+不敏感不敏感 不敏感不敏感现在学习的是第23页,共118页2.古生菌的细胞壁古生菌的细胞壁 除热原菌属没有细胞壁以外,其余都具有与真细除热原菌属没有细胞壁以外,其余都具有与真细菌功能相似的细胞壁菌功能相似的细胞壁 古生菌的细胞壁没有真正的肽聚糖,而含假肽聚糖古生菌的细胞壁没有真正的肽聚糖,而含假肽聚糖。假肽聚糖与真肽聚糖相比没有胞壁酸、没有。假肽聚糖与真肽聚糖相比没有胞壁酸、没有D型氨型氨基酸、没有基酸、没有DAP,而由,而由N-乙酰塔罗糖胺糖醛酸代替乙酰塔罗糖
22、胺糖醛酸代替胞壁酸。胞壁酸。有些古细菌的细胞壁由杂多糖组成有些古细菌的细胞壁由杂多糖组成,还有些古细菌还有些古细菌的细胞壁由蛋白质或糖蛋白组成。的细胞壁由蛋白质或糖蛋白组成。现在学习的是第24页,共118页古细菌细胞壁与真细菌细胞壁的区别古细菌细胞壁与真细菌细胞壁的区别:古细菌细胞壁不含有肽聚糖,而真细菌有古细菌细胞壁不含有肽聚糖,而真细菌有 古细菌假肽聚糖中多糖由古细菌假肽聚糖中多糖由-1,3糖苷键连接而糖苷键连接而成,真细菌肽聚糖中多糖由成,真细菌肽聚糖中多糖由-1,4糖苷键连接糖苷键连接而成而成 古细菌中没有古细菌中没有N-乙酰胞壁酸和乙酰胞壁酸和D型氨基酸型氨基酸现在学习的是第25页,
23、共118页古生菌假肽聚糖的单体结构古生菌假肽聚糖的单体结构-1,3糖苷键不被溶菌酶水糖苷键不被溶菌酶水解解N-乙酰葡糖胺和乙酰葡糖胺和N-乙酰塔罗糖胺糖醛酸交替乙酰塔罗糖胺糖醛酸交替连接而成,连在后一氨基糖上的肽尾由连接而成,连在后一氨基糖上的肽尾由L-glu、L-ala和和L-lys三个三个L型氨基酸组成,肽型氨基酸组成,肽桥则由桥则由L-glu一个氨基酸组成。一个氨基酸组成。现在学习的是第26页,共118页3.细胞壁缺陷细菌细胞壁缺陷细菌缺壁突变缺壁突变L型细菌型细菌实验室或宿实验室或宿主体内形成主体内形成基本去尽基本去尽原生质体原生质体(G+)人工去壁人工去壁部分去除部分去除原生质球原生
24、质球(G-)在自然界长期进化中形成在自然界长期进化中形成支原体支原体现在学习的是第27页,共118页 a.L型细菌(型细菌(L-form of bacteria)细菌在某些环境条件下(实验室或宿主体内)通过自发突变而形成细菌在某些环境条件下(实验室或宿主体内)通过自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺陷变异型。的遗传性稳定的细胞壁缺陷变异型。因英国李斯特(因英国李斯特(Lister)预防研究所首先发现而得名)预防研究所首先发现而得名(1935年,念珠状链杆菌年,念珠状链杆菌Streptobacillus moniliformis)特点:特点:没有完整而坚韧的细胞壁,细胞呈多形态;没有完整而坚韧的
25、细胞壁,细胞呈多形态;有些能通过细菌滤器,故又称有些能通过细菌滤器,故又称“滤过型细菌滤过型细菌”;对渗透敏感,在固体培养基上形成对渗透敏感,在固体培养基上形成“油煎蛋油煎蛋”似的小菌落(直径在似的小菌落(直径在0.1mm左右)左右)大肠杆菌、变形杆菌、葡萄球菌、链球菌、分枝杆菌和霍乱弧菌等大肠杆菌、变形杆菌、葡萄球菌、链球菌、分枝杆菌和霍乱弧菌等20多多种细菌中均有发现,被认为可能与针对细胞壁的抗菌治疗有关。种细菌中均有发现,被认为可能与针对细胞壁的抗菌治疗有关。现在学习的是第28页,共118页b.原生质体(原生质体(protoplast)在人为条件下,用溶菌酶处理或在含青霉素的培养基中培养
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