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1、微生物学微生物培养基的配制灭菌现在学习的是第1页,共22页课堂纪律课堂纪律严格遵守实验室规章制度严格遵守实验室规章制度严肃课堂纪律严肃课堂纪律 不允许无故旷课、早退不允许无故旷课、早退 迟到迟到 工作服工作服现在学习的是第2页,共22页进入微生物实验室的注意事项进入微生物实验室的注意事项1.1.进入实验室必须穿白大褂进入实验室必须穿白大褂2.2.实验室内不准吃东西实验室内不准吃东西3.3.在实验室内不要趴在桌子上在实验室内不要趴在桌子上4.4.实验完成后值日生留下做好清洁工作实验完成后值日生留下做好清洁工作(值日工作实行组值日工作实行组长负责制,纳入实验成绩)长负责制,纳入实验成绩)5.5.离
2、开实验室前洗手离开实验室前洗手6.6.实验现象要隔天观察的实验,必须要按时到实验室记录实验现实验现象要隔天观察的实验,必须要按时到实验室记录实验现象象现在学习的是第3页,共22页实验安排实验一 微生物培养基的配制和灭菌实验二 微生物的纯培养技术实验三 显微镜油镜的使用及细胞形态的观察实验四 环境因素对微生物的影响实验五 放线菌、霉菌及酵母菌的形态观察实验六 水的细菌学检查,土壤微生物的分离实验七 微生物生理生化反应观察试验八 微生物遗传实验 试验九 药物的体外抗菌实验及口服药物的细菌检查实验十 操作考试现在学习的是第4页,共22页实验报告要求实验报告要求一个实验,一份实验报告,有连续性的实验等
3、到做完后再写实验一个实验,一份实验报告,有连续性的实验等到做完后再写实验报告。报告。实验报告内容:实验报告内容:1.1.实验项目名称实验项目名称 2.2.实验目的实验目的 3.3.实验原理实验原理 4.4.实验步骤实验步骤 5.5.实验结果与分析(即使实验失败也要写好分析)实验结果与分析(即使实验失败也要写好分析)6.6.思考题思考题现在学习的是第5页,共22页实实 验验微生物培养基的配制和微生物培养基的配制和灭菌及纯培养灭菌及纯培养现在学习的是第6页,共22页一、微生物培养基的配制和灭菌一、微生物培养基的配制和灭菌目的要求目的要求实验材料实验材料实验程序实验程序现在学习的是第7页,共22页1
4、、目、目 的的了解培养基的配制原理和方法,掌握其了解培养基的配制原理和方法,掌握其配制过程。配制过程。了解几种灭菌方法,掌握干热灭菌法和了解几种灭菌方法,掌握干热灭菌法和加压蒸汽灭菌法的原理及其使用方法。加压蒸汽灭菌法的原理及其使用方法。现在学习的是第8页,共22页2、材、材 料料 和和 器器 皿皿主要药品主要药品:牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂:牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂、营养琼脂等、营养琼脂等。仪器仪器:高压蒸汽灭菌器、恒温干热灭菌箱、:高压蒸汽灭菌器、恒温干热灭菌箱、紫外线杀菌灯。紫外线杀菌灯。其它其它:天平、药匙、电炉、:天平、药匙、电炉、1mol/L HCl、1mol/L NaOH、
5、pH试纸、三角烧瓶、量筒试纸、三角烧瓶、量筒、玻棒、试管、培养皿、吸管、牛皮纸、纱、玻棒、试管、培养皿、吸管、牛皮纸、纱绳、硅胶塞、标签等。绳、硅胶塞、标签等。现在学习的是第9页,共22页3、方法和步骤、方法和步骤培养基的配制培养基的配制培养基和玻璃器材的灭菌方法培养基和玻璃器材的灭菌方法现在学习的是第10页,共22页培养基的概念及种类培养基的概念及种类培养基的配方、配制步骤培养基的配方、配制步骤(1)培养基的配制)培养基的配制现在学习的是第11页,共22页培养基培养基 是指由人工配制的、适合微生物生长是指由人工配制的、适合微生物生长繁殖或产生代谢产物用的混合营养料。繁殖或产生代谢产物用的混合
6、营养料。培养基的介绍培养基的介绍碳源、氮源、无机盐、能源、生长因子、水碳源、氮源、无机盐、能源、生长因子、水营养物质的浓度要适宜营养物质的浓度要适宜营养物质之间的配比要适宜营养物质之间的配比要适宜培养基的培养基的pH值、渗透压、水活值、渗透压、水活度和氧化还原电势等物理化学度和氧化还原电势等物理化学条件要适宜。条件要适宜。现在学习的是第12页,共22页细菌:细菌:pH 7.08.0放线菌:放线菌:pH 7.58.5酵母菌:酵母菌:pH 3.86.0霉菌:霉菌:pH 4.05.8藻类:藻类:pH 6.07.0原生动物:原生动物:pH 6.08.0初始初始pHpH通常培养条件:通常培养条件:现在学
7、习的是第13页,共22页培养基的种类培养基的种类按照培养基的物理状态可分为按照培养基的物理状态可分为 1.1.液体培养基:不加凝固剂的液体状态培养基。液体培养基:不加凝固剂的液体状态培养基。2.2.固体培养基:在液体培养基中加入固体培养基:在液体培养基中加入2%2%左右的凝固剂的固体状态左右的凝固剂的固体状态的培养基。的培养基。3.3.半固体培养基:在液体培养基中加入半固体培养基:在液体培养基中加入0.20.20.5%0.5%凝固剂而成的凝固剂而成的半固体状培养基。半固体状培养基。现在学习的是第14页,共22页 琼脂是最优良的凝固剂,自琼脂是最优良的凝固剂,自18801880年代开始用于配制微
8、生物年代开始用于配制微生物培养基以来,至今经久不衰。培养基以来,至今经久不衰。现在学习的是第15页,共22页实验室的常用培养基:实验室的常用培养基:细菌:细菌:牛肉膏蛋白胨培养基;牛肉膏蛋白胨培养基;放线菌:高氏放线菌:高氏1 1号合成培养基培养;号合成培养基培养;酵母菌:麦芽汁培养基;酵母菌:麦芽汁培养基;霉菌:霉菌:查氏合成培养基;查氏合成培养基;现在学习的是第16页,共22页培养基的配制培养基的配制配方、配料配方、配料加热溶解加热溶解调调pH(pH(略略)过滤(略)过滤(略)分装分装(倒平板不分装)倒平板不分装)灭菌灭菌包扎包扎(试管放在烧杯试管放在烧杯)摆斜面、倒平板摆斜面、倒平板贮存
9、贮存现在学习的是第17页,共22页牛肉膏蛋白胨培养基的配制牛肉膏蛋白胨培养基的配制1、液体培养基、液体培养基2、固体培养基、固体培养基3、半固体培养基、半固体培养基现在学习的是第18页,共22页牛肉膏蛋白胨牛肉膏蛋白胨固体固体培养基配方培养基配方(P.64):牛肉膏牛肉膏 0.3g 蛋蛋白胨白胨 1g 氯化钠氯化钠 0.5g 琼脂琼脂 1.5g 水水 100mL pH 7.27.4 灭菌灭菌 121,20min牛肉膏蛋白胨牛肉膏蛋白胨半固体半固体培养基配方:培养基配方:琼脂琼脂 0.3g牛肉膏蛋白胨牛肉膏蛋白胨液体液体培养基配方:培养基配方:琼脂琼脂 0g现在学习的是第19页,共22页牛肉膏蛋白胨牛肉膏蛋白胨营养琼脂:营养琼脂:按照配方生产的牛肉膏蛋白胨培养基,属于固体培养基。按照配方生产的牛肉膏蛋白胨培养基,属于固体培养基。今天固体培养基用营养琼脂。今天固体培养基用营养琼脂。液体培养基和半固体培养基按照上述配方称量。液体培养基和半固体培养基按照上述配方称量。现在学习的是第20页,共22页现在学习的是第21页,共22页配制步骤:配制步骤:P.64现在学习的是第22页,共22页
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