机能学实验离体蛙心灌流.ppt

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1、机能学实验离体蛙心灌流机能学实验离体蛙心灌流现在学习的是第1页，共23页一、实验目的一、实验目的1.本实验的目的是学习离体蛙心的灌流方法。本实验的目的是学习离体蛙心的灌流方法。2.观察各种理化因素对对离体心脏活动的影响。观察各种理化因素对对离体心脏活动的影响。现在学习的是第2页，共23页 正常的蛙心能按静脉窦的节律性自动产生正常的蛙心能按静脉窦的节律性自动产生兴奋，心脏的自动节律性活动，需要有一个合兴奋，心脏的自动节律性活动，需要有一个合适的理化环境。适的理化环境。蟾蜍心脏离体后，用任氏液灌流，在一定蟾蜍心脏离体后，用任氏液灌流，在一定时间内仍能保持节律性兴奋和收缩活动。由于时间内仍能保持节律

2、性兴奋和收缩活动。由于心脏的正常活动还有赖于内环境因素的相对稳心脏的正常活动还有赖于内环境因素的相对稳定，改变灌流液的成分可引起心脏活动的改变定，改变灌流液的成分可引起心脏活动的改变。二、实验原理二、实验原理现在学习的是第3页，共23页 心肌细胞的生理特性表现为：自动节律心肌细胞的生理特性表现为：自动节律性、兴奋性、传导性和收缩性。性、兴奋性、传导性和收缩性。心肌细胞外离子浓度的变化和因体内生心肌细胞外离子浓度的变化和因体内生物活性物质（如激素）引起的细胞膜离子通物活性物质（如激素）引起的细胞膜离子通透性的改变，对心肌细胞的生物电活动和生透性的改变，对心肌细胞的生物电活动和生理特性必然会产生明

3、显的影响。理特性必然会产生明显的影响。现在学习的是第4页，共23页三、实验对象三、实验对象 蟾蜍蟾蜍现在学习的是第5页，共23页四、实验步骤四、实验步骤一、离体蟾蜍心脏标本制备一、离体蟾蜍心脏标本制备 1.1.破坏脑和脊髓破坏脑和脊髓 2.2.仰卧位固定蟾蜍，暴露心脏仰卧位固定蟾蜍，暴露心脏现在学习的是第6页，共23页现在学习的是第7页，共23页（腹面）（腹面）（背面）（背面）3.蛙心插管蛙心插管现在学习的是第8页，共23页现在学习的是第9页，共23页AB蛙心插管在心室蛙心插管在心室收缩时插入心室收缩时插入心室现在学习的是第10页，共23页4.连接仪器记录蛙心搏动曲线连接仪器记录蛙心搏动曲线现

4、在学习的是第11页，共23页五、观察项目五、观察项目 （一）描记正常心搏曲线（一）描记正常心搏曲线 曲线幅度曲线幅度 收缩的程度收缩的程度曲线疏密曲线疏密 心率心率曲线基线曲线基线 舒张的程度舒张的程度现在学习的是第12页，共23页1.换成无钙任氏液灌注，换成无钙任氏液灌注，冲洗（下同）冲洗（下同）2.加入加入3%氯化钙溶液氯化钙溶液12滴滴3.加入加入1%氯化钾溶液氯化钾溶液12滴滴4.加入加入1:10000 肾上腺素溶液肾上腺素溶液12滴滴5.加入加入1:10000 乙酰胆碱溶液乙酰胆碱溶液12滴滴6.加入加入2.5%碳酸氢钠溶液碳酸氢钠溶液12滴滴7.加入加入3%乳酸溶液乳酸溶液12滴滴

5、（二）观察离子、药物和酸碱的影响（二）观察离子、药物和酸碱的影响现在学习的是第13页，共23页五、注意事项五、注意事项1.1.蛙心插管内液面勿过高或过低，每次换液时，蛙心插管内液面勿过高或过低，每次换液时，必须用任氏液冲洗必须用任氏液冲洗3 3次。次。2.2.每次加药，心搏曲线出现变化后立即将插管内液每次加药，心搏曲线出现变化后立即将插管内液体吸出。体吸出。3.3.随时滴加任氏液于心脏表面使之保持湿润。随时滴加任氏液于心脏表面使之保持湿润。4.4.换能器头端应向下倾斜以免液体进入换能器。换能器头端应向下倾斜以免液体进入换能器。现在学习的是第14页，共23页六、实验结果六、实验结果现在学习的是第

6、15页，共23页心率心率收缩幅度（收缩力）收缩幅度（收缩力）无钙任氏液无钙任氏液3%CaCl2 1%KClAdrAch2.5%NaHCO33%乳酸乳酸 （“钙僵钙僵”）(甚至停于舒张期甚至停于舒张期)现在学习的是第16页，共23页七、结果分析与讨论七、结果分析与讨论现在学习的是第17页，共23页1.1.无钙任氏液无钙任氏液无钙任氏液无钙任氏液灌流灌流 细胞外液细胞外液Ca2+心肌细胞动作电位期间心肌细胞动作电位期间 Ca2+内流内流 心肌细胞胞浆心肌细胞胞浆Ca2+心肌收缩力收缩心肌收缩力收缩 现在学习的是第18页，共23页细胞外液细胞外液Ca2浓度升高浓度升高工作细胞动作电位期间工作细胞动作

7、电位期间Ca2内流增加内流增加肌浆肌浆Ca2浓度增加浓度增加兴奋收缩耦联增强兴奋收缩耦联增强心肌收缩力增强心肌收缩力增强2.3%CaCl2慢反应细胞慢反应细胞4期自动除期自动除极化速度增加极化速度增加自律性增加自律性增加心率增快心率增快现在学习的是第19页，共23页细胞外液细胞外液K浓度升高浓度升高K抑制抑制Ca2内流内流收缩力收缩力Ca2内流内流 兴奋收缩兴奋收缩耦联削弱耦联削弱3.1%KClIK1通道通透性通道通透性，K易于外易于外流，对抗了流，对抗了If内流去极内流去极自律性自律性现在学习的是第20页，共23页如果如果任氏液中钾离子浓度明显增高，蛙心任氏液中钾离子浓度明显增高，蛙心会处于

8、什么状态？会处于什么状态？当细胞外显著高钾时，细胞膜内外钾浓度梯度减小，当细胞外显著高钾时，细胞膜内外钾浓度梯度减小，使得静息电位绝对值减小至使得静息电位绝对值减小至55mv，使得钠通道失活，使得钠通道失活，从而使心肌细胞兴奋性丧失，心脏可停搏在舒张状态，从而使心肌细胞兴奋性丧失，心脏可停搏在舒张状态（当细胞外轻度高钾时，当细胞外轻度高钾时，膜内外膜内外K浓度梯度浓度梯度，静息电，静息电位位，RP与与TP的差的差，兴奋性，兴奋性）现在学习的是第21页，共23页心肌细胞膜心肌细胞膜1受体结合受体结合Adr肌浆网对肌浆网对Ca2通通透性透性 动作电位期间动作电位期间Ca2内流性内流性 收缩力收缩力

9、 细胞膜对细胞膜对Ca2通透性通透性 4期自动除极期自动除极化速度化速度自律性自律性 心率心率 4.4.肾上腺素（肾上腺素（Adr）Ca2与肌钙蛋白亲与肌钙蛋白亲和力和力，肌浆网摄，肌浆网摄钙速度钙速度 舒张速度舒张速度 复极期肌浆复极期肌浆Ca2浓浓度降低速度度降低速度 现在学习的是第22页，共23页心肌细胞膜心肌细胞膜M受体结合受体结合细胞膜对细胞膜对K通透性增加通透性增加自律性降低自律性降低心率减慢心率减慢细胞膜对细胞膜对Ca2通通透性下降透性下降动作电位期间动作电位期间Ca2内流减少内流减少心肌收缩力降低心肌收缩力降低窦房结细胞窦房结细胞4期期K+外外流增加流增加、最大复极电、最大复极电位增大位增大ACh抑制钙通道抑制钙通道5.乙酰胆碱乙酰胆碱（Ach）现在学习的是第23页，共23页