酶和蛋白质工程的应用.ppt
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1、关于酶和蛋白质工程的应用1现在学习的是第1页,共92页2一、在疾病诊断方面的应用一、在疾病诊断方面的应用l(一)根据体内酶活力的变化诊断疾病(一)根据体内酶活力的变化诊断疾病l(二)用(二)用酶测定酶测定体液中某些物质的变化诊断疾病体液中某些物质的变化诊断疾病现在学习的是第2页,共92页3(一)根据体内酶活力的变化诊断疾病(一)根据体内酶活力的变化诊断疾病l1、酸性磷酸酶、酸性磷酸酶l2、碱性磷酸酶、碱性磷酸酶l3、转氨酶、转氨酶l4、乳酸脱氢酶、乳酸脱氢酶l5、乳酸脱氢酶同工酶、乳酸脱氢酶同工酶l6、葡萄糖磷酸异构酶、葡萄糖磷酸异构酶l7、胆碱酯酶、胆碱酯酶l8、端粒酶、端粒酶现在学习的是第
2、3页,共92页41、酸性磷酸酶、酸性磷酸酶l酸性磷酸酶(酸性磷酸酶(acid phosphatase,EC3.1.3.2)l酸性条件下催化磷酸单酯水解生成无机磷酸的水解酸性条件下催化磷酸单酯水解生成无机磷酸的水解酶,酶,pH5-6 37Cl测定:定磷法、测酚法、硝基酚磷酸法测定:定磷法、测酚法、硝基酚磷酸法l来源骨、肝、肾、脾、胰等组织来源骨、肝、肾、脾、胰等组织l前列腺癌、肝炎、甲亢、红细胞病变前列腺癌、肝炎、甲亢、红细胞病变 活力提高活力提高现在学习的是第4页,共92页52、碱性磷酸酶、碱性磷酸酶l碱性磷酸酶(碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,EC3.1.3.1)l碱性
3、条件下催化磷酸单酯水解生成无机磷酸的水解酶,碱性条件下催化磷酸单酯水解生成无机磷酸的水解酶,pH9.5-10 37Cl测定:定磷法、测酚法、硝基酚磷酸法测定:定磷法、测酚法、硝基酚磷酸法l主要由造骨细胞产生主要由造骨细胞产生l佝偻病、骨骼软化症、骨瘤、甲亢、黄疸性肝炎佝偻病、骨骼软化症、骨瘤、甲亢、黄疸性肝炎 活力提活力提高高现在学习的是第5页,共92页63、转氨酶、转氨酶l氨基转移酶(氨基转移酶(aminotransferase,EC2.6.1)l谷丙转氨酶(谷丙转氨酶(GPT)丙氨酸转氨酶()丙氨酸转氨酶(alanine aminotranferase,EC2.6.1.2)催化丙氨酸与)催
4、化丙氨酸与-酮戊二酸反应生成谷氨酸和丙酮酸酮戊二酸反应生成谷氨酸和丙酮酸l谷草转氨酶(谷草转氨酶(GOT)天冬氨酸转氨酶()天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,EC2.6.1.1)催化天冬氨酸与)催化天冬氨酸与-酮戊二酸反应酮戊二酸反应生成谷氨酸和草酰乙酸生成谷氨酸和草酰乙酸lpH7.4 37Cl急性传染性肝炎、肝硬化和阻塞性黄疸型肝炎急性传染性肝炎、肝硬化和阻塞性黄疸型肝炎 GOT、GPT升升高高 l测定:测定:二硝基苯肼显色法二硝基苯肼显色法现在学习的是第6页,共92页74、乳酸脱氢酶、乳酸脱氢酶l乳酸脱氢酶(乳酸脱氢酶(lactate dehydroge
5、nase,LDH;EC1.1.1.27)催化乳酸脱氢生成丙酮酸的氧化还原酶)催化乳酸脱氢生成丙酮酸的氧化还原酶l测定:丙酮酸与测定:丙酮酸与2,4二硝基苯肼反应二硝基苯肼反应l正常情况正常情况 低,肝癌、急性肝炎、心肌梗塞低,肝癌、急性肝炎、心肌梗塞 活力增活力增强强现在学习的是第7页,共92页85、乳酸脱氢酶同工酶、乳酸脱氢酶同工酶l心肌梗塞、恶性贫血;心肌梗塞、恶性贫血;LDH1增高增高l白血病、肌肉萎缩;白血病、肌肉萎缩;LDH2增高增高l白血病、淋巴肉瘤、肝癌;白血病、淋巴肉瘤、肝癌;LDH3增高增高l转移性肝癌、结肠癌;转移性肝癌、结肠癌;LDH4增高增高l肝炎、原发性肝癌、脂肪肝、
6、心肌梗塞、外伤、骨折;肝炎、原发性肝癌、脂肪肝、心肌梗塞、外伤、骨折;LDH5增高增高现在学习的是第8页,共92页96、葡萄糖磷酸异构酶、葡萄糖磷酸异构酶l葡萄糖磷酸异构酶(葡萄糖磷酸异构酶(glucosephosphate isomerase,EC5.3.1.9)催化)催化6-磷酸葡萄糖生成磷酸葡萄糖生成6-磷酸果糖磷酸果糖 pH7.8 37Cl测定:果糖与间苯二酚测定:果糖与间苯二酚l急性肝炎;极度升高急性肝炎;极度升高l心肌梗塞、急性肾炎、脑溢血;显著升高心肌梗塞、急性肾炎、脑溢血;显著升高现在学习的是第9页,共92页107、胆碱酯酶、胆碱酯酶l胆碱酯酶(胆碱酯酶(cholinester
7、ase,EC3.1.1.8)催化胆碱)催化胆碱酯水解生成胆碱和有机酸酯水解生成胆碱和有机酸l测定:羟胺显色法测定:羟胺显色法l正常情况正常情况30-80单位单位l传染性肝炎、肝硬化、风湿、营养不良;活力下降传染性肝炎、肝硬化、风湿、营养不良;活力下降现在学习的是第10页,共92页118、端粒酶、端粒酶l端粒酶(端粒酶(telomerase)催化端粒合成和延伸的酶)催化端粒合成和延伸的酶l端粒酶是核糖核蛋白,蛋白质和核酸端粒酶是核糖核蛋白,蛋白质和核酸l通过端粒重复序列扩展法(通过端粒重复序列扩展法(TRAP)检测)检测l在人体正常细胞(除生殖细胞和干细胞),端粒酶的在人体正常细胞(除生殖细胞和
8、干细胞),端粒酶的生物合成和酶活性受到抑制,在分化较低的癌细胞中生物合成和酶活性受到抑制,在分化较低的癌细胞中活性高活性高现在学习的是第11页,共92页12酶酶 名名疾病与酶活力变化疾病与酶活力变化淀粉酶淀粉酶胰脏疾病,肾脏疾病时升高;肝病时下降胰脏疾病,肾脏疾病时升高;肝病时下降-谷氨酰转肽酶谷氨酰转肽酶原发性和继发性肝癌,活力增高至原发性和继发性肝癌,活力增高至200单位以上,阻塞性黄疸、单位以上,阻塞性黄疸、肝硬化、胆道癌等,血清中酶活力升高肝硬化、胆道癌等,血清中酶活力升高醛缩酶醛缩酶急性传染性肝炎、心肌梗塞,血清中酶活力显著升高急性传染性肝炎、心肌梗塞,血清中酶活力显著升高胃蛋白酶胃
9、蛋白酶胃癌,活力升高;十二指肠溃疡,活力下降胃癌,活力升高;十二指肠溃疡,活力下降磷酸葡糖变位酶磷酸葡糖变位酶肝炎、癌症,活力升高肝炎、癌症,活力升高山梨醇脱氢酶山梨醇脱氢酶急性肝炎,活力显著提高急性肝炎,活力显著提高脂肪酶脂肪酶急性胰腺炎,活力明显增高,胰腺癌、胆管炎患者,活力升高急性胰腺炎,活力明显增高,胰腺癌、胆管炎患者,活力升高肌酸磷酸激酶肌酸磷酸激酶心肌梗塞,活力显著升高;肌炎、肌肉创伤,活力升高心肌梗塞,活力显著升高;肌炎、肌肉创伤,活力升高-羟基丁酸脱氢酶羟基丁酸脱氢酶心肌梗塞、心肌炎,活力增高心肌梗塞、心肌炎,活力增高鸟氨酸氨基甲酰转移鸟氨酸氨基甲酰转移酶酶急性肝炎,活力急速增
10、高;肝癌,活力明显升高急性肝炎,活力急速增高;肝癌,活力明显升高葡萄糖氧化酶葡萄糖氧化酶测定血糖含量,诊断糖尿病测定血糖含量,诊断糖尿病亮氨酸氨肽酶亮氨酸氨肽酶肝癌、阴道癌、阻塞性黄疸,活力明显升高肝癌、阴道癌、阻塞性黄疸,活力明显升高现在学习的是第12页,共92页13(二)用酶测定体液中某些物质的变化(二)用酶测定体液中某些物质的变化诊断疾病诊断疾病l葡萄糖氧化酶葡萄糖氧化酶诊断糖尿病诊断糖尿病l葡萄糖氧化酶和过氧化物酶葡萄糖氧化酶和过氧化物酶诊断糖尿病诊断糖尿病l尿素酶尿素酶诊断肝、肾病变诊断肝、肾病变l胆固醇氧化酶胆固醇氧化酶高血脂症高血脂症l谷氨酰胺酶谷氨酰胺酶肝硬化、肝昏迷肝硬化、肝
11、昏迷lDNA聚合酶聚合酶基因诊断、癌基因基因诊断、癌基因l酶标免疫检测法酶标免疫检测法抗体、抗原抗体、抗原现在学习的是第13页,共92页14二、在治疗疾病方面的应用二、在治疗疾病方面的应用l1、蛋白酶、蛋白酶消化剂、消炎剂、高血压消化剂、消炎剂、高血压l2、-淀粉酶淀粉酶淀粉引起的消化不良淀粉引起的消化不良l3、脂肪酶、脂肪酶脂肪引起的消化不良脂肪引起的消化不良l4、溶菌酶、溶菌酶抗菌、消炎、带状疱疹、流感抗菌、消炎、带状疱疹、流感l5、超氧化物歧化酶、超氧化物歧化酶抗氧化、抗衰老、皮肌炎、结抗氧化、抗衰老、皮肌炎、结肠炎肠炎l6、L-天冬酰胺酶天冬酰胺酶治疗癌症、特别是白血病治疗癌症、特别是
12、白血病现在学习的是第14页,共92页15l7、尿激酶、尿激酶血栓类、风湿性关节炎血栓类、风湿性关节炎l8、纳豆激酶、纳豆激酶溶栓溶栓l9、凝血酶、凝血酶出血性疾病出血性疾病l10、组织纤溶酶原激活剂、组织纤溶酶原激活剂血栓血栓l11、乳糖酶、乳糖酶乳糖引起的腹胀、腹泻乳糖引起的腹胀、腹泻l12、核酸类酶、核酸类酶RNA病毒病毒二、在治疗疾病方面的应用二、在治疗疾病方面的应用现在学习的是第15页,共92页16酶酶 名名来来 源源用用 途途纤维素酶纤维素酶霉菌霉菌治疗消化不良,食欲不振治疗消化不良,食欲不振链激酶链激酶链球菌链球菌治疗血栓性静脉炎,咳痰,血肿,下出血,治疗血栓性静脉炎,咳痰,血肿,
13、下出血,骨折骨折青霉素酶青霉素酶蜡状芽孢杆菌蜡状芽孢杆菌治疗青霉素引起的过敏反应治疗青霉素引起的过敏反应胶原酶胶原酶细菌细菌分解胶原,消炎,化脓,脱痂,治疗溃疡分解胶原,消炎,化脓,脱痂,治疗溃疡右旋糖酐酶右旋糖酐酶微生物微生物预防龋齿预防龋齿 胆碱酯酶胆碱酯酶细菌细菌治疗皮肤病,支气管炎,气喘治疗皮肤病,支气管炎,气喘弹性蛋白酶弹性蛋白酶胰脏胰脏治疗动脉硬化,降血脂治疗动脉硬化,降血脂其他现在学习的是第16页,共92页17三、在药物制造方面的应用三、在药物制造方面的应用l1、青霉素酰化酶制造半合成抗生素、青霉素酰化酶制造半合成抗生素l2、-酪氨酸酶制造多巴酪氨酸酶制造多巴l3、核苷磷酸化酶制
14、造阿糖腺苷、核苷磷酸化酶制造阿糖腺苷l4、无色杆菌蛋白酶制造人胰岛素、无色杆菌蛋白酶制造人胰岛素l5、多核苷酸磷酸化酶生产聚肌胞、多核苷酸磷酸化酶生产聚肌胞l6、-D-葡萄糖苷酶制造抗肿瘤人参皂甙葡萄糖苷酶制造抗肿瘤人参皂甙现在学习的是第17页,共92页18酶酶 名名主要来源主要来源用用 途途青霉素酰化酶青霉素酰化酶微生物微生物制造半合成青霉素和头孢菌素制造半合成青霉素和头孢菌素11-羟化酶羟化酶霉菌霉菌制造氢化可的松制造氢化可的松L-酪氨酸转氨酶酪氨酸转氨酶细菌细菌制造多巴(制造多巴(L-二羟苯丙氨酸)二羟苯丙氨酸)-酪氨酸酶酪氨酸酶植物植物制造多巴制造多巴-甘露糖苷酶甘露糖苷酶链霉菌链霉菌
15、制造高效链霉素制造高效链霉素核苷磷酸化酶核苷磷酸化酶微生物微生物生产阿拉伯糖腺嘌呤核苷(阿糖腺苷)生产阿拉伯糖腺嘌呤核苷(阿糖腺苷)酰基氨基酸水解酶酰基氨基酸水解酶微生物微生物生产生产L-氨基酸氨基酸5-磷酸二酯酶磷酸二酯酶桔青霉等微生物桔青霉等微生物生产各种核苷酸生产各种核苷酸多核苷酸磷酸化酶多核苷酸磷酸化酶微生物微生物生产聚肌胞,聚肌苷酸生产聚肌胞,聚肌苷酸无色杆菌蛋白酶无色杆菌蛋白酶细菌细菌由猪胰岛素(由猪胰岛素(Ala-30)转变为人胰岛素)转变为人胰岛素(Thr-30)核糖核酸酶核糖核酸酶微生物微生物生产核苷酸生产核苷酸蛋白酶蛋白酶动物、植物、微生动物、植物、微生物物生产生产L-氨基
16、酸氨基酸-葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶黑曲霉等微生物黑曲霉等微生物生产人参皂甙生产人参皂甙-Rh2三、在药物制造方面的应用三、在药物制造方面的应用现在学习的是第18页,共92页19第二节第二节 在食品方面的应用在食品方面的应用l一、在食品保鲜方面的应用一、在食品保鲜方面的应用l二、在食品生产方面的应用二、在食品生产方面的应用l三、在食品添加剂生产方面的应用三、在食品添加剂生产方面的应用l四、在改善食品品质和风味方面的应用四、在改善食品品质和风味方面的应用现在学习的是第19页,共92页20一、在食品保鲜方面的应用一、在食品保鲜方面的应用l食品除氧保鲜(葡萄糖氧化酶)食品除氧保鲜(葡萄糖氧化酶)lO2葡萄
17、糖葡萄糖H2O2l蛋类制品脱糖保鲜(葡萄糖氧化酶)蛋类制品脱糖保鲜(葡萄糖氧化酶)l食品灭菌保鲜(溶菌酶)食品灭菌保鲜(溶菌酶)现在学习的是第20页,共92页21二、在食品生产方面的应用二、在食品生产方面的应用l1、酶在淀粉类食品生产方面的应用、酶在淀粉类食品生产方面的应用l2、酶在蛋白类食品生产方面的应用、酶在蛋白类食品生产方面的应用l3、酶在果蔬类食品生产方面的应用、酶在果蔬类食品生产方面的应用现在学习的是第21页,共92页221、在淀粉类食品生产方面的应用、在淀粉类食品生产方面的应用l(1)葡萄糖的生产)葡萄糖的生产 淀粉淀粉-淀粉酶淀粉酶糊精糊精糖化酶糖化酶葡萄糖葡萄糖 糖化酶(葡萄糖
18、淀粉酶):糖化酶(葡萄糖淀粉酶):-1,4糖苷键;糖苷键;-1,6糖苷键糖苷键 -1,3糖苷键糖苷键现在学习的是第22页,共92页23l(2)果葡糖浆的生产)果葡糖浆的生产l葡萄糖葡萄糖葡萄糖异构酶葡萄糖异构酶果糖果糖l葡萄糖异构酶(木糖异构酶):催化葡萄糖异构酶(木糖异构酶):催化D-木糖、木糖、D-葡葡萄糖、萄糖、D-核糖等醛糖转化为酮糖核糖等醛糖转化为酮糖l果糖果糖41%,葡萄糖,葡萄糖52%,低聚果糖,低聚果糖6%现在学习的是第23页,共92页24l(3)饴糖、麦芽糖的生产)饴糖、麦芽糖的生产l大米糯米大米糯米+大麦芽(大麦芽(-淀粉酶、淀粉酶、-淀粉酶)支链淀粉酶淀粉酶)支链淀粉酶饴
19、饴糖糖现在学习的是第24页,共92页25l(4)糊精、麦芽糊精的生产)糊精、麦芽糊精的生产l淀粉低程度水解产物淀粉低程度水解产物l用于食品增稠剂、填充剂和吸收剂用于食品增稠剂、填充剂和吸收剂l工艺流程:工艺流程:l淀粉淀粉调浆调浆加酶水解加酶水解过滤过滤脱色脱色离子交换除离子交换除去离子去离子浓缩浓缩喷雾干燥喷雾干燥产品产品现在学习的是第25页,共92页26l(5)环状糊精的生产)环状糊精的生产l6-12个葡萄糖单位以个葡萄糖单位以-1,4糖苷键连接而成环状结构糖苷键连接而成环状结构l-,-,-环状糊精:环状糊精:6、7、8个葡萄糖个葡萄糖l生产工艺:生产工艺:-环状糊精环状糊精l淀粉浆淀粉浆
20、加热糊化加热糊化冷却冷却加环状糊精葡萄糖苷转移加环状糊精葡萄糖苷转移酶(酶(CGT)终止反应终止反应加加-淀粉酶液化淀粉酶液化脱色脱色过过滤滤浓缩浓缩结晶结晶分离分离干燥干燥产品产品现在学习的是第26页,共92页27蛋白酶,蛋白酶,-淀粉酶,糖化发芽的大麦淀粉酶,糖化发芽的大麦磨碎磨碎制麦芽浆制麦芽浆加啤酒花,煮麦芽汁加啤酒花,煮麦芽汁冷却,去酒花残渣冷却,去酒花残渣发酵发酵 蛋白酶,糖化酶,蛋白酶,糖化酶,-葡聚糖酶葡聚糖酶调理啤酒调理啤酒 巴氏灭菌巴氏灭菌 成品啤酒成品啤酒啤酒酿造啤酒酿造现在学习的是第27页,共92页28酶酶用途用途-淀粉酶淀粉酶生产糊精、麦芽糊精生产糊精、麦芽糊精-淀粉
21、酶、糖化酶淀粉酶、糖化酶生产淀粉水解糖、葡萄糖生产淀粉水解糖、葡萄糖-淀粉酶、淀粉酶、-淀粉酶、支链淀粉酶淀粉酶、支链淀粉酶生产饴糖、麦芽糖、啤酒酿造生产饴糖、麦芽糖、啤酒酿造支链淀粉酶支链淀粉酶生产直链淀粉生产直链淀粉糖化酶、支链淀粉酶糖化酶、支链淀粉酶生产葡萄糖生产葡萄糖-淀粉酶、糖化酶、葡萄糖异构酶淀粉酶、糖化酶、葡萄糖异构酶生产果葡糖浆、高果糖浆、果糖生产果葡糖浆、高果糖浆、果糖-淀粉酶、环状糊精葡萄糖苷酶淀粉酶、环状糊精葡萄糖苷酶生产环状糊精生产环状糊精酶在淀粉类食品生产中的应用酶在淀粉类食品生产中的应用现在学习的是第28页,共92页292、在蛋白类食品生产方面的应用、在蛋白类食品生
22、产方面的应用l(1)水解蛋白的生产)水解蛋白的生产蛋白胨、氨基酸、多肽蛋白胨、氨基酸、多肽l(2)氨基酸的生产)氨基酸的生产20种氨基酸种氨基酸l(3)明胶的生产)明胶的生产碱性蛋白酶碱性蛋白酶l(4)干酪的生产)干酪的生产l(5)肉类的嫩化)肉类的嫩化l(6)低乳糖奶的生产)低乳糖奶的生产现在学习的是第29页,共92页30(4)干酪的生产)干酪的生产l干酪又称奶酪,酪蛋白凝固而成的一种营养价值高、容易消干酪又称奶酪,酪蛋白凝固而成的一种营养价值高、容易消化吸收的食品,其主要成分是蛋白质和乳脂化吸收的食品,其主要成分是蛋白质和乳脂l乳酸菌发酵乳酸菌发酵/加入凝乳蛋白酶加入凝乳蛋白酶l凝乳酶水解
23、凝乳酶水解-酪蛋白,在酸性环境下,钙离子使酪蛋白凝固,酪蛋白,在酸性环境下,钙离子使酪蛋白凝固,再经切块加热压榨后熟化而成再经切块加热压榨后熟化而成l工艺过程:工艺过程:原料乳原料乳灭菌灭菌加入钙离子和凝乳蛋白酶加入钙离子和凝乳蛋白酶凝固蛋白凝固蛋白切碎、搅拌切碎、搅拌排出乳清排出乳清压榨成形压榨成形加盐加盐成熟(半成熟(半年)年)干酪干酪现在学习的是第30页,共92页31(5)肉类的嫩化)肉类的嫩化l决定肉硬度的最主要的因素是肌原纤维和结缔组织,而肉的总嫩度决定肉硬度的最主要的因素是肌原纤维和结缔组织,而肉的总嫩度基本上是由结缔组织中胶原蛋白含量所决定基本上是由结缔组织中胶原蛋白含量所决定l
24、木瓜蛋白酶木瓜蛋白酶 l工业上嫩化肉的方式有两种工业上嫩化肉的方式有两种l浸渍法浸渍法l宰前注射法宰前注射法现在学习的是第31页,共92页32(6)低乳糖奶的生产)低乳糖奶的生产l乳糖是哺乳动物乳汁中特有的糖类,无甜味、溶解度低乳糖是哺乳动物乳汁中特有的糖类,无甜味、溶解度低l-半乳糖苷酶使乳糖水解为葡萄糖和半乳糖半乳糖苷酶使乳糖水解为葡萄糖和半乳糖 l工艺:工艺:l鲜奶鲜奶灭菌灭菌冷却冷却加入乳糖酶加入乳糖酶加热灭菌加热灭菌低低乳糖奶乳糖奶 现在学习的是第32页,共92页333、在果蔬类食品生产方面的应用、在果蔬类食品生产方面的应用l(1)柑橘制品去苦味)柑橘制品去苦味l(2)柑橘罐头防止白
25、色混浊)柑橘罐头防止白色混浊l(3)果蔬制品的脱色)果蔬制品的脱色l(4)酶在果汁生产中的应用)酶在果汁生产中的应用l(5)酶在果酒生产中的应用)酶在果酒生产中的应用现在学习的是第33页,共92页34(1)柑橘制品去苦味)柑橘制品去苦味l柑橘中含有柚苷而有苦味柑橘中含有柚苷而有苦味l柚苷酶作用水解生成鼠李糖和无苦味的柚配质柚苷酶作用水解生成鼠李糖和无苦味的柚配质-7-葡萄糖苷葡萄糖苷l柑橘罐头生产时将柑橘和含有一定量柚苷酶的糖水一起装柑橘罐头生产时将柑橘和含有一定量柚苷酶的糖水一起装罐,密封后升温至柚苷酶适宜温度范围,保温,再升温至罐,密封后升温至柚苷酶适宜温度范围,保温,再升温至灭菌温度。灭
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